识别并与年龄相关的生长速率加速相关的中国仓鼠卵巢（CHO）细胞基因，并对其进行工程改造

《Journal of Biological Engineering》：Identification and engineering of Chinese hamster ovary (CHO) cell genes whose expression is correlated with age-related growth rate acceleration

　　

摘要

随着中国仓鼠卵巢（CHO）细胞代数的增加，其生长特性会发生变化，这在大规模生产细胞系中是不理想的。先前研究表明，CHO细胞中的高生长表型与后期世代细胞中的2号染色体（Chr2）微拷贝事件有关。我们评估了参与该微拷贝事件的123个基因中的一部分对后期世代细胞（克隆后超过90代）高生长表型的影响。我们发现，通过单独敲降由于微拷贝事件而上调的几个基因，可以逆转这种与Chr2微拷贝事件相关的年龄相关的高生长表型。此外，其中一种基因Cxxc1在低生长表型的细胞中过表达后，会导致细胞群体表现出高生长表型。因此，通过对CHO细胞进行Cxxc1的过表达工程，可以使其具有与Chr2微拷贝事件细胞系相似的高生长表型。而且，通过后续降低Cxxc1的转录水平，可以使细胞恢复到低生长表型。研究表明，过表达Cxxc1的工程细胞群体的高生长表型可以稳定维持100代；尽管这种高生长表型会导致细胞特定生产力的下降，但细胞数量增加可以弥补这一损失，从而维持总体产量。我们提出，通过对CHO细胞进行靶向工程改造使其过表达Cxxc1