在 HepaRG 细胞中，急性磷酸盐暴露与白蛋白产生表型的减弱、HNF4A 下调以及 ERK 激活相关

《BMC Nephrology》：Acute phosphate-salt exposure is associated with attenuation of the albumin-producing phenotype, HNF4A down-regulation, and ERK activation in HepaRG cells

　　

摘要

背景

高磷血症是慢性肾脏病（CKD）的常见并发症，与全身炎症、蛋白质 - 能量消耗、贫血和骨骼肌消耗有关。CKD 中低白蛋白血症也很常见，与不良临床结局相关。尽管 CKD 相关的低白蛋白血症通常被解读为营养不良、炎症、蛋白质流失或白蛋白分解代谢增加，但细胞外磷酸盐是否影响肝细胞的白蛋白产生能力尚不清楚。

方法

HepaRG 细胞用溶剂对照、无机磷酸盐（Pi）、成纤维细胞生长因子 23（FGF23）或 Pi 加 FGF23 进行处理。使用 RNA 测序检查白蛋白、HNF4A 和 IL6 的表达水平，并进行了额外的转录组概述分析，包括基于 TCC 的差异表达可视化和基于 TRRUST 的 HNF4A 靶基因分析。培养上清液中的白蛋白分泌量通过酶联免疫吸附测定法测量。细胞活力通过 MTT 法评估。短期 Pi 刺激后的 ERK 磷酸化通过免疫印迹分析评估。

结果

Pi 暴露减少了 HepaRG 细胞中的白蛋白表达，而单独使用 FGF23 未产生类似的抑制作用。Pi 暴露还与 HNF4A 表达减少有关，HNF4A 是肝细胞分化和肝脏特异性基因表达的关键转录调节因子。额外的转录组概述分析，包括基于 TCC 的差异表达可视化和基于 TRRUST 的 HNF4A 靶基因分析，表明 Pi 处理细胞中肝细胞功能/HNF4A 相关基因程序减弱。与转录组发现一致，Pi（而非单独 FGF23）显著减少了培养上清液中的白蛋白分泌。这种减少不能归因于细胞活力下降。Pi 迅速增加了 ERK 磷酸化。值得注意的是，在当前实验条件下，Pi 相关的白蛋白和 HNF4A 减少并未伴随强烈的 IL6 诱导。

结论

在当前急性、超生理水平的暴露条件下，磷酸盐处理与 HepaRG 细胞白蛋白产生表型减弱相关，伴随 HNF4A 下调和 ERK 激活。由于未包含钠/渗透压匹配对照和颗粒表征，这些发现不能专门归因于溶解的磷酸盐。需要在生理相关条件下进行进一步研究，以确定磷酸盐特异性及其与 CKD 相关低白蛋白血症的潜在相关性。