粪便指示物与微生物源追踪标记物识别淡水及海洋海滩的共有及场地特异性污染特征

《Water Research》:Fecal Indicators and Microbial Source Tracking Markers Identify Shared and Site-Specific Contamination Profiles at Freshwater and Marine Beaches

【字体: 大 中 小 】 时间:2026年09月02日 来源:Water Research 12.8

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   摘要传统的娱乐用水水质监测基于粪便指示物测量,用于公共卫生相关的水质公告或长期修复策略。然而,娱乐用水水质的解读通常受限于延迟的培养结果以及传统粪便指示物无法区分污染源的能力,而污染源在不同娱乐用水环境中可能有所不同。为解决这些局限性,我们在地理位置不同的加拿大海洋和淡水海滩

  

摘要

传统的娱乐用水水质监测基于粪便指示物测量,用于公共卫生相关的水质公告或长期修复策略。然而,娱乐用水水质的解读通常受限于延迟的培养结果以及传统粪便指示物无法区分污染源的能力,而污染源在不同娱乐用水环境中可能有所不同。为解决这些局限性,我们在地理位置不同的加拿大海洋和淡水海滩,并行测试了肠球菌快速 qPCR 与微生物源追踪标记物检测及大肠杆菌培养。样本于 2023 至 2025 年游泳季节期间从温哥华、大滩省立公园、尼亚加拉地区、哈利法克斯和多伦多的 10 个海滩采集,并分析了基于培养的大肠杆菌、基于 qPCR 的肠球菌以及微生物源追踪标记物。肠球菌 qPCR 在分析性能良好,并与同日回顾性大肠杆菌测量显示强正相关,支持了基于 qPCR 的海滩监测在不同地区操作可行性。然而,海滩行动值 (BAV) 超标的程度和一致性在海滩间存在差异,表明粪便指示物在不同地点可能不会表现出均匀趋势。源追踪结果显示,海鸥相关分子标记物 (Gull4) 在大多数海滩中显著存在,并总体上与粪便指示物显示一致的正相关。人类相关 HF183 标记物仅在大城市中心的海滩显著存在。此外,Gull4 是最普遍的标记物,并与 BAV 超标显示最强且最一致的相关性,而 HF183 仅在一个城市海滩地区显示与 BAV 超标有关联。本研究证明,快速分子监测可以补充娱乐用水监测中的标准基于培养评估,而 MST 标记物提供特定来源的信息以支持适应性海滩风险管理,并为未来定量微生物风险评估识别数据需求。

引言

城市海滩是休闲娱乐活动的中心,也可作为区域经济驱动力 (Graziano et al., 2019),海滩游客参与游泳和其他涉水活动 (例如,涉水、皮划艇、划船)。然而,由于人为因素,包括城市化和农业径流,水质可能通过粪便污染而恶化, potentially 增加公众暴露于微生物健康风险因素 (St-Hilaire et al., 2016)。由于粪便污染增加与胃肠道疾病发病率较高相关 (Wade et al., 2008; Wade et al., 2010),公共卫生机构使用粪便污染估计来指导娱乐用水公告。娱乐用水水质指南 (USEPA, 2012; Health Canada, 2024) 已制定,旨在提供人类健康风险代理指标定性/定量评估的框架,包括粪便指示细菌 (FIB)。
粪便指示细菌是多种微生物病原体的具有成本效益的替代措施,这些病原体可通过人类接触受污染水体导致胃肠道疾病 (McKee and Cruz, 2021)。基于培养的检测方法主要用于娱乐水中 FIB 的定量评估,但结果仅在采样后 18-24 小时才可供海滩管理者使用 (Brooks et al., 2016),这限制了其用于关于海滩公告的时间敏感决策。尽管基于 DNA 的技术,包括 qPCR,已广泛应用,但将培养与基于 DNA 的测量联系起来的研究要么是特定区域的,要么未考虑潜在粪便污染来源的多样性。此外,FIB 无法提供关于粪便污染类型及相关病原体的定性信息 (Saleem et al., 2024; Nguyen et al., 2018)。进一步地,FIB 测量不区分人类和非人类粪便来源,包括海鸥、鹅和其他野生动物等来源。假设人类来源可能会歪曲特定地点的污染动态,特别是在受多种粪便输入影响的环境中 (Zeki et al., 2021)。例如,娱乐水中的肠球菌也可来源于非人类来源 (Rothenheber and Jones, 2018)。因此,识别粪便来源或将粪便源追踪标记物与 FIB 结合使用,可以为控制粪便污染流入提供更广泛和特定地点的策略提供信息。
微生物源追踪 (MST) 标记物通常用于识别和量化粪便来源,从而缓解与 FIB 相关的非特定来源局限性 (Harwood et al., 2014)。与 FIB 不同,通过并行测试多种哺乳动物和鸟类 MST 标记物,包括人类 (HF183) (Green et al., 2014) 和海鸥 (Gull4) (Ryu et al., 2012),可以获得更全面的水质相关信息,以指导常规监测策略。MST 检测通常基于 DNA 技术,包括 qPCR 和数字 PCR,允许在采样当天检测和分析 MST 标记物的数量,从而潜在地提供关于粪便污染性质的更稳健实时信息。此外,MST 标记物可以识别主要粪便污染来源的动态模式,这些模式在所有娱乐水中可能不普遍,并可能随地理和环境因素而变化 (Unno et al., 2018)。然而,缺乏关于粪便污染流入增加或 FIB 与 MST 测量之间关联的信息,这需要建立以支持基于来源的风险管理和未来 QMRA 策略,其中包括识别废水等病原体来源、估计暴露剂量、建模感染概率以及量化风险以指导安全目标 (Health Canada, 2024)。
很少有研究同时评估淡水和海洋海滩的快速分子 FIB 监测和基于 MST 的源识别,或检查这些措施如何与管理相关的 BAV 超标相关联。我们解决的具体问题是:1) 基于培养的大肠杆菌和基于 qPCR 的肠球菌测量之间是否存在相关性?2) 比较基于培养和基于 qPCR 的措施时,海滩行动值 (BAV) 超标是否存在任何水平的一致性?3) 哪些 MST 标记物在淡水和海洋海滩中被主要检测到?4) FIB 和 MST 标记物之间是否存在相关性?5) 哪些 MST 标记物在 BAV 超标期间显著更高?以及 6) 与 FIB BAV 超标相关的 MST 标记物是否有任何特定地点/海滩的趋势?这项多区域研究提供了一个框架,用于评估 FIB 和 MST 标记物之间的关联在海洋和淡水海滩中是否一致,或者解释是否应为特定海滩。

章节片段

研究设计与水样采集

我们在 2023 年至 2025 年夏季 (6 月至 9 月) 于加拿大四个省份选定海滩收集了海滩海岸水样,包括不列颠哥伦比亚省 (温哥华)、马尼托巴省 (大滩省立公园)、安大略省 (多伦多和尼亚加拉地区) 和新斯科舍省 (哈利法克斯)。水样采集是加拿大海滩队列研究的一部分,这是一项关于加拿大娱乐用水疾病的更大流行病学研究,其方法已在之前的方案中报告 (

淡水和海洋海滩基于 qPCR 的 FIB 监测验证

在成功内部精密度回收和生成标准曲线后,评估了海滩水样分析。复合标准曲线的斜率和截距分别为 -3.1 和 38.6,R2 值为 0.98,扩增效率为 109%。来自每个地点的海滩样本的质控分析措施和 qPCR 质控提供在补充表 3 中。除一个样本外,所有海滩样本均通过了 qPCR 抑制和 DNA 回收

讨论

有效的娱乐用水水质监测对于保护公众健康、支持及时的海滩管理决策以及维持海滩的社会和经济价值至关重要。常规监测计划主要依赖粪便指示细菌 (FIB) 作为粪便污染及相关胃肠道疾病风险的实用代理指标 (USEPA, 2012; Health Canada, 2024)。然而,水质恶化是一个复杂的现象,可能包括污水管或化粪池泄漏 (

结论

总体而言,基于培养的大肠杆菌和基于 qPCR 的肠球菌之间的正相关关系支持使用 qPCR 作为评估海滩水质的快速工具,尽管这应在单个海滩基础上进行评估。大多数海滩观察到的海滩行动值超标一致性进一步表明,基于 qPCR 的方法可能对常规海滩监测具有实用价值。此外,粪便指示物和 MST 标记物之间的正相关显示,这些

作者贡献

Faizan Saleem:方法论、正式分析、可视化、撰写 - 初稿。Adam Boere 和 Amirreza Iranmanesh:方法论和正式分析。Ian Young, Thomas A. Edge, Herb E. Schellhorn:概念化、方法论、监督、项目管理、资金获取、资源以及撰写 - 审查 & 编辑。Jordan Tustin, Rachel Jardine, 和 Binyam Desta:撰写 - 审查 & 编辑。

资助

这项工作由加拿大卫生研究院 (CIHR) 支持,资助编号 PJT 185894 和 PJT 192023 (P.I. Young)。

利益冲突声明

作者声明他们没有已知的竞争性经济利益或个人关系,这些可能会影响本论文中报告的工作。

数据可用性声明

支持本研究结果的数据可根据合理要求从通讯作者处获得,受限于与参与的公共卫生和环境伙伴适用的数据共享协议。

CRediT 作者贡献声明

Faizan Saleem: 撰写 – 初稿、方法论、正式分析、概念化。Adam Boere: 方法论。Amirreza Iranmanesh: 方法论。Jordan Tustin: 调查。Rachel Jardine: 调查。Binyam Desta: 调查。Thomas A. Edge: 撰写 – 审查 & 编辑、调查。Herb E. Schellhorn: 撰写 – 审查 & 编辑、监督。Ian Young: 撰写 – 审查 & 编辑、资源、项目管理、资金获取、概念化。

利益冲突声明

作者声明他们没有已知的竞争性经济利益或个人关系,这些可能出现在影响本论文中报告的工作。
Faizan Saleem|Adam Boere|Amirreza Iranmanesh|Jordan Tustin|Rachel Jardine|Binyam Desta|Thomas A. Edge|Herb E. Schellhorn|Ian Young
生物学系,麦克马斯特大学,1280 Main St W., 汉密尔顿,安大略省,加拿大,L8S 4L8
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