《Journal of the Egyptian National Cancer Institute》：Pilot study on RECAF (Receptor for Alpha-Fetoprotein) expression in pediatric acute leukemia: insights from flow cytometry analysis
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背景：急性白血病是儿童最常见的癌症，凸显了早期诊断的重要性。RECAF是一种甲胎蛋白（AFP）受体，在多种恶性肿瘤中异常重新表达，是一种有前景的肿瘤生物标志物。
目的：本研究旨在通过流式细胞术免疫表型分析评估RECAF表达在儿童初发急性白血病患者中的临床实
背景：急性白血病是儿童最常见的癌症，凸显了早期诊断的重要性。RECAF是一种甲胎蛋白（AFP）受体，在多种恶性肿瘤中异常重新表达，是一种有前景的肿瘤生物标志物。
目的：本研究旨在通过流式细胞术免疫表型分析评估RECAF表达在儿童初发急性白血病患者中的临床实用性。
方法：该研究纳入了80名急性白血病患儿，包括40名初诊急性淋巴细胞白血病（ALL）患者、40名初诊急性髓系白血病（AML）患者，以及40名年龄和性别匹配的非恶性对照受试者。研究人员对所有受试者进行了急性白血病组合和RECAF表达的流式细胞术分析，并评估了其他实验室和临床参数。
结果：该研究显示，急性白血病患者中RECAF表达显著高于对照组。研究人员还确定了流式细胞术检测RECAF阳性表达的最佳截断值为≥13.31%，以区分RECAF阳性的急性白血病患者与RECAF阴性患者及正常对照。
结论：研究结果表明，RECAF可能成为区分白血病原始细胞的重要生物标志物，并可能成为未来监测可测量残留病（MRD）的有用工具。这些进展有望改善临床结局，并加强对这一高危人群的患者监测和管理。
**RECAF在儿童急性白血病中表达的初步研究解读**
急性白血病（Acute Leukemia, AL）是儿童最常见的恶性肿瘤，约占儿童癌症的90%以上，其中以急性淋巴细胞白血病（Acute Lymphoblastic Leukemia, ALL）最为多见，急性髓系白血病（Acute Myeloid Leukemia, AML）相对少见。儿童AL的诊断依赖于形态学、免疫表型、细胞遗传学及分子遗传学等多学科手段，其中流式细胞术免疫表型分析（Flow Cytometric Immunophenotyping, FCI）是鉴别原始细胞谱系和亚型的关键技术，也是监测治疗后微小残留病（Minimal Residual Disease, MRD）的重要工具。尽管现有诊断体系已较为完善，部分AL病例仍缺乏特异性谱系或幼稚阶段标志物，导致MRD追踪困难。因此，寻找新的生物标志物以提升AL的诊断和监测能力具有重要临床意义。
RECAF是甲胎蛋白（Alpha-Fetoprotein, AFP）的受体，在胚胎发育中介导AFP进入组织，出生后表达显著下降。然而，多种恶性肿瘤可异常重新表达RECAF，提示其可能作为广谱肿瘤标志物。既往研究已在卵巢癌、肝癌、睾丸癌等实体瘤中观察到RECAF表达，并在B细胞非霍奇金淋巴瘤/慢性淋巴细胞白血病（B-NHL/CLL）中呈现特异性模式。然而，RECAF在儿童急性白血病中的流式细胞术表达特征尚未被系统评估。基于此，研究人员在埃及Ain Shams University Hospitals的儿科血液/肿瘤科开展了一项初步临床研究，纳入2023年至2025年间80例初发AL患儿（40例ALL、40例AML）及40例年龄、性别匹配的非恶性对照（如免疫性血小板减少症或脾功能亢进），通过流式细胞术检测骨髓中白血病原始细胞的RECAF表达，并分析其与临床、实验室及免疫表型参数的相关性。研究论文发表于《Journal of the Egyptian National Cancer Institute》。
该研究采用的关键技术方法包括：对骨髓穿刺样本进行流式细胞术分析，使用Beckman Coulter NAVIOS流式细胞仪检测急性白血病组合标志物（包括CD34、HLA-DR、CD13、CD33、MPO、CD10、CD19、CD20、CD79a、CD2、CD5、CD7等）及RECAF表面表达。RECAF检测使用一抗（AFP受体抗体2B8）和APC标记的二抗，通过CD45/SSC设门确定原始细胞群，CD34阳性时进一步以CD34设门。数据分析采用SPSS 23，包括非参数检验、卡方检验、ROC曲线及多因素线性回归。样本队列来源于上述单一中心。
结果部分的主要发现如下：
**A. 对照组与患者组的比较**
与对照组相比，AL患者的骨髓原始细胞中RECAF阳性百分比（RECAF%）显著升高（P < 0.01），但平均荧光强度（MFI）无显著差异。此外，患者组血红蛋白显著降低，外周血和骨髓原始细胞百分比显著升高，肝脾肿大发生率更高。
**B. AML与ALL亚组的比较**
AML组与ALL组在RECAF%上无显著差异，但AML组的RECAF MFI显著高于ALL组（P < 0.05）。两组在临床、实验室及第28天完全血液学缓解（CHR）率上无显著差异。
**C. RECAF%及MFI与其他参数的相关性**
在全部患者中，RECAF%与CD64、CD11c、CD13等标志物存在相关性；RECAF MFI则与CD117等相关指标相关（具体相关性见原文表1）。
**D. 多因素线性回归分析**
多因素回归显示，CD13是唯一与RECAF%独立正相关的因素（β=0.314, P=0.040）；CD117是唯一与RECAF MFI独立正相关的因素（β=0.305, P=0.041），而MPO、CD64、CD11c及骨髓原始细胞百分比均无独立关联。
**E. RECAF表达的判别效用**
通过ROC曲线分析，确定RECAF阳性截断值为≥13.31%，可有效区分AL患者与对照，并据此将患者分为RECAF阳性组和阴性组。
**F. RECAF阴性与阳性AL患者亚组比较**
所有AML和T-ALL患者均呈RECAF阳性，而B-ALL患者中部分为阳性、部分为阴性。RECAF阳性患者以CD34阳性原始细胞为主，阴性患者则缺乏CD34等幼稚标志物。
**G. RECAF阴性与阳性B-ALL患者比较**
8例RECAF阴性B-ALL患者均表现为CD34、TdT、HLA-DR和CD20阴性，但CD19、CD79a和CD10阳性，提示这些细胞可能处于更成熟的B细胞分化阶段。
**H. CD34与RECAF表达的关系**
所有CD34阳性AL患者均呈RECAF阳性，而RECAF阴性患者均为CD34阴性，提示RECAF表达与细胞幼稚程度密切相关。
讨论部分指出，RECAF在AL原始细胞中的高表达支持其作为白血病相关标志物的价值，尤其在正常造血细胞（如hematogones）不表达RECAF的情况下，可用于区分白血病原始细胞和正常前体细胞。这使RECAF有潜力成为MRD监测的辅助工具，特别是在CD19缺失的复发B-ALL或缺乏明确白血病相关免疫表型（LAIP）的AML病例中。然而，RECAF在第28天CHR方面未显示预后价值，与既往部分研究一致。研究人员建议将RECAF纳入AL常规诊断组合，特别是对缺乏谱系或幼稚标志物的病例，以提升随访精准度和治疗管理。
研究结论翻译如下：本研究是首个通过流式细胞术探索儿童急性白血病中RECAF表达的研究。数据显示，急性白血病患者的RECAF水平显著高于非白血病对照，支持RECAF表达有助于区分白血病原始细胞与正常造血前体细胞。这些发现提示，RECAF可作为早期检测白血病原始细胞和监测AL患者微小残留病（MRD）的新生物标志物。研究人员还建议，对于缺乏特定谱系、幼稚阶段标志物或LAIP的AL病例，应将RECAF检测纳入常规诊断流程，以增强随访精准性和治疗管理。然而，本研究存在样本量小、单中心设计以及未评估诱导治疗后RECAF变化和基因型差异等局限性。未来研究应涵盖更多白血病类型、更广年龄范围，并开展更详细的流式细胞术、染色体和分子分析。此外，长期随访对于确定RECAF对总生存期（OS）和无病生存期（DFS）的影响至关重要。
