本土淡紫拟青霉 ITS-5.8S rDNA 区域的分离与分子鉴定及其对华北大黑鳃金龟（鞘翅目：金龟子科）的致病性

《Biologia》：Isolation, molecular characterization of indigenous Metarhizium anisopliae using ITS-5.8 s rDNA region and its pathogenicity against white grub, Holotrichia serrata (Coleoptera: Scarabaeidae)

　　

摘要

蛴螬（Holotrichia serrata）是主要的土栖害虫，会导致各种作物显著减产。本研究旨在分离、分子表征一株本土Metarhizium anisopliae菌株，并在实验室条件下评估其对H. serrata三龄幼虫的致病性。该真菌分离株通过昆虫诱饵法获得，并根据形态学特征和 ITS (ITS1-5.8S–ITS2) rDNA 测序进行鉴定。序列分析显示与已知M. anisopliae分离株具有 98.60%–100% 的相似度，确认了其分类学身份。使用不同的分生孢子浓度（1 × 10³ 至 1 × 10¹⁰ 孢子 mL^?1）进行生物测定，以评估幼虫随时间变化的死亡率。结果显示死亡率呈明显的剂量和时间依赖性增加。处理后 24 小时未观察到死亡。初始幼虫死亡首先在较高分生孢子浓度（1 × 10⁵–1 × 10¹⁰ 孢子 mL^?1）下于 48 小时观察到，表明真菌致病性的开始，最高死亡率（66.66%）出现在 1 × 10¹⁰ 孢子 mL^?1 处理 120 小时后。半数致死时间（LT₅₀）和 LT₉₀ 值随孢子浓度增加而降低，分别为 8.95 至 7.00 天和 14.80 至 9.50 天，表明较高剂量下毒力增强。真菌感染的典型症状，包括活动能力减弱、停止取食以及尸体上出现绿色孢子，证实了致病性的成功。研究突出了M. anisopliae对H. serrata 的强生物防治潜力，表明其适合作为化学杀虫剂的环保替代品。这些发现支持将其纳入可持续害虫管理计划，并为进一步的田间评估和制剂开发奠定了基础。