《The International Journal of Biological Markers》：Concordance of PD-1 expression on paired peripheral and bone marrow T cells: Surrogate potential and clinical implications in DLBCL
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背景：PD-1/PD-L1轴是肿瘤免疫逃逸的关键机制，但其在不同免疫区室中的表达及在DLBCL患者中的临床意义尚不清楚。方法：本研究纳入67例新诊断DLBCL患者与59例健康对照，通过流式细胞术评估外周血（PB）与骨髓（BM）中PD-1阳性T细胞水平，并分析P
背景：PD-1/PD-L1轴是肿瘤免疫逃逸的关键机制，但其在不同免疫区室中的表达及在DLBCL患者中的临床意义尚不清楚。方法：本研究纳入67例新诊断DLBCL患者与59例健康对照，通过流式细胞术评估外周血（PB）与骨髓（BM）中PD-1阳性T细胞水平，并分析PB与BM T细胞亚群PD-1表达同DLBCL患者临床病理特征的相关性。结果：相较健康对照，DLBCL患者PB与BM中T细胞PD-1表达均显著升高；PD-1高表达与不良临床结局及预后危险因素（晚期Ann Arbor分期Ⅲ-Ⅳ期、高国际预后指数IPI 3-5、乳酸脱氢酶LDH>250 U/L、B症状）显著相关；配对PB与BM样本间PD-1水平呈强一致性。结论：DLBCL患者外周血PD-1表达升高与骨髓内表达相关，循环PD-1+T细胞增多伴随高危侵袭性疾病特征；数据支持外周血PD-1+T细胞作为反映髓内T细胞耗竭的微创替代生物标志物；循环PD-1+T细胞丰富的DLBCL患者可能对PD-1/PD-L1阻断免疫治疗有更大应答潜力，但需前瞻性验证。
研究背景与立项依据
弥漫大B细胞淋巴瘤（diffuse large B-cell lymphoma，DLBCL）具有高度异质性，即便采用标准R-CHOP化疗仍有逾30%患者复发或耐药。肿瘤免疫微环境（tumor immune microenvironment，TIME）中PD-1/PD-L1轴通过诱导T细胞耗竭介导免疫抑制与肿瘤逃逸，但抗PD-1治疗在DLBCL中仅少数获益，该通路在DLBCL中的精确角色仍不明。既往研究多聚焦肿瘤浸润淋巴细胞（tumor-infiltrating lymphocytes，TILs）的PD-1表达或可溶性PD-L1，组织活检有创且受瘤内异质性限制，而外周血（peripheral blood，PB）采样微创、可重复，骨髓（bone marrow，BM）又是DLBCL常见累及部位，但少有研究同步分析配对PB与BM样本并评估其预后与替代价值。研究人员据此设计本研究，旨在明确PB与BM中T细胞PD-1表达水平、二者一致性及其与疾病分期、分子分型、预后的关联，探索动态监测与免疫治疗获益人群筛选的液体活检指标。论文发表于《The International Journal of Biological Markers》。
主要技术方法与队列
研究人员采用横断面与前瞻性随访结合设计，队列来源于厦门大学附属第一医院血液科2023年7月至2024年8月新诊断DLBCL患者67例，健康对照59例（39例体检者PB、20例移植中心供者BM）。通过流式细胞术（FACSCanto II）进行CD3/CD4/CD8与PD-1表面染色，计算各亚群PD-1+百分比；其中32例提供配对PB-BM基线样本，12例完全缓解后复查配对PB。统计采用SPSS 21.0与GraphPad Prism 10.0，非正态用Mann–Whitney U检验与Spearman相关，配对用Wilcoxon符号秩检验，阈值P≤0.05。
研究结果
3.1 DLBCL患者临床病理特征：67例患者中位年龄可比于对照，50.75% LDH>250 U/L，31.34%伴B症状，22.39% BM受累，56.72%为Ⅲ-Ⅳ期，50.75% IPI 3-5，82.09%为非生发中心B细胞（non-GCB）型。
3.2 各临床病理特征下T细胞亚群PD-1表达：按LDH、B症状、BM受累、Ann Arbor分期、IPI分层显示，CD3+、CD4+、CD8+T细胞上PD-1比例在高危组中均显著升高；年龄、性别、GCB/non-GCB分型无显著差异。结论为PD-1高表达与侵袭性表型及不良预后因素一致正相关。
3.3 PB与BM中PD-1表达：DLBCL组PB与BM的CD3/CD4/CD8 T细胞PD-1水平均显著高于健康对照；同一患者配对比较中BM T细胞PD-1高于PB。
3.4 诊断期PB与BM PD-1一致性：32例配对样本Spearman相关分析显示CD3+PD-1+ r=0.84、CD4+PD-1+ r=0.89、CD8+PD-1+ r=0.82（均P<0.0001），PB可可靠预测BM内T细胞耗竭。
3.5 治疗后PB PD-1动态变化：12例R-CHOP后完全缓解患者PB中CD3+PD-1+（P=0.04）与CD8+PD-1+（P=0.01）显著下降，CD4+PD-1+降幅未达显著（P=0.19），提示循环PD-1可作为治疗应答动态标志物。
讨论与结论翻译
讨论指出，本研究补白了配对PB-BM T细胞PD-1线性相关的空白，证实循环PD-1+T细胞水平可反映髓内免疫抑制，BM因持续抗原暴露致耗竭更深；外周血微创、可重复，适用于风险分层、免疫治疗筛选与动态监测。局限性为单变量分析、样本量小、缺生存随访与功能验证。
结论翻译：本研究证实DLBCL患者外周血与骨髓T淋巴细胞PD-1表达显著一致，支持外周血作为评估免疫抑制性TIME的可靠微创替代；评估血液中PD-1具双重效用，既作识别侵袭性疾病的预后标志物，也作筛选PD-1/PD-L1阻断获益者的实用工具，为DLBCL精准医学提供新路径。
