从存储柜到PlasmaBag：运用等离子技术验证移动式内窥镜存储系统

《Microbiology Spectrum》：From cabinet to PlasmaBag: validating mobile endoscope storage with plasma technology

　　

本研究旨在依据EN 16442:2015标准中定义的测试方案（通常用于验证固定式内窥镜存储柜），评估移动式干燥与存储系统PlasmaTYPHOON+/PlasmaBAG（Plasmabiotics）的微生物学性能。研究人员采用铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）悬液（浓度介于1.5×10³～5.0×10³ CFU/mL）对一系列内窥镜进行人工污染。内窥镜经PlasmaTYPHOON+装置干燥后，储存于一次性PlasmaBAG中，储存时长从12 h至744 h（31天）。在每个时间点，使用经过验证的回收方法进行微生物学取样，并将结果与阳性对照进行比较。所有经PlasmaTYPHOON+干燥并储存于PlasmaBAG中的内窥镜，在整个744 h储存期内残余污染指数始终保持阴性。相比之下，未经干燥而直接储存的内窥镜污染水平逐渐增加，最高达5.2 log₁₀ CFU/内窥镜。干燥测试证实，经PlasmaTYPHOON+处理后所有通道均无残留水分。将EN 16442方案应用于该移动系统表明，PlasmaTYPHOON+/PlasmaBAG能够对内窥镜实现有效干燥和长期微生物学保护。这些发现支持将EN 16442性能标准扩展至移动式存储技术，并验证了其整合到常规再处理流程中的可行性。该系统还为内窥镜维护后的安全运输提供了有前景的应用。

**论文解读：移动式等离子干燥/存储系统在内窥镜再处理中的微生物学验证**

**研究背景与目的**
内窥镜相关感染暴发已在文献中多次报道，常与再处理流程失误、器械设计复杂或器械损伤导致去污不彻底有关。内窥镜再处理包含七步：预清洗、清洗、漂洗、高水平消毒、终末漂洗、干燥和存储。其中干燥与存储两个环节长期被忽视，不同指南对干燥时机和方式的要求不一致，临床上普遍存在干燥不充分或未垂直存放等问题。干燥不充分会使通道内存留的病原体在存储期间存活并增殖，甚至形成生物膜。传统干燥方法（如过滤压缩空气、乙醇冲洗）仅能部分去除内部管道中的残留水分，而自动化干燥系统则表现出明显优势。在存储方面，固定式内窥镜存储柜可依据EN 16442:2015标准进行验证，维持热敏性内窥镜在存储期间的微生物质量；但该标准并不涵盖使用化学剂的系统，也不包括PlasmaTYPHOON+这类采用单次使用袋的个体化存储技术。法国卫生与预防部2023年11月发布的指南建议，将EN 16442的相关要求和测试方案应用于此类个体化存储单元的验证。本研究旨在评估EN 16442测试方案能否用于移动式个体化存储系统，并验证PlasmaTYPHOON+/PlasmaBAG系统能否达到与标准要求相当的微生物安全水平。该论文发表在《Microbiology Spectrum》。

**主要技术方法**
研究人员依据EN 16442附录E的微生物学测试方案，选取了10种不同品牌和类型的内窥镜，包括结肠镜、胃镜、超声内镜、支气管镜和乙状结肠镜，以铜绿假单胞菌CIP 103467悬液人工污染内窥镜通道。污染后经PlasmaTYPHOON+装置干燥，将内窥镜装入一次性PlasmaBAG并密封，分别储存12、24、48、168、720和744 h。各时间点用含中和剂和表面活性剂的取样液冲洗各通道，结合倾注平板法和0.45 μm滤膜过滤法计数存活微生物。阳性对照组的内窥镜不经过干燥和PlasmaBAG存储，仅用无菌巾包裹存放。干燥测试则依据EN 16442，用压缩空气（正压至120 kPa）吹过各通道，观察试纸有无湿痕。试验计算残余污染指数Eint = log₁₀(X_n) ? log₁₀(B)，其中X_n为存储后回收的活菌数，B为储存前理论微生物负荷量。

**研究结果**

**1. 超声内镜（OLYMPUS GF-UM160）的微生物学表现**
在阳性对照条件下，内窥镜不经干燥而直接无菌巾包裹储存时，平均Eint随时间增加，从12 h的0.72 ± 0.33 log₁₀升至720 h的5.21 ± 0.04 log₁₀，744 h降至3.15 ± 0.02 log₁₀。相反，经PlasmaTYPHOON+干燥并储存于PlasmaBAG后，储存12 h便观察到腔内菌量较初始污染水平下降约4 log₁₀，且在整个744 h储存期内没有出现后续污染增加。

**2. PENTAX EC3890FK与PENTAX EBJ10内窥镜的验证**
两种内窥镜在储存12 h和168 h时，处理组的平均Eint均保持负值。EC3890FK分别为?3.89 ± 0.00和?3.68 ± 0.04 log₁₀；EBJ10分别为?4.31 ± 0.00和?4.13 ± 0.00 log₁₀。而阳性对照组Eint均为正值且随时间增加：EC3890FK在12 h和168 h分别为1.41 ± 0.14和3.98 ± 0.00 log₁₀；EBJ10分别为0.75 ± 0.11和4.74 ± 0.19 log₁₀。

**3. 配对比较与统计学支持**
图1和图2中共有10组匹配的内窥镜/时间点比较，所有10组均显示PlasmaTYPHOON+/PlasmaBAG存储的平均Eint低于无菌巾对照。探索性双侧精确符号检验显示，10/10次比较均支持处理组（P = 0.00195）。

**4. 干燥测试结果**
对全部10种内窥镜，经PlasmaTYPHOON+干燥后，各通道均未检出水分痕迹，符合EN 16442的干燥合格标准。

**讨论与结论**
EN 16442标准是为固定式内窥镜存储柜开发的，其核心原则是干燥效率和污染预防。移动式个体化存储系统与固定式存储柜具有相同的基本目标，即确保有效干燥并维持存储期间的微生物完整性，因此将标准要求扩展至移动存储系统有助于统一安全与质量标准。本研究表明，EN 16442的主要测试可以成功应用于PlasmaTYPHOON+系统。研究结果与Pineau等人的报道一致：受控的干燥和存储环境（无论是固定式还是移动式）对维持内窥镜微生物完整性至关重要。此外，其他临床研究也表明PlasmaTYPHOON+能显著降低微生物污染，并在联合PlasmaBAG时将内窥镜微生物完整性维持至31天；相比传统干燥柜，该系统还可减少能耗和耗材，提高可追溯性和工作流程效率。移动存储系统还可用于内窥镜外送维修或维护后的运输，若在发运前确认微生物完整性并在运输中维持，则可能减少系统性的到货后微生物检测需求，优化工作流程同时保障患者安全。

本研究存在一定局限性：实验设计主要是对EN 16442附录E验证框架的描述性改编，统计效力有限；每个条件与时间点仅进行了两次独立重复实验，且精确符号检验仅评估了效应方向的一致性，未考虑差异大小。然而，所有内窥镜型号和存储时长下的一致趋势增强了整体数据解读的可靠性。

总之，PlasmaTYPHOON+系统尽管与传统固定式存储柜设计完全不同，但在干燥效率和微生物保存方面表现出相当的性能。EN 16442测试方案在该移动系统上的成功适应性验证为其可靠性提供了有力证据，支持将其纳入常规内窥镜再处理流程，并呼吁扩展EN 16442标准的适用范围，纳入创新移动存储技术，推动所有存储模式采用统一的安全标准。