抑制SLC52A2的表达可促进三级淋巴结构的形成，并抑制IL-17通路，从而延缓黑色素瘤的发展

《Apoptosis》：Silencing SLC52A2 promotes tertiary lymphoid structure formation and inhibits IL-17 pathway to ameliorate melanoma progression

　　

摘要

三级淋巴组织（TLS）与黑色素瘤预后的改善相关。溶质转运蛋白家族52成员A2（SLC52A2）在调控这种相互作用及影响黑色素瘤进展中的作用尚不明确。通过对黑色素瘤数据集（GSE3189、GSE19234、GSE46801、GSE4587、GSE238207、GSE53223）进行整合生物信息学分析，以识别与TLS相关的候选基因。随后利用机器学习方法筛选在独立队列和临床血液样本中得到验证的关键基因。通过体外功能实验和体内同基因模型评估了SLC52A2敲除的影响。利用免疫组织化学、多重免疫荧光（mIF）、流式细胞术和酶联免疫吸附试验（ELISA）评估了与TLS相关的指标。此外，还通过生物信息学分析确定了SLC52A2的下游信号通路。通过CD8? T细胞耗竭实验和通路反馈实验验证了其调控机制。研究发现，SLC52A2是与TLS相关的一个关键枢纽基因。抑制SLC52A2表达可显著抑制黑色素瘤细胞的体外增殖、迁移和侵袭，并在体内抑制肿瘤生长，同时降低Ki67表达。SLC52A2敲除促进了TLS的形成，表现为CD4/CD20/CD68淋巴细胞的浸润增加，CD3+/CD8+ T细胞的浸润增强（及其细胞毒性功能提升，如颗粒酶B?和干扰素-γ?的产生），以及TLS organizing趋化因子的上调。mIF和定量TLS评分证实，SLC52A2沉默后TLS的数量和成熟度显著增加。CD8? T细胞的耗竭逆转了SLC52A2沉默所引起的TLS增强效应和肿瘤抑制作用。从机制上看，白细胞介素（IL）-17信号通路被确定为SLC52A2的下游通路。实验结果显示，SLC52A2敲除降低了IL-17A/IL-17RA蛋白水平，而IL-17受体拮抗剂LY3509754在体外表现出抗肿瘤作用。综上所述，SLC52A2通过抑制TLS介导的抗肿瘤免疫反应并激活IL-17通路来促进黑色素瘤的进展，使其成为治疗黑色素瘤的有希望的治疗靶点。

三级淋巴组织（TLS）与黑色素瘤预后的改善相关。溶质转运蛋白家族52成员A2（SLC52A2）在调控这种相互作用及影响黑色素瘤进展中的作用仍不明确。通过对黑色素瘤数据集（GSE3189、GSE19234、GSE46801、GSE4587、GSE238207、GSE53223）进行整合生物信息学分析，以识别与TLS相关的候选基因。利用机器学习方法筛选在独立队列和临床血液样本中得到验证的关键基因。通过体外功能实验和体内同基因模型评估了SLC52A2敲除的影响。利用免疫组织化学、多重免疫荧光（mIF）、流式细胞术和酶联免疫吸附试验（ELISA）评估了与TLS相关的指标。此外，还通过生物信息学分析确定了SLC52A2的下游信号通路。通过CD8? T细胞耗竭实验和通路反馈实验验证了其调控机制。研究发现，SLC52A2是与TLS相关的一个关键枢纽基因。抑制SLC52A2表达可显著抑制黑色素瘤细胞的体外增殖、迁移和侵袭，并在体内抑制肿瘤生长，同时降低Ki67表达。SLC52A2敲除促进了TLS的形成，表现为CD4/CD20/CD68淋巴细胞的浸润增加，CD3+/CD8+ T细胞的浸润增强（及其细胞毒性功能提升，如颗粒酶B?和干扰素-γ?的产生），以及TLS organizing趋化因子的上调。mIF和定量TLS评分证实，SLC52A2沉默后TLS的数量和成熟度显著增加。CD8? T细胞的耗竭逆转了SLC52A2沉默所引起的TLS增强效应和肿瘤抑制作用。从机制上看，白细胞介素（IL）-17信号通路被确定为SLC52A2的下游通路。实验结果显示，SLC52A2敲除降低了IL-17A/IL-17RA蛋白水平，而IL-17受体拮抗剂LY3509754在体外表现出抗肿瘤作用。综上所述，SLC52A2通过抑制TLS介导的抗肿瘤免疫反应并激活IL-17通路来促进黑色素瘤的进展，使其成为治疗黑色素瘤的有希望的治疗靶点。