用于短期致癌性评估的独立构建的携带突变人源 HRAS 基因的转基因小鼠模型的构建与评价

《Transgenic Research》：Construction and evaluation of an independently generated transgenic mouse model carrying mutated human HRAS genes for short-term carcinogenicity assessment

　　

摘要

本研究旨在构建并评估一种独立生成的转基因小鼠模型，应用于短期致癌性评估。含有内含子点突变的突变人 HRAS 片段通过细菌人工染色体转基因技术插入 C57BL/6JGpt 小鼠中，最终生成了 BALB/c;B6J-Tg(hHRAS)16/Gpt 小鼠，简称 HRAS 小鼠。对 HRAS 小鼠中插入的人 HRAS 片段进行了表征，显示在 19 号染色体上有五个串联拷贝。收集了 HRAS 小鼠的基线概况，包括生化、血液学、免疫表型、生存和致癌数据。为了评估 HRAS 小鼠的肿瘤易感性，我们在根据良好实验室规范进行的短期致癌性评估中，对 HRAS 小鼠施加了 N-亚硝基-N-甲基脲 (MNU)。HRAS 小鼠的遗传特征包括位于 19 号染色体基因组坐标 7,755,606 的五个突变人 HRAS 片段串联阵列，以及位于 19 号染色体上（基因组坐标 7,755,606–7,746,509）的 9 千碱基基因组序列重复。与 CByB6F1-Tg(HRAS)2Jic (Tg.rasH2) 转基因小鼠相比，HRAS 小鼠在长期观察中显示出较低的自发性肿瘤形成发生率和范围。短期致癌性评估显示对 MNU 有强烈的肿瘤反应，雄性和雌性 HRAS 小鼠中淋巴瘤（≥?90%）和胃鳞状细胞乳头状瘤（≥?90%）的发生率都很高。HRAS 小鼠显示出对 MNU 的易感性，并表现出与 Tg.rasH2 小鼠不同的基线特征。在 HRAS 小鼠的肿瘤中发现了细胞定位水平上 HRAS 和 MKI67 的共表达。这些发现初步评估了将 HRAS 小鼠应用于短期致癌性评估的可行性。