《The Veterinary Journal》：Airway Lipid Mediators in Horses: Baseline Bronchoalveolar Lavage Fluid Profiles and Effects of EPA and DHA-rich Microalgae Oil Supplementation
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研究人员调查了膳食ω-3多不饱和脂肪酸（n-3 PUFAs）二十碳五烯酸（EPA）和二十二碳六烯酸（DHA）如何影响马的气道炎症、支气管肺泡灌洗液（BALF）脂质介质和红细胞脂肪酸。BALF中性粒细胞增多是气道炎症的标志，通常与马哮喘相关。长链n-3 PUFA
研究人员调查了膳食ω-3多不饱和脂肪酸（n-3 PUFAs）二十碳五烯酸（EPA）和二十二碳六烯酸（DHA）如何影响马的气道炎症、支气管肺泡灌洗液（BALF）脂质介质和红细胞脂肪酸。BALF中性粒细胞增多是气道炎症的标志，通常与马哮喘相关。长链n-3 PUFAs EPA和DHA是必需营养素，也是调节炎症反应的促消退介质（SPMs）的前体。在这项前瞻性现场试验中，研究人员将马分配到三种饮食，包括补充EPA和DHA的饲料，持续7.5周。研究人员在饲养期前后采集了血液样本和BALF。研究人员通过细胞学评估BALF炎症细胞，通过液相色谱-串联质谱法评估脂质介质，通过脂肪酸甲酯气相色谱法评估红细胞脂肪酸。研究人员使用线性混合效应模型分析数据。EPA和DHA补充与BALF中性粒细胞百分比降低相关，而未补充对照组的中性粒细胞水平升高。这一变化伴随红细胞EPA和DHA及n-3/n-6 PUFA比率的升高。本研究提供了临床健康马BALF脂质介质谱的首次LC-MS/MS描述之一，其特征是DHA来源的脂质介质和途径标志物占优势。补充主要影响前体可用性，而非下游SPM产生。BALF中的maresins（MaR）似乎随季节变化而变化。
马气道脂质介质：BALF基线谱及EPA/DHA微藻油补充的影响（论文解读）
研究背景：马哮喘是一种慢性炎症性气道疾病，以中性粒细胞性气道炎症和炎症消退受损为特征。支气管肺泡灌洗液（BALF）中中性粒细胞增多是气道炎症的关键诊断标志。现有治疗主要依赖抗炎药物和环境管理，因此亟需阐明促进内源性炎症消退的机制。促消退介质（SPMs）是来源于ω-3多不饱和脂肪酸（n-3 PUFAs）和ω-6多不饱和脂肪酸（n-6 PUFAs）的脂质介质，其中二十碳五烯酸（EPA）和二十二碳六烯酸（DHA）是SPMs的重要前体，分别可生成消散素（resolvins）、保护素（protectins）和maresins（MaR）等。膳食补充EPA和DHA有望增强SPMs产生，为气道炎症提供新的干预策略。然而，马气道内SPMs的产生尚未被系统表征，既往研究多聚焦于个别促炎类二十烷酸，循环SPMs的研究也十分有限。由于SPMs生物合成具有组织特异性，明确健康马气道内脂质介质基线谱，对开发PUFA类靶向消退疗法至关重要。基于此，研究人员开展了这项前瞻性现场试验。研究结果发表于《The Veterinary Journal》。
研究设计与目的：研究人员纳入30匹临床健康马，分为三组：EPA/DHA微藻油补充组（OMEGA，n=15）、等热量对照补饲组（CTRL，n=7）和未补饲参考组（NEG，n=8），干预7.5周。通过前后两次支气管镜采集BALF和血液，旨在表征健康马BALF脂质介质基线谱，并评估补充EPA/DHA对气道炎症细胞和脂质介质网络的影响。
主要技术方法：研究对象为芬兰维罗拉赫蒂某职业学院马厩的30匹马（16匹去势公马，14匹母马；年龄4～20岁；包括温血马16匹、芬兰马12匹、骑乘用矮马1匹、爱沙尼亚马1匹）。采用前瞻性对照现场试验，OMEGA组每日通过浓缩料补充约8g EPA+DHA（来自裂殖壶菌Schizochytrium sp.微藻油），CTRL组饲喂含菜籽油的等热量对照料，NEG组不喂浓缩料，共7.5周。通过支气管镜回收BALF，使用液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）定量脂质介质，使用气相色谱-火焰离子化检测器（GC-FID）分析红细胞脂肪酸甲酯（FAME）。所有数据采用线性混合效应模型分析，并校正年龄协变量。
研究结果：
（1）研究人群与方案依从性：30匹马全部完成试验。除两匹马分别因掌下脓肿和颌下脓肿短暂（7天和2天）中断补饲外，其余均耐受良好；这两匹马的红细胞EPA/DHA水平仍在其组内范围，且主成分分析（PCA）未显示为离群值，故保留在分析中。
（2）环境条件：研究期间（1月至3月）为芬兰冬季，月均气温在-3.98℃至1.78℃之间，运动场持续积雪覆盖。
（3）临床发现与马匹特征：所有马匹在基线（1月）和随访（3月）时体格检查、气道内镜和血液学均无异常，未出现呼吸道疾病临床表现。三组年龄、体重和体况评分（BCS）相当；但NEG组均为芬兰母马，来自同一所有者群体，因此品种和性别分布与另两组不同。
（4）气管冲洗细胞学：气管冲洗液中性粒细胞百分比在1月至3月间保持稳定，未观察到月份或月份×组别交互效应；仅NEG组基线时与另两组存在差异。
（5）BALF炎症细胞群体及其对喂食的反应：BALF回收体积在不同组间有差异，NEG组低于OMEGA和CTRL组。BALF中性粒细胞百分比存在显著的月份×组别交互作用（p=0.023）：OMEGA组从1月到3月显著下降（t=2.34，p=0.027，d=0.86），NEG组显著上升（t=-2.94，p=0.007，d=-1.47），CTRL组无明显变化（p=0.59）。巨噬细胞在NEG组表现出下降趋势，肥大细胞无组间或时间差异。
（6）脂肪酸：饲料分析显示OMEGA补饲料中含EPA+DHA共1.8±0.18 wt%，而CTRL料未检出。补充后，OMEGA组红细胞EPA、DHA及n-3/n-6多元不饱和脂肪酸（PUFA）比率均显著升高（EPA和n-3/n-6的月份×组别交互p<0.0001；DHA组内变化p=0.003）。花生四烯酸（AA）在各组间无变化。
（7）PCA结果：对BALF脂质介质进行主成分分析，未发现组间明显的分离聚类，表明个体间变异性大于组间差异。
（8）基线BALF脂质介质谱：在1月基线样本中，检测到的主要脂质介质类别为羟基二十二碳六烯酸（HDHA，均值17.42 pg/样本）、D系列消退素（RvD，8.54 pg/样本）和2系列前列腺素（PG2，6.50 pg/样本），总SPMs均值为9.60 pg/样本。n-3来源介质（45.32 pg/样本）高于n-6来源（7.29 pg/样本）。保护素、RvE和5系列白三烯仅在1～2匹马中检出，所有样本均未检出3系列前列腺素和3系列血栓烷。
（9）BALF中n-3/n-6衍生脂质介质的时间与组别平衡：仅OMEGA组的BALF脂质介质n-3/n-6比值在1月至3月期间显著升高（t=-2.88，p=0.008，d=-1.05），其余两组无显著变化；组间比较在3月无显著差异。
（10）BALF促消退介质的时间与组别变化：总SPMs浓度无显著的时间、组别或交互效应。HDHA在OMEGA组显著增加（t=-2.86，p=0.008，FDR q=0.03，d=-1.04）。RvD整体呈下降趋势（p=0.005），OMEGA和CTRL组均降低，NEG组无变化。MaR在全部三组均显著增加（OMEGA：p=0.001；CTRL：p=0.005；NEG：p=0.048），提示季节性影响。
（11）花生四烯酸来源介质：HETE（羟基二十碳四烯酸）仅NEG组随时间显著增加（t=-2.72，p=0.011，q=0.04）；PG2总体呈下降趋势，CTRL组显著下降。
（12）BALF中性粒细胞水平与脂质介质的关系：较高的MaR和HETE浓度与BALF中性粒细胞百分比正相关，且具有时间依赖性（月份交互均p<0.05）；总SPMs、HDHA、RvD、HEPE和PG2与中性粒细胞无显著关联。
（13）红细胞脂肪酸状态与BALF脂质介质的关系：全身红细胞n-3/n-6 PUFA比率与BALF脂质介质n-3/n-6比率呈正趋势（p=0.09），NEG组该关联较弱。HDHA、MaR、总SPMs和RvD与全身n-3/n-6存在时间或组别依赖性关联，而LX4、HEPE、HETE和PG2无关联。
讨论总结：本研究表明，在临床健康马中，膳食EPA/DHA补充可降低BALF中性粒细胞百分比，并伴随循环EPA和DHA水平增加，证实了饮食干预的系统性效应。研究首次提供了健康马BALF脂质介质谱的LC-MS/MS描述，以DHA来源介质（如HDHA）为主，与人类气道健康状态相似。然而，补充并未如预期那样显著提高下游活性SPMs（如RvD和MaR），而是主要改变了前体HDHA及n-3
