源自跳跃假鞘菌并在大肠杆菌中异源表达的重组软骨素酶 B 的生化特性及底物降解模式

《BMC Microbiology》：Biochemical characteristics and substrate degradation pattern of a recombinant chondroitinase B from Pseudopedobacter saltans heterologously in Escherichia coli

　　**摘要****背景**软骨素酶 B（CSase B）是一种能够从糖胺聚糖（GAGs）链上特异性切割硫酸皮肤素（DS）结构域的酶，在功能性寡糖制备以及 GAGs 结构和功能研究中发挥着重要作用。然而，迄今为止，仅报道了两种具有高特异性的野生型 DS 降解酶，一种是来自肝素土杆菌（*Pedobacter heparinus*）的 DS 降解酶 *cslB*，另一种是由施氏土杆菌（*Pedobacter schmidaeae*）产生的软骨素 B 裂解酶，名为 *Ps*ChonB。在本研究中，我们从跳跃假土杆菌（*Pseudopedobacter saltans*）中鉴定出一个 PL6 家族基因，命名为 DLase，并在大肠杆菌（*E. coli*）中异源表达了该重组酶。**结果**DLase 是一种对 DS 结构域具有高特异性的内切型裂解酶，并表现出优异的酶学特性。值得注意的是，DLase 的比活力（911 U/mg）远高于 *cslB*（84.6 U/mg）和 *Ps*ChonB（395 U/mg）。此外，与 *cslB* 和 *Ps*ChonB 不同，DLase 在更宽的温度和 pH 范围内表现出高活性，并且也显示出更优的热稳定性。此外，本研究首次确定了其他 GAGs 对 CSase B 酶活性的影响。**结论**该酶将成为研究 DS 和其他 GAGs 结构 - 活性关系的宝贵工具。