摘要
全球范围内，癌症已成为人类死亡的主要原因之一，传统的治疗方法存在多个缺点，如存活率低、潜在的副作用以及药物抗性的增加。最近，从食品和农业废弃物中提取的天然生物活性物质作为新型癌症治疗手段受到了广泛关注。本研究旨在评估从台湾罗非鱼皮肤中分离出的低分子量胶原肽（TSP）及其纳米乳液（TSPE）和纳米脂质体（TSPL）（无论是否与叶酸-壳聚糖（FC）配体结合，即TSPE-FC和TSPL-FC）的抗肿瘤效果，并将其与紫杉醇进行比较，实验对象为裸鼠模型。通过优化酶解条件，使用碱性酶12.5%、样品与水的比例1:30（w/v）、pH值8、温度50°C以及水解时间6小时制备了TSP。该肽中含有较高比例的172 Da片段（48%）和疏水性氨基酸（67.2%），并进一步制备成两种纳米制剂：TSPE采用大豆油、卵磷脂、甘油和吐温80与去离子水的最佳配比；TSPL则使用乙醇、胆固醇、磷脂酰胆碱、吐温80、甘油和去离子水制备。TSPE和TSPL的平均粒径分别为16.1 nm和33.9 nm，在与FC结合后分别变为15.2 nm和35.3 nm，同时其电荷性质从负值（TSPE为-41.7 mV，TSPL为-46.6 mV）转变为正值（TSPE为+23.2 mV，TSPL为+23.9 mV），这有利于肿瘤细胞的渗透和摄取。体外释放实验表明，纳米肽能实现TSP的持续释放，而非包封形式的TSP则释放速度较快。将TSP、TSPE、TSPL、TSPE-FC和TSPL-FC以不同剂量（100 mg/kg和300 mg/kg体重）以及紫杉醇（15 mg/kg体重）处理A549细胞诱导的裸鼠肿瘤后，肿瘤体积分别减少了22.4–43.3%、40.4–70.6%、36.9–69.2%、59.1–78.6%和90.9%，肿瘤重量分别减少了18.2–48.0%、42.6–73.0%、36.1–69.6%、58.8–79.5%、69.6–85.2%和90.3%。此外，所有处理组小鼠血清中的表皮生长因子（EGF）和血管内皮生长因子（VEGF）水平均有所下降，其中紫杉醇的抑制效果最为显著，其次是TSPL-FC/TSPE-FC、TSPE/TSPL和TSP。总体而言，这两种纳米包封肽及叶酸-壳聚糖缀合纳米肽在抑制小鼠肺癌方面表现出了最为明显的效果。
