《Microchemical Journal》：AQbD-based stability-indicating RP-HPLC method as common analytical platform for quantification of ezetimibe in combination with atorvastatin or Pitavastatin across marketed tablet formulations
编辑推荐：
•一种统一的RP-HPLC方法，用于定量含有依折麦布和阿托伐他汀或匹伐他汀的市售片剂。•通过系统的风险评估和设计优化（DoE）提高了对方法的理解。•在整个方法开发、优化和验证过程中都体现了可持续性。•该方法展示了稳定性指标，并通过了ICH Q2(R2)的验证。•通过多种可持续性工
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一种统一的RP-HPLC方法，用于定量含有依折麦布和阿托伐他汀或匹伐他汀的市售片剂。
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通过系统的风险评估和设计优化（DoE）提高了对方法的理解。
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在整个方法开发、优化和验证过程中都体现了可持续性。
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该方法展示了稳定性指标，并通过了ICH Q2(R2)的验证。
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通过多种可持续性工具确认了该方法在环境和实际应用方面的适用性，适用于常规质量控制。
引言
阿托伐他汀钙（ATV），化学式为钙双[(3R,5R)-7-[2-(4-氟苯基)-3-苯基-4-(苯基羰基)-5-(丙-2-基)-1H-吡咯-1-基]-3,5-二羟基庚酸]，以及匹伐他汀钙（PIT），化学式为钙双[(3R,5S,6E)-7-[2-环丙基-4-(4-氟苯基)喹啉-3-基]-3,5-二羟基庚-6-烯酸]，属于他汀类药物家族，能够抑制HMG-CoA还原酶。这些药物是降低家族性高胆固醇患者低密度脂蛋白胆固醇的一线治疗药物，在降低与高胆固醇相关的心血管疾病风险方面发挥着重要作用。[1] 依折麦布（EZE），化学式为(3R,4S)-1-(4-氟苯基)-3-[(3S)-3-(4-氟苯基)-3-羟基丙基]-4-(4-羟基苯基)氮杂环丁烷-2-酮，具有抑制胆固醇吸收的作用，通常与他汀类药物联合使用以产生协同效果，用于治疗高胆固醇。自本世纪以来，心血管疾病已成为印度的主要死亡原因。随着全球COVID-19大流行的发生，年轻人群中心血管疾病的发病率呈指数级上升。[2]
监管机构已经批准了含有依折麦布的固定剂量组合（FDCs），以增强他汀类药物的降胆固醇效果。其中，ATV-EZE组合已在印度市场广泛销售多年，有多种剂量比例。相比之下，PIT-EZE FDCs是近期才获得的批准产品，目前仅有有限的剂量和配方选择。[3]
在药物分析中日益关注的环境问题加速了对可持续和环保分析方法的需求。绿色分析化学（GAC）和白色分析化学（WAC）原则的发展进一步强调了减少溶剂使用、降低有害废物和提高能源效率的必要性。尽管GAC和WAC有共同的目标，但将两者相结合突显了在分析方法开发中平衡可持续性与实际适用性的重要性。[4]，[5] HPLC仍然是药品质量评估的基石，最新的ICH Q2/Q14指南提倡采用设计驱动的分析质量（AQbD）方法，以提高方法的稳健性、可靠性和合规灵活性。
已有许多分析方法用于测定依折麦布与他汀类药物（ATV-EZE和PIT-EZE）的混合物，例如HPLC、TLC和UHPLC。[6]，[7]，[8]，[9]，[10]，[11]，[12]，[13]，[14]，[15]，[16]，[17]，[18]，[19]，[20]，[21]，[22]，[23]，[24]，[25]，[26]，[27]，[28]，[29]，[30]，[31]，[32]。虽然这些方法为特定的二元组合提供了有用的分析程序，但本研究通过建立一个通用的色谱平台，在相同的色谱条件下同时测定依折麦布与ATV或PIT的混合物，满足了更广泛的分析需求。因此，本研究的新颖之处在于在单一通用分析平台上综合应用了基于AQbD的风险评估、多变量优化、方法和开发（MODR）建立、稳健性评估、稳定性指标评估、市售制剂的适用性评估以及全面的可持续性评估。这种方法提供了一种科学可控且广泛适用的替代方案，无需分别开发针对每对药物的具体方法，同时保持了令人满意的色谱性能、稳健性和适合常规药品质量控制的特性。表S1提供了所提出方法与以往报道的依折麦布-他汀类药物组合的色谱方法在色谱条件、分析性能、验证特性和可持续性方面的直接比较，突显了所提出方法在分析范围和基于AQbD的综合性及可持续性方面的优势。
传统上，分析科学家们针对单一药物或其组合开发并验证HPLC方法，导致方法开发的重复性、时间和资源的消耗增加，以及大量的化学废物产生。相比之下，本研究引入了一个通用的分析平台，使用单一HPLC方法即可用于多种制剂的分析，消除了对含有ATV、EZE和PIT的单独片剂以及市场上现有的各种ATV-EZE和PIT-EZE FDCs的单独方法的需求。所提出的方法能够准确、可重复地同时测定所有三种分析物，无论是在单个片剂配方中还是在FDCs配方中。该方法采用了简化的流动相系统，并且在分析时间（少于15分钟）上进行了优化，同时不牺牲色谱分辨率和效率。重要的是，使用粒径更小的短柱（Synergi C18，4微米，80埃，150 × 4.6毫米）减少了溶剂消耗和废物产生，符合GAC和WAC原则。此外，应用AQbD方法优化减少了实验次数，从而降低了化学消耗和实验室废物。[33]，[34]，[35]，[36]，[37]。
在此背景下，本研究旨在开发并验证一种稳健的、具有稳定性指示功能的、基于AQbD的RP-HPLC方法，作为在相同色谱条件下定量测定依折麦布与ATV或PIT及其相应单独片剂混合物的通用色谱平台。该方法结合了AQbD原则、强制降解研究和全面的可持续性评估，以确保科学严谨性、环境责任感和在常规药品质量控制中的广泛适用性。
章节摘录
化学品和试剂
纯阿托伐他汀（100.1% w/w，批次号4001872922）、匹伐他汀（99.5% w/w，批次号PTCIMTJ04D）和依折麦布（99.7% w/w，批次号EZm0261021）由Zydus Lifesciences Ltd.（古吉拉特邦艾哈迈达巴德）免费提供。HPLC级乙腈（ACN）、甲醇、甲酸、正磷酸（OPA）、三乙胺（TEA）和水从Merck（印度孟买）采购。
仪器和色谱开发
RP-HPLC方法是在Shimadzu LC-20 CE UFLC系统（日本京都Shimadzu公司）上开发的，该系统采用了四级梯度分离模式。
早期的HPLC方法开发
初步试验旨在确定适合分离匹伐他汀、依折麦布和阿托伐他汀的色谱条件。最初的开发尝试采用了针对二元组合（ATV-EZE；PIT-EZE）已发布的条件。然而，当应用于三元混合物时，由于这些条件的疏水性相似和保留时间重叠，导致选择性不足。等度洗脱下的分辨率不足表明之前的方法存在问题。
结论
本研究成功建立了一种稳健的、具有稳定性指示功能的基于AQbD的RP-HPLC方法，作为在相同色谱条件下定量测定依折麦布与ATV或PIT及其相应单独片剂混合物的通用色谱平台。通过采用符合ICH Q14建议的AQbD框架，方法开发从经验性的试错过程转变为结构化的过程。
AI使用声明
作者声明使用Microsoft Office、QuillBot、Grammarly和生成式AI等工具来改进手稿的清晰度、语法和语言，以及图形摘要。
CRediT作者贡献声明
Vyoma Patel：负责撰写初稿、软件开发、方法设计、实验研究、正式分析。Mrunali Patel：负责审稿与编辑、可视化、验证、资源管理、项目协调、数据整理、概念构思。Rashmin Patel：负责撰写初稿、验证、监督、软件开发、资源管理、项目协调、数据整理、概念构思。
利益冲突声明
作者声明他们没有已知的会影响了本文研究的财务利益或个人关系。
致谢
作者感谢印度古吉拉特邦昌加的Ramanbhai Patel药学院和Charotar科学技术大学（CHARUSAT）对这项研究工作的支持。
Vyoma Patel|Mrunali Patel|Rashmin Patel
