工程化肺炎溶素 ΔA146 衍生物诱导乳腺癌细胞凋亡：抗体偶联药物载荷开发的体外概念验证

《BMC Pharmacology and Toxicology》：An engineered pneumolysin ΔA146 derivative induces apoptosis in breast cancer cells: an in vitro proof-of-concept for antibody-drug conjugate payload development

　　

摘要

抗体药物偶联物（ADCs）的治疗潜力常常因对传统载荷产生耐药性而受到削弱，这些载荷主要通过破坏微管或核 DNA 等细胞内靶点来发挥作用。为了寻找能够绕过这些既定耐药途径的治疗药物，我们将注意力转向了工程化的细菌成孔毒素——肺炎溶素 ΔA146 (PLY ΔA146)。为了评估其独立于抗体介导递送的内在细胞毒性潜力，我们构建了一种重组融合蛋白（CPP-PLY ΔA146）用于直接的细胞评估。该构建体显示出能够有效地内化进入 HER2 阳性的 SK-BR-3 和三阴性的 MDA-MB-231 乳腺癌细胞系。随后的功能分析显示，其对细胞增殖具有强效且浓度依赖性的抑制作用，在暴露 72 小时后，半数抑制浓度（IC??）分别约为 1.140 μM 和 1.433 μM。在机制上，观察到的细胞毒性与程序性细胞死亡的诱导根本相关。这一点得到了多方面证据的证实：Annexin V 阳性群体的显著增加，DNA 链断裂的明确检测，caspase-8 和 caspase-3 的切割及随后的激活及其催化活性的相应增加，以及 Bax/Bcl-2 平衡向促凋亡表型的决定性转变。综上所述，这些结果勾勒出了 PLY ΔA146 明确且有效的促凋亡机制，该机制在功能上不同于当前 ADC 支柱药物的作用模式。这些结果为 PLY ΔA146 作为未来 ADC 开发的潜在候选载荷提供了体外概念验证，提出了一条克服现有局限并潜在增强靶向肿瘤干预效果的战略途径。