《Aquaculture Reports》：Supplementation of tussah immunoreactive substances improves growth performance, innate immunity, and intestinal microbial homeostasis in the sea urchin
Strongylocentrotus intermedius
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柞蚕免疫活性物质（TIS）对水产动物免疫调节效应已被证实，但其对中间球海胆（Strongylocentrotus intermedius）的益生效应尚不清楚。研究人员开展投喂实验以探究TIS对该海胆生长性能、先天免疫及肠道菌群的影响。结果显示，0.5%与1.0
柞蚕免疫活性物质（TIS）对水产动物免疫调节效应已被证实，但其对中间球海胆（Strongylocentrotus intermedius）的益生效应尚不清楚。研究人员开展投喂实验以探究TIS对该海胆生长性能、先天免疫及肠道菌群的影响。结果显示，0.5%与1.0% TIS显著升高增重率（WGR）与壳径相对生长率（SDGR）（P < 0.05），各TIS处理组均显著改善生殖腺指数（GSI）（P < 0.05）。1.0% TIS组生殖腺总风味氨基酸提升5.4%，二十碳五烯酸（EPA）与二十二碳六烯酸（DHA）含量提升超10%。各TIS组免疫酶活性不同程度升高。蛋白质组学表明TIS激活免疫相关基因并上调线粒体功能与能量代谢通路。16S rRNA测序揭示1.0% TIS通过富集有益菌（Desulforhopalus与Ruegeria）并抑制有害菌（Vibrio与Halarcobacter）改善肠道微生物多样性。综上，日粮补充TIS促进中间球海胆生长、增强免疫并优化肠道菌群，为免疫刺激剂在海胆养殖中的应用提供新见解，助力高效配合饲料开发。
研究背景方面，中间球海胆（Strongylocentrotus intermedius）是中国高产商业海水养殖品种，其生殖腺为唯一可食组织，富含不饱和脂肪酸与风味氨基酸。随着集约化养殖密度提升与水环境退化，由副溶血性弧菌（Vibrio parahaemolyticus）等引发的细菌病成为限制产业健康发展的关键因子。柞蚕免疫活性物质（Tussah immunoreactive substance，TIS）系以柞蚕活蛹接种链球菌与灭活核型多角体病毒经免疫诱导所得，含蛋白约54%、脂肪约21%及抗菌肽、溶菌酶、凝集素等生物活性物质，已在刺参、虾夷扇贝等水产动物中表现出促生长与增强抗病力作用，但在中间球海胆中的实用效应与机制尚未见报道。鉴于免疫增强剂调控水生动物非特异性免疫是可持续养殖核心方向，研究人员拟明确TIS在该海胆中的适宜添加量、免疫调节通路及肠菌演替规律。
主要关键技术方法方面，研究人员自大连旅顺口区双岛街道海水养殖场获取初始体重26.7±0.2 g、壳径36–42 mm健康中间球海胆360头，分对照组与0.5%、1.0%、2.0% TIS日粮组，每组3重复每重复30头，19±0.1℃、盐度30静水养殖60 d。生长与生殖腺营养指标按国标测定；体腔液分离上清测溶菌酶（LZM）、超氧化物歧化酶（SOD）、碱性磷酸酶（AKP）、过氧化氢酶（CAT）；以副溶血性弧菌1.0×104 CFU/mL攻毒12 d记存活；生殖腺定量蛋白质组采用timsTOF Pro2进行ddaPASEF与diaPASEF模式LC-MS/MS；肠道微生物对对照与1.0% TIS组各3头行16S rRNA扩增子NovaSeq测序与α/β多样性及ASV（Amplicon Sequence Variant）注释。
研究结果部分，3.1生长指标显示1.0% TIS组WGR达51.69%、SDGR 29.34%/d、GSI 34.10%，均优于对照（P < 0.05），2.0%组生长回落，提示过量蛋白抑吸收。3.2生殖腺成分表明1.0% TIS组脂肪由3.60%降至3.20%，总鲜味氨基酸升5.4%，谷氨酸、甘氨酸、精氨酸分别升6.3%、5.2%、6.8%；EPA升11.54%、DHA升66.67%、花生四烯酸（ARA）升7.14%。3.3免疫酶活性中SOD与AKP呈低促高抑，1.0%达峰；LZM与CAT在0.5%–1.0%间下行、1.0%–2.0%回升。3.4攻毒试验显示对照12 d存活0%，1.0% TIS组剩60%。3.5蛋白质组学筛选1904个差异表达蛋白（DEPs），1688上/216下，GO富集于囊泡运输、凋亡调控、先天免疫应答，细胞组分集中于质膜、细胞骨架、线粒体，KEGG富集内吞、溶酶体、核糖体、糖酵解/糖异生、氨基酸代谢。3.6肠菌分析显示1.0% TIS组Chao1、ACE、Shannon升高而Simpson降低；变形菌门（Proteobacteria）下降、厚壁菌门（Firmicutes）上升；属水平Vibrio与Halarcobacter压缩，Desulforhopalus与Ruegeria扩增。
讨论部分总结，研究人员指出1.0% TIS通过优化日粮氮脂比契合海胆9%–20%蛋白适宜区间，故促生长优于2.0%过量组；生殖腺鲜味氨基酸与EPA/DHA累积源于TIS介导的氨基酸重分配及膜脂重塑；体腔液SOD/LZM等波动符合“低剂量激活—高剂量负反馈”规律，与鱼类维生素E过量现象一致；蛋白质组中线粒体氧化磷酸化与内吞-溶酶体通路共激活，解释能量供给与非特异性病原清除协同；肠菌中Proteobacteria压缩与Ruegeria（产细菌素/铁载体）增殖共同构成抗弧菌微生态屏障。结论部分译文如下：综上，1.0%为本次研究最优TIS添加量，TIS作为中间球海胆养殖绿色高效免疫增强剂潜力显著；其对该物种具促生长、优生殖腺品质、强免疫、调肠菌稳态及缓病原胁迫等多效良性作用，为海胆功能饲料开发提供新见解与技术支撑；未来应聚焦TIS长期对经济性状影响、生殖发育与免疫互作分子机制及核心活性组分鉴定。论文发表于《Aquaculture Reports》。
