源自土壤的Bacillus safensis、Bacillus pumilus和Bacillus zhangzhouensis菌株具有较高的益生菌潜力：体外安全性评估及功能特性分析

《Probiotics and Antimicrobial Proteins》：High Probiotic Potential of Soil-Derived Bacillus safensis, Bacillus pumilus and Bacillus zhangzhouensis Strains: In Vitro Safety Assessment and Functional Characterization

　　

摘要

本研究的目的是从伊朗伊斯法罕省的土壤中分离、分子鉴定并全面评估本地芽孢杆菌菌株的益生菌潜力。通过热富集法，分离出了23株革兰氏阳性产孢菌株。经过初步的安全性筛选，根据无溶血活性（γ-溶血）、不产生卵磷脂酶以及缺乏肠毒素基因(hbl和nhe)的特性，选出了3株優秀菌株（NF16、NF20和NF24）。通过16S rRNA基因序列鉴定，这些菌株分别为浙江芽孢杆菌 NF16、矮芽孢杆菌 NF20和沙芬芽孢杆菌 NF24。它们的16S rRNA基因序列已分别存入NCBI GenBank数据库，登录号为PX930946、PX930921和PX930970。这三株菌株对模拟的胃肠道环境表现出极好的耐受性：在pH 2条件下存活率范围为48.59%至81.45%，在人工胃液（pH 2.5）中存活率为81.09%至88.60%；同时它们对0.3%的胆盐具有高度抗性（抑制系数为0.30–0.38）。此外，这些菌株对HT-29细胞的粘附能力很强（24小时后达到71.28–82.74%），具有较高的自我聚集性（>72%），细胞表面具有较好的疏水性，并具有显著的抗氧化活性（DPPH自由基清除率为47.51–78.73%）。另外，这些菌株对抗生素的敏感性适中且缺乏肠毒素基因，进一步证实了它们的安全性。与商业对照菌株枯草芽孢杆菌 PXN^? 21^?相比，这些本地分离菌株在多个关键益生菌特性上与其相当甚至更优。这些研究结果表明，从土壤中分离出的沙芬芽孢杆菌 NF24、矮芽孢杆菌 NF20和浙江芽孢杆菌 NF16是开发强效、有效本土益生菌的理想候选菌株。