《Diversity》：Phenotypic and ISSR-Based Molecular Diversity and Preliminary In Vitro Establishment of Wild Leek (Allium ampeloprasum L.) Germplasm
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野生韭葱（Allium ampeloprasum L.）是一种特征尚未充分的野生食用物种，也是具有潜在价值的保护与园艺改良资源。研究人员评估了来自土耳其哈塔伊省（Hatay Province）不同地点的24份位点来源材料，采用田间观测的形态生理性状、简单重复间
野生韭葱（Allium ampeloprasum L.）是一种特征尚未充分的野生食用物种，也是具有潜在价值的保护与园艺改良资源。研究人员评估了来自土耳其哈塔伊省（Hatay Province）不同地点的24份位点来源材料，采用田间观测的形态生理性状、简单重复间序列（inter-simple sequence repeat, ISSR）标记及离体初步建立进行分析。每份材料取3株空间分离植株测定10项性状（n=72），每份材料取1株已表型化代表进行分子分析。另选取G9、G12、G18三份差异材料，测试完整基部小鳞茎与带基盘鳞茎四分之一块的离体建立效果。所有田间性状在位点样本间差异极显著（p<0.001），前三个主成分解释71.72%总变异，揭示叶与生物量、根与叶绿度、鳞茎大小等对比剖面。11条ISSR引物产生85个可计分位点（64个多态，多态率75.29%，平均多态信息含量0.249）。Jaccard相似系数0.227–0.824，聚类与主坐标分析显示广泛连续分子变异。离体中172个外植体有103个产生健康初生芽，基部小鳞茎建立率61.4%，鳞茎块57.7%。结果为保护、受控评价与未来繁殖研究提供基线。
研究背景方面，葱属（Allium）包含重要蔬菜、香料、药用植物及众多野生食用类群，其中野生韭葱（A. ampeloprasum L.）作为地中海至中亚分布的未被充分表征物种，在土耳其地方名（如k?rmen）下常与其他葱属混用，仅凭俗名无法定种。目前该物种在自然生境中的形态生理变异、DNA水平关系及离体保存潜力缺乏系统整合基线，田间表型难以区分可塑性遗传效应，分子指纹缺少多位点覆盖，离体初级培养尚待验证。研究人员因此于《Diversity》发表本研究，旨在为种质文档化、保护与后续育种提供三位一体基线。
关键技术方法上，研究人员在土耳其哈塔伊省24个独立位点采集非栽培野生韭葱各3株（共72株）作形态生理重复，每位点取1株幼叶提DNA作ISSR指纹；形态数据经单因素方差分析、Pearson相关（Benjamini–Hochberg校正）、主成分分析（PCA）与Ward聚类；ISSR采用CTAB法提DNA、11条引物PCR、琼脂糖凝胶电泳判带，以Jaccard相似系数构建UPGMA树与PCoA；离体部分选G9/G12/G18三份ISSR差异材料，以完整基部小鳞茎和带基盘母鳞茎四分之一块为外植体，MS培养基添加6-BA与NAA，25℃光周期培养4周统计初生芽建立率。
研究结果部分，3.1节田间形态生理变异中，10项性状在24份材料间均极显著（p<0.001），η2介于0.667（叶数）至0.987（SPAD）；G10具高叶数叶宽与生物量，G16长根高SPAD，G8大鳞茎低SPAD，G15高株低干重；PCA前三轴解释71.72%，PC1为叶发育与生物量、PC2为根长与绿度、PC3为鳞茎尺寸；Ward聚类最大平均轮廓系数仅0.231（k=6），支持连续梯度而非离散组。3.2节ISSR多态性与分子关系中，11引物得85位点（64多态，多态率75.29%，平均PIC 0.249），Jaccard相似0.227–0.824，G6与G21最近、G9与G18最远；UPGMAcophenetic相关系数0.759，PCoA前两轴占正特征值33.16%，最大轮廓系数0.194，呈连续重叠分布。3.3节离体初步建立中，172个外植体103个出芽（总体59.9%），基部小鳞茎61.4%、鳞茎块57.7%，Fisher精确检验无显著差异（p=0.639）；G9/G12/G18三份材料均可成苗，芽源于顶芽或基盘分生组织，证实两类型外植体均适合作Stage I建立。
讨论部分指出，田间差异反映位点—基因型组合而非纯遗传效应，须以共同园试验分离；表型与ISSR不强制吻合因标记不与性状连锁且采样层级不同（每位点3株表型vs 1株基因型）；ISSR仅作位点间指纹基线，群体遗传需多位点个体与codominant SSR/SNP（GBS/RAD-seq）；离体仅评Stage I，未优化培养基或比较供体，后续需供体重复平衡设计。结论部分翻译如下：哈塔伊省24份野生韭葱位点材料展现显著田间形态生理变异与较高ISSR多态；G10、G16、G8、G15分别代表叶生物量、根绿度、鳞茎、株高对比剖面；11引物面板产85疑似位点（64多态）揭示连续分子关系；每位点仅1株基因分型故属位点间指纹基线而非群体遗传学；完整基部小鳞茎与带基盘鳞茎块初生芽率61.4%与57.7%，无 pooled 差异；整体数据为G1–G24种质保护、共同环境验证、群体内分子采样扩展及供体重复离体繁殖系统开发提供连贯基线。
