猪衣原体对有无四环素治疗母猪的农场繁殖结局的影响

《Veterinary Research》：Influence of Chlamydia suis on reproductive outcome in farms with and without tetracycline treatment of sows

　　

猪生殖衣原体病（Porcine genital chlamydiosis）被认为是繁殖失败（reproductive failure）的潜在原因，其中猪衣原体（Chlamydia (C.) suis）是最流行的衣原体物种。为评估其致病相关性，研究人员调查了50个奥地利仔猪生产农场：40个有繁殖障碍（20个接受四环素治疗（tet），20个未接受（no-tet））和10个临床未受影响的对照农场。分析了来自770头母猪（tet：n=333，no-tet：n=337，对照：n=100）的样本，包括血液、宫颈和直肠拭子、灰尘样本以及每个农场一份混合保育粪样。检查了37个生殖道和6个流产病例。物种特异性实时PCR（real-time PCR）在2.1%的母猪中检出宫颈C. suis排出（tet：n=5，no-tet：n=10，对照：n=1）。在45个农场和总体39.7%的母猪中检测到直肠排出（tet：n=37.8%，no-tet：n=39.2%，对照：n=48%）。在一个宫颈和七个直肠拭子中鉴定出C. pecorum DNA。通过补体结合试验（complement fixation test，CFT）在所有农场和总体49.8%的母猪中检测到衣原体科特异性抗体，研究组与排出或血清学状态之间没有关联。在28%的灰尘和96%的保育粪样中检测到C. suis DNA，而生殖道和流产材料大多PCR阴性。分析42株C. suis分离株，在所有研究组中通过tetA(C) PCR（tet：n=93.75%，no-tet：n=78.3%，对照：n=100%）和体外药敏试验（tet：n=75%，no-tet：n=60.8%，对照：n=100%）发现高比例的四环素耐药。胎次对临床症状、直肠排出和抗体表达有负面影响。C. suis似乎在繁殖失败中作用有限，而由于频繁耐药，应重新审慎考虑常规四环素治疗。

论文解读：猪衣原体对母猪繁殖结局的影响——基于奥地利猪场的综合评估

猪衣原体（Chlamydia (C.) suis）是猪群中最普遍且具有流行病学意义的衣原体物种，猪生殖衣原体病（Porcine genital chlamydiosis）长期被视为母猪繁殖障碍的潜在病因。然而，C. suis在繁殖失败中的因果关系仍缺乏确凿证据，诊断方法也存在局限：PCR虽能检出DNA但无法判断病原活性，血清学缺乏经过验证的检测标准，且四环素类药物耐药性日益增加。为评估C. suis在繁殖障碍中的实际致病作用及四环素治疗的影响，研究人员在奥地利开展了本研究。论文发表于《Veterinary Research》。

研究人员调查了50个奥地利猪场，包括40个存在繁殖障碍的农场（其中20个常规使用四环素治疗（tet组），20个不使用（no-tet组））以及10个无繁殖障碍的对照农场。共采集770头母猪（tet：333头，no-tet：337头，对照：100头）的血液、宫颈拭子、直肠拭子、配种舍灰尘样本及每场一份保育猪混合粪样；另收集37头屠宰母猪的生殖道和6个流产病例。关键方法包括：物种特异性实时PCR（real-time PCR）检测C. suis和C. pecorum DNA；细胞培养分离活菌；tetA(C)基因PCR和体外四环素药敏试验；补体结合试验（CFT）检测衣原体科抗体；对生殖道进行组织病理学检查。样本覆盖奥地利上奥地利、下奥地利和施泰尔马克三个主要养猪州。

研究结果显示：一、临床样本。tet组333头（163头临床受影响，170头未受影响），no-tet组337头（164头受影响，173头未受影响），对照组100头均未受影响。二、宫颈C. suis和C. pecorum排出。2.08%的母猪（16/770）宫颈检出C. suis DNA，其中tet组5头、no-tet组10头、对照组1头；阳性母猪中8头无临床症状，6头为反复配种，2头近期流产。另在1头反复配种母猪的宫颈拭子中检出C. pecorum DNA。三、母猪直肠C. suis和C. pecorum排出。45个农场（90%）和39.7%的母猪直肠检出C. suis DNA，tet组37.8%、no-tet组39.2%、对照组48%，组间无显著关联（p=0.769）；7头母猪直肠检出C. pecorum DNA，来自4个农场。四、衣原体科特异性抗体的表达。通过CFT，49.8%的母猪（362/727）血清抗体阳性，所有农场均检出阳性，tet组49.8%、no-tet组46.5%、对照组60.2%，组间无显著关联（p=0.226）；未观察到抗体阳性与直肠排出的关联（OR=1.017，p=1）。五、保育粪样和环境灰尘。96%的保育粪样（48/50）检出C. suis DNA，tet组和no-tet组各19/20阳性，对照组10/10阳性；28%的灰尘样本（14/50）检出C. suis DNA，tet组25%、no-tet组15%、对照组60%。六、临床症状与胎次。生殖道或直肠C. suis排出及抗体表达均不影响临床症状；25头脓性阴道分泌物母猪的宫颈拭子全部阴性，但6头（24%）直肠排出C. suis。胎次对临床症状（斜率=-0.149，p=0.012）、直肠排出（斜率=-0.132，p=0.0004）和抗体表达（斜率=-0.078，p=0.0225）均有负面影响。七、细胞培养分离与抗生素敏感性。共分离49株衣原体，其中42株为C. suis，2株为C. pecorum，4个直肠拭子和1个粪样为C. suis与C. pecorum共培养；从tet组一头反复配种母猪宫颈拭子中成功分离出C. suis，这是猪生殖道C. suis活菌分离的首次报道，该分离株携带tetA(C)基因且对四环素耐药。对42株C. suis进行tetA(C) PCR和体外药敏，tetA(C)携带率总体为85.4%（35/41），表型耐药率70.7%（29/41）；tet组93%携带tetA(C)且80%表型耐药，no-tet组78.3%携带且60.8%耐药，对照组3株均携带且耐药。八、屠宰母猪生殖道检查。37个生殖道中仅1头母猪左侧输卵管检出低载量C. suis DNA（1×10¹基因组当量/mL），其余均阴性；病理检查发现最常见异常为卵巢囊肿（24%）和输卵管旁囊肿（19%），组织学改变大多与发情周期相符，未发现与C. suis相关的特异性病变。九、流产。6个流产病例（tet组2个、no-tet组3个）衣原体科qPCR均为阴性。

讨论部分指出，C. suis的生殖道排出极为罕见，而四环素耐药率在所有研究组中均很高，因此应重新评估C. suis的临床影响。尽管所有农场均能检出C. suis，但宫颈脱落、生殖道组织和流产材料阳性率极低，且与繁殖障碍无关，提示该病原可能不是这些猪群繁殖失败的主要原因。四环素耐药在有无用药农场均高发，tet组耐药率略高，首次获得的耐药生殖道分离株表明常规四环素治疗不仅可能无法清除C. suis，还可能促进耐药菌株的选择。胎次对直肠排出、抗体表达及临床症状的负面影响提示年龄相关的暴露动态，而老年母猪繁殖障碍减少可能反映了存活偏倚。病理检查还发现卵巢囊肿等替代性病因，这可能独立解释繁殖失败。结论翻译：在疑似猪生殖衣原体病的农场中，C. suis的生殖道排出极少，尽管成功分离到第一株活体猪生殖道C. suis分离株。虽然母猪直肠排出常见，保育仔猪粪样检出率持续较高，没有农场无C. suis，但排出模式和抗体流行率均与临床繁殖状态或抗菌治疗分组无关。胎次对直肠排出、抗体表达和临床症状有负面影响，提示年龄相关的暴露动态。所有研究组均观察到高比例的四环素耐药，敏感和耐药菌株在同一猪群内共存。四环素的使用可能无法在生殖道衣原体病病例中达到预期治疗效果，并可能促进耐药菌株的选择。对屠宰母猪生殖道的病理检查很少发现C. suis DNA，但有助于诊断替代性病理，如卵巢囊肿或输卵管旁囊肿，这些可能解释了观察到的繁殖失败。因此，对于急性生殖道衣原体病的诊断，宫颈拭子物种特异性qPCR仍是推荐方法，而血清学仅限于评估既往暴露，而非活动性临床疾病。