CD28 C端Y218位点的磷酸化调节CAR-T细胞的IL-2分泌及治疗效果

《Molecular Therapy》：C-terminus CD28 phosphorylation, Y218, modulates IL-2 secretion and therapeutic effect of CAR-T cells

　　

摘要

CD28是多种第二代嵌合抗原受体（CAR）T细胞中的一种共刺激组分，提供对T细胞增殖、存活和细胞因子分泌至关重要的信号。然而，CD28胞内各特异性基序对CAR-T细胞功能的具体贡献尚未被完全理解。在此，我们鉴定出CD28胞质结构域中的酪氨酸218（Y218）是一个关键的调控位点，并证明其磷酸化对最佳CAR-T细胞活性至关重要。通过使用218F突变体，我们显示Y218磷酸化的丧失会导致IL-2产生受损并完全消除抗肿瘤效果。对218F CAR-T细胞的转录组分析揭示了IL-17A、IL-17F及相关细胞因子表达的增加，提示其向促炎性Th17样表型转变，这可能有助于功能失调的发生。在机制层面，我们证明白细胞介素-2诱导的T细胞激酶（ITK）介导了Y218的磷酸化。为了将这一机制认识转化为改善CAR设计，我们构建了一种新型CAR，其中嵌入了合成的ITK结合基序（PYRP）。该新型设计增强了ITK的招募，增加了Y218磷酸化，提高了IL-2分泌，并在体内改善了抗肿瘤效果。我们的研究结果强调了Y218磷酸化在调节CAR-T细胞命运中的功能意义，并揭示了一种通过靶向激酶招募来精细调控CAR信号传导以增强治疗效果的策略。

图形摘要