《Theriogenology》:hCG promotes secondary ovulation and supplementary corpus luteum formation during early pregnancy in mares
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本研究评估了妊娠早期具有优势卵泡的母马在给予人绒毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotropin,hCG)后是否加速排卵动态并改变血清孕酮浓度。研究人员将30匹妊娠早期存在直径≥35 mm卵泡的妊娠受体母马随机分配,接受1500 IU
本研究评估了妊娠早期具有优势卵泡的母马在给予人绒毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotropin,hCG)后是否加速排卵动态并改变血清孕酮浓度。研究人员将30匹妊娠早期存在直径≥35 mm卵泡的妊娠受体母马随机分配,接受1500 IU hCG静脉注射(hCG组;n=17)或生理盐水静脉注射(对照组;n=13)。通过连续超声检查监测母马的排卵反应及二次排卵间隔。血清孕酮浓度采用两种互补方法分析:按处理后时间顺序的分析和与排卵时间同步的分析。hCG组治疗后48 h内排卵的母马比例显著高于对照组(82.4% vs. 0%;P<0.0001)。同样,hCG处理组从治疗至二次排卵的间隔较短(中位数:1.7天;IQR:1.6–1.8),对照组则为22天(IQR:20–23;P<0.0001)。hCG处理母马的原发至二次排卵间隔亦较短(中位数:38天;IQR:34–43),对照组为54天(IQR:51–60;P=0.0008)。按时间顺序的处理后分析显示,血清孕酮浓度存在显著的组别×时间交互作用(P<0.0001)。当与排卵时间同步分析时,两组孕酮浓度随时间相似增加(时间效应:P<0.0001),组别×时间交互作用不显著(P=0.28)。这些发现表明,妊娠早期存在的优势卵泡仍对外源性促性腺激素刺激保持反应性,允许二次排卵并由此形成副黄体。尽管hCG给药通过加速排卵事件改变了血清孕酮浓度的时间模式,但当分析同步于排卵时间时,两组排卵后孕酮动态并无差异。
母马妊娠早期的维持依赖于黄体持续功能和充足的孕酮分泌。在胎盘形成前,母体妊娠识别主要由胚胎在子宫内的活动介导,抑制黄体溶解并使初级黄体得以维持。尽管循环中孕酮浓度较高且处于黄体主导的内分泌状态,妊娠母马的卵巢活动并未完全停止,卵泡波仍会持续发生。约在妊娠第35~40天起,子宫内膜杯分泌的马绒毛膜促性腺激素(equine chorionic gonadotropin,eCG)能促进次级卵泡排卵或黄体化,进而形成副黄体并增强黄体支持。然而,妊娠期卵泡发育可能先于大量eCG分泌,早期卵泡发育主要依赖垂体促卵泡激素(follicle-stimulating hormone,FSH)驱动。此前尚未直接验证在eCG大量分泌前,妊娠早期出现的优势卵泡是否对外源性促性腺激素仍具功能性反应。基于人绒毛膜促性腺激素(hCG)在周期性母马中被广泛用于诱导排卵,本研究提出假设:妊娠早期给予hCG可诱导二次排卵并促进副黄体形成,从而为探讨该阶段卵巢反应性和黄体功能提供合适的实验模型。孕酮对早期胚胎发育至关重要,低浓度孕酮与胚胎发育受损和不良妊娠结局相关,因此阐明hCG诱导的排卵是否改变血清孕酮动态具有重要的生理和临床意义。该研究由巴西圣玛丽亚联邦大学生物技术与动物繁殖实验室(BioRep)的研究人员完成,论文发表于《Theriogenology》。
研究人员在巴西南米纳斯吉拉斯州Cruzília一处商业马胚胎移植设施开展试验,纳入Mangalarga Marchador品种的妊娠受体母马作为样本队列。所有受体接受8日龄体内生产胚胎移植,受体处于排卵后第5日,形成3天供体-受体不同步。妊娠第12~15日筛选最大卵泡直径≤20 mm的母马,每48小时经直肠超声监测卵泡动态。治疗时间0(treatment time 0,T0)定义为进行性生长优势卵泡≥35 mm的首次检查发现;hCG组(n=17)静脉注射1500 IU hCG,对照组(n=13)给予等量生理盐水。血清孕酮采用放射免疫测定法(radioimmunoassay,RIA)检测,并分别按治疗后天数(T0、T4、T7、T12)和二次排卵后天数(DPO2、DPO5、DPO10)进行两种分析。统计采用t检验、Mann-Whitney U检验、卡方检验及重复测量方差分析。
研究结果如下:
基线与卵泡发育时间分布:两组在妊娠第15天(DG15)和T0时的血清孕酮浓度、T0卵泡直径以及原发排卵至治疗间隔上均无显著差异。hCG组T0时概念年龄为38.0±5.0天,对照组为36.5±4.2天,无显著差异。大多数母马(26/30,86.7%)在妊娠第5周和第