大川芎方通过促进 PI3K/Akt/eNOS 信号通路介导的血管生成和血管舒张来改善血管重塑

《Metabolic Brain Disease》：Da chuanxiong formula improves vascular remodeling via promoting angiogenesis and vasodilation mediated by PI3K/Akt/eNOS signaling

　　

摘要

血管性认知障碍（VCI）是一种广泛存在的疾病，慢性脑低灌注（CCH）是其主要的驱动因素。在我们之前的研究中，我们验证了大川芎（DCX）方剂可以减轻 VCI，并显著上调降低的脑血流，表明其对血管重塑具有潜在益处。本研究旨在探讨 DCX 方剂在 CCH 损伤后的促血管生成和血管舒张作用，并阐明其药效物质和潜在机制。CCH 大鼠模型通过双侧颈总动脉闭塞建立。采用 CD31⁺免疫荧光染色和鹌鹑尿囊膜（qCAM）实验来评估 DCX 的血管生成作用。进行离体血管环实验和 qCAM 中的 NO 测定，以评估 DCX 的血管舒张作用。随后，我们利用 UPLC-Q-TOF/MS 分析了 CCH 条件下 DCX 血液吸收的化学成分，并结合网络药理学、分子对接进一步预测潜在机制和有效成分。在 CCH 大鼠中进行了 Western blot 以验证可能的机制，并对 DCX 中的创新活性成分进行了体外药效验证实验。我们的结果显示，DCX 显著增加了 CCH 大鼠海马和大脑皮层中 CD31⁺细胞的数量，并显著增加了 qCAM 中的血管面积。DCX 显著舒张了预收缩的血管环，并增加了 qCAM 中的 NO 含量。此外，川芎内酯 A、丁苯酞、阿魏酸、川芎内酯 I、藁本内酯 A、藁本内酯、川芎内酯 H 和天麻素被确定为 CCH 条件下 DCX 的 8 种主要血液吸收化合物。接着，网络药理学和分子对接显示 NOS3 和 PI3K/Akt 信号通路是 DCX 改善 CCH 损伤血管重塑的关键靶点和通路，这一点通过 Western blot 进一步得到了验证。此外，我们首次发现川芎内酯 A 和川芎内酯 H 能在体外显著促进细胞迁移并增强 HUVECs 的管形成能力。综上所述，DCX 方剂通过激活 PI3K/Akt/eNOS 信号有效增强了血管生成和血管舒张，这可能是 DCX 促进 CCH 损伤血管重塑的重要途径。值得注意的是，川芎内酯 A 和川芎内酯 H 首次被确定为负责 DCX 促血管生成作用的创新成分。