摘要
本手稿是先前发表论文的修正版本。哺乳动物细胞对葡萄糖的摄取是维持细胞和组织稳态的关键机制，主要依赖于位于细胞质膜上的葡萄糖转运蛋白（GLUTs）。细胞内调控GLUT蛋白的主要有两种机制：首先，GLUT基因的表达受到动态转录调控，癌细胞会利用这一机制增加葡萄糖的获取量；其次，GLUT蛋白的分布受到从储存囊泡到质膜（PM）的运输过程的影响。这一过程由信号通路触发，在胰岛素响应细胞中已有深入研究，这些细胞会激活蛋白激酶AKT，使其磷酸化TBC1D4，而TBC1D4是一种参与膜运输调控的RAB-GTP酶激活蛋白。此前我们发现蛋白激酶WNK1也可以磷酸化TBC1D4并调节其表达量。在本研究中，我们发现通过RNA干扰技术在HEK293细胞中下调WNK1表达后，细胞表面GLUT1的量减少了两倍，同时葡萄糖摄取量也下降了40%。通过质谱分析，我们确定TBC1D4中的苏氨酸（S）704位点及其同源蛋白TBC1D1中的S565位点是WNK1可能磷酸化的位点。将相应的磷酸化模拟突变体或非磷酸化突变体转染到细胞中后发现，这两种突变都会影响细胞表面GLUT1的量。这些结果进一步证实了WNK1在GLUT1运输和葡萄糖摄取调控中的作用，可能有助于理解许多癌细胞或胰岛素响应细胞类型中存在的代谢紊乱现象。
