《Current Issues in Molecular Biology》：Comparison of a Novel MRNA-Based Breast Cancer Subtyping Assay with PAM50 and Oncotype DX in Estrogen Receptor-Positive/HER2-Negative Breast Cancer: An Exploratory Age-Stratified Retrospective Cohort Study
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免疫组化（IHC）检测的雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）、人表皮生长因子受体2（HER2）和Ki67是乳腺癌已确立的预后和预测标志物。PAM50和Oncotype DX等基因表达检测正越来越多地用于分子分型和复发风险计算。APIS乳腺癌分型试剂盒（BCS
免疫组化（IHC）检测的雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）、人表皮生长因子受体2（HER2）和Ki67是乳腺癌已确立的预后和预测标志物。PAM50和Oncotype DX等基因表达检测正越来越多地用于分子分型和复发风险计算。APIS乳腺癌分型试剂盒（BCSK）定量测定上述标志物（ER、PR、HER2、Ki67）的mRNA表达，并包含一个新颖的四基因BCSK增殖特征（PS），用于亚型分类和风险分层。本探索性回顾性队列研究在年龄分层队列中比较BCSK与已确立分子检测的差异。研究人员旨在比较BCSK亚型分类区分Luminal A与Luminal B亚型的能力与IHC及PAM50的一致性，并评估在按年龄分层（<65岁与≥65岁）患者中BCSK PS与Oncotype DX复发评分（RS）及PAM50复发风险（ROR）评分的相关性。研究纳入59例ER+/HER2?乳腺癌患者的福尔马林固定石蜡包埋（FFPE）肿瘤标本，所有患者接受辅助治疗且有ODx评分。年龄组间患者、疾病和治疗特征采用Fisher精确检验比较。研究人员描述性地评估了IHC、BCSK和PAM50两两间Luminal亚型分类一致性并按年龄分层。采用Spearman秩相关检验BCSK PS、RS与ROR的关联。年龄组间PS差异用Mann–Whitney U检验。结果显示，≥65岁队列中BCSK与PAM50亚型分类一致性（84.6%）高于<65岁队列（60.6%）。<65岁患者中PS与RS（ρ=0.5745，p<0.0005）和ROR（ρ=0.391，p=0.024）均显著相关，而RS与ROR无显著相关；≥65岁患者中PS与ROR显著相关（ρ=0.603，p=0.001），PS与RS（ρ=0.134，p=0.514）及RS与ROR（ρ=0.149，p=0.466）无显著相关。中位PS值在年龄组间无显著差异（0.589对0.602，p=0.97）。在这项探索性回顾性年龄分层分析中，BCSK与PAM50亚型分类呈描述性一致，尤其在≥65岁患者。PS与已确立分子复发评分RS和ROR有显著但中度相关，但随年龄组不同而异。因未纳入结局指标且队列较小，本研究属假设生成性质。需更大前瞻性与临床结局关联研究来确定BCSK的诊断和预后效用、比较成本效果及其在不同年龄组的效用。
研究背景方面，乳腺癌是全球女性最常见癌症，其中激素受体阳性（HR+）/HER2阴性亚型占大多数，进一步分为Luminal A与Luminal B分子亚型，二者在增殖、预后和复发风险上差异显著。传统免疫组化（IHC）依赖ER、PR、HER2、Ki67判定，但存在观察者间变异、Ki67截断值无共识等局限。PAM50（Prosigna?）与Oncotype DX（ODx）等分子检测虽提供标准化分型与复发风险评分（ROR与RS），但成本高、可及性受限。新型APIS乳腺癌分型试剂盒（BCSK）通过RT–qPCR定量ESR1、PGR、ERBB2、MKI67及四基因增殖特征（PS：MKI67、CCNA2、PCNA、KIF23）mRNA，试图以紧凑平台兼顾亚型分类与增殖评估。鉴于老年乳腺癌增多及老年肿瘤学决策需求，研究人员开展此项探索性年龄分层回顾性研究，比较BCSK与IHC、PAM50、ODx在59例HR+/HER2?早期乳腺癌中的表现，论文发表于《Current Issues in Molecular Biology》。
关键技术方法上，研究人员回顾性纳入2020–2022年瑞士巴塞尔大学医院与巴塞尔乡村州立医院经手术确诊的59例HR+/HER2?早期乳腺癌FFPE样本，按65岁先验切点分<65岁（n=33）与≥65岁（n=26）两组。BCSK由Propath UK中心用RT–qPCR测靶基因ΔCt（内参IPO8、PUM1），软件输出了0–1连续PS（<0.5低增殖）。PAM50用NanoString nCounter得固有亚型与ROR；ODx由Exact Sciences出RS；IHC在Ventana平台按ESMO/ASCO-CAP判读（Ki67>20%阳性）。统计用Fisher精确检验、描述性两两一致性、Spearman相关与Mann–Whitney U，未做多重校正。
研究结果部分，3.1患者特征显示老年组绝经后比例高、pT3仅见于≥65岁组，其余基线均衡。3.2亚型分类一致性中，<65岁组IHC–BCSK一致72.7%、BCSK–PAM50一致60.6%、IHC–PAM50一致54.5%；≥65岁组对应为69.2%、84.6%、53.8%。BCSK–PAM50一致性在老年组明显升高。3.3相关性分析表明，<65岁PS与RS（ρ=0.5745，p<0.0005）、ROR（ρ=0.391，p=0.024）均显著相关，RS–ROR不显著；≥65岁仅PS–ROR显著（ρ=0.603，p=0.001），PS–RS与RS–ROR不显著。3.4年龄组间中位PS（0.589对0.602，p=0.970）无差异。
讨论部分指出，BCSK与PAM50在老年组描述性一致更高，但因样本小且未做一致性差异检验，不能归因生物学年龄效应；IHC定义为HR+/HER2?者被PAM50划为basal-like或HER2-enriched属固有/替代分型差异而非错误。PS与RS/ROR的相关模式随年龄切换，提示BCSK PS捕获的增殖信息部分重叠但不等同于ODx或PAM50风险轴，且RS与ROR本身在此队列弱相关。无结局数据与小样本限制结论强度，需前瞻结局关联研究验证。
结论部分译文：BCSK与已确立分子分型具一致性，其增殖评分在各年龄组与已确立分子复发指标相关。这些探索性发现支持将BCSK作为分子分类工具进一步评估。其临床与预后效用仍有待更大规模前瞻性、结局关联研究验证，其与已确立分子检测相比的可行性与成本效果需专门评估。
