《Frontiers in Lab on a Chip Technologies》：Extracellular vesicle-integrated brain organoid-on-a-chip systems for neuroimmune communication and precision therapy in viral encephalitis
病毒性脑炎通过直接病毒损伤、血脑屏障(Blood-Brain Barrier, BBB)功能障碍以及神经细胞、血管细胞和免疫细胞之间失调的通讯等综合效应，导致显著的神经系统发病率和死亡率。细胞外囊泡(Extracellular Vesicles, EVs)日益被认为是这种通讯的重要介质，因为它们在神经元、星形胶质细胞、小胶质细胞、内皮细胞和外周免疫细胞之间转移蛋白质、脂质、病毒成分、细胞因子相关信号和调控RNA。根据其细胞来源和所携带的货物，EVs既可以支持抗病毒防御，也可能促进病毒播散、神经炎症、屏障损伤和持续性神经后遗症。本叙述性综述综合了病毒性脑炎中EV–神经免疫轴(EV–neuroimmune axis)的证据，并评估了这些证据如何为脑类器官芯片(Brain Organoid-on-a-Chip, BOoC)模型的设计提供信息。本综述区分了已有确证的研究发现与一个拟议的整合平台——该平台将结合患者来源的脑类器官、BBB介入的血管和免疫区室、实时EV示踪、跨内皮电阻和电生理传感以及多组学分析。现有研究支持该框架的多个独立组成部分，但一个具有闭环人工智能(Artificial Intelligence, AI)控制的完全整合的EV–BOoC系统尚未在病毒性脑炎中得到验证。因此，数字孪生、自主治疗优化和患者特异性临床预测被呈现为未来研究方向而非当前能力。这一经过校准的框架确定了可测量的设计需求、证据缺口以及用于机制研究、生物标志物发现和精准治疗筛选的转化优先事项。
1 引言
病毒性脑炎是一种由嗜神经病毒引起的严重脑部炎症性疾病，全球年发病率约为每10万人7至15例，在中低收入国家疾病负担尤为突出。未经治疗的1型单纯疱疹病毒(Herpes Simplex Virus type 1, HSV-1)脑炎死亡率接近70%；即使使用阿昔洛韦治疗，仍有30%至50%的成人患者出现持续性癫痫发作、认知障碍或偏瘫。在美国，脑炎相关住院的年度医疗费用超过20亿美元。全球疾病负担还涵盖新发和再发的嗜神经RNA病毒，如寨卡病毒(Zika Virus, ZIKV)、西尼罗病毒(West Nile Virus, WNV)、日本脑炎病毒(Japanese Encephalitis Virus, JEV)和严重急性呼吸综合征冠状病毒2(Severe Acute Respiratory Syndrome Coronavirus 2, SARS-CoV-2)。疾病严重程度并非仅由病毒细胞毒性决定，还反映了连接神经元、星形胶质细胞、小胶质细胞、内皮细胞和浸润性外周免疫群体的神经免疫网络的破坏。TNF-α等促炎介质可增加BBB通透性并刺激胶质细胞活化，形成在病毒清除后仍可持续存在的神经炎症环路。这种持续的功能失调导致了幸存者中观察到的认知、精神和癫痫后遗症。
常规实验模型不能完全再现人类疾病。动物模型在BBB生物学、免疫反应和大脑结构方面与人类存在差异，可能导致转化失败。二维培养缺乏脑组织的三维细胞结构和机械环境，而常规静态类器官通常缺乏功能性血管和完整的免疫区室。BOoC平台结合诱导多能干细胞(Induced Pluripotent Stem Cell, iPSC)来源的三维神经组织与微流控灌注以及屏障完整性、细胞因子动力学和电生理活性的实时监测，可以解决其中部分局限性。EVs由几乎所有细胞类型释放，参与细胞间通讯，能穿越生物屏障并参与保护性和致病性神经免疫反应。它们作为疾病介质和潜在治疗载体的双重角色，使其与生物标志物发现、机制研究和精准药物递送密切相关。
既往综述已确立EVs可参与病毒免疫逃逸、中枢神经系统侵入和胶质细胞相关的神经退行性变。本综述的独特贡献在于将这些证据转化为一个模型设计框架，将EV生物学与具有BBB功能的BOoC系统、EV组学(EV-omics)和AI辅助分析联系起来。因此，EV–神经免疫轴在此作为组织框架而非新发现的生物通路，用于定义可测量模块、区分当前证据与预期能力、并确定病毒性脑炎研究的验证优先事项。
2 病毒性脑炎作为一种多细胞神经免疫疾病
2.1 嗜神经病毒与中枢神经系统入侵机制
嗜神经病毒通过三种主要途径入侵中枢神经系统(Central Nervous System, CNS)：血行播散，即循环病毒感染或穿越BBB内皮细胞；沿外周神经的逆行轴突运输，如HSV-1从三叉神经通路向颞叶的传播；“特洛伊木马”机制，即受感染的单核细胞或巨噬细胞穿越BBB。六种主要嗜神经病毒的入侵策略、细胞嗜性、临床特征和后遗症各有不同：HSV-1通过三叉神经/嗅神经逆行轴突运输感染神经元，表现为局灶性坏死性脑炎、发热、癫痫和意识改变；ZIKV通过血行和单核细胞特洛伊木马机制感染神经祖细胞、神经元和胶质细胞，导致先天性小头畸形；WNV通过蚊虫叮咬后血行播散感染前角神经元和小胶质细胞，引起弛缓性瘫痪和脑炎；SARS-CoV-2通过血行、嗅神经、肠源性及脉络丛途径感染脉络丛、内皮细胞和神经元；狂犬病病毒通过外周神经逆行轴突运输感染脑干、海马和边缘系统神经元；JEV通过蚊虫叮咬血行播散感染丘脑、基底节和脑干神经元。
2.2 血脑屏障破坏
病毒入侵和局部免疫浸润破坏维持BBB不通透性的紧密连接复合体，包括occludin、claudin-5和zonula occludens-1。这些蛋白的丢失或重新分布增加细胞旁通透性，使血浆蛋白、毒素和炎症介质进入神经毡。TNF-α和IL-6可维持屏障损伤，同时诱导内皮细胞上血管细胞黏附分子1(VCAM-1)和细胞间黏附分子1(ICAM-1)的表达，从而促进白细胞黏附和跨内皮迁移。微工程化脑芯片研究进一步表明，内皮细胞主动分泌趋化因子并参与T细胞和单核细胞的募集，而非仅作为被动受损的屏障。
2.3 神经免疫通讯中的细胞参与者
许多嗜神经病毒以神经元为主要复制位点，同时诱导I型干扰素反应。星形胶质细胞支持BBB完整性和神经营养功能，但在感染期间变为反应性并释放塑造固有免疫反应的细胞因子和趋化因子。小胶质细胞作为CNS驻留巨噬细胞，可迅速转为以活性氧(Reactive Oxygen Species, ROS)和炎性细胞因子为特征的前炎症状态，有助于病毒遏制但可能导致旁观者神经元损伤。内皮细胞活化募集外周CD8
+ T细胞和炎性单核细胞；这些细胞虽可能促进病毒清除，但其浸润也可损伤周围神经组织。
2.4 神经炎症的急性和慢性后果
急性神经损伤阶段，TNF-α、IL-6和I型干扰素不受控制的释放导致细胞因子风暴，引起脑水肿、神经元凋亡和兴奋性毒性。即使在病毒清除后，胶质细胞反应性和经由EVs的慢性信号传导仍维持低水平神经炎症，逐渐破坏突触可塑性和神经环路稳定性，导致认知障碍、癫痫易感性和最终神经退行性变。最重要的是，疾病严重程度不仅取决于病毒载量，还取决于神经免疫通讯网络的功能状态。因此，恢复这些网络是首要治疗目标之一。
3 脑类器官芯片系统：迈向人类相关的神经感染模型
3.1 体外CNS模型的演变
从二维单层培养到EV整合BOoC平台的进展，是由常规模型的三个局限性驱动的：生理相关性有限、血管化不足和免疫代表不完整。二维培养缺乏三维细胞结构和细胞外基质力学特性，简单球体提供的组织结构有限，静态脑类器官可能出现坏死核心且免疫学上不完整。器官芯片技术增加了灌注、剪切应力、空间控制和实时传感。具有EV感知能力的BOoC将通过实现囊泡采样和运输分析扩展这些能力；然而，这种完全整合的配置仍是拟议架构而非已确立的病毒性脑炎模型。
3.2 脑类器官
脑类器官是由人类多能干细胞衍生的自组织三维组织，可再现区域性大脑发育、细胞多样性和组织结构的选择性特征。大脑皮层、皮层和前脑类器官可模拟放射状胶质细胞组织、由内而外的皮层分层和区域特异性基因表达。通过融合区域特异类器官形成的组装体还可模拟神经元迁移和区域间环路形成。这些系统与本研究相关，因为它们提供了可在其中跨神经细胞类型检查EV介导通讯的人类三维环境。其局限性包括血管缺失或不完整、氧气扩散受限、较大组织中形成坏死核心以及小胶质细胞和外周白细胞的代表不完整。
3.3 器官芯片技术
微流控OoC平台通过提供受控灌注解决血管和力学限制，灌注可运输营养物质、清除代谢产物并对内皮细胞施加生理相关剪切应力。明确的生化梯度可实现病毒播散和趋化因子驱动的免疫募集的时空分析。集成跨内皮电阻(Transendothelial Electrical Resistance, TEER)传感器可实现非侵入性屏障完整性监测，多电极阵列(Multielectrode Arrays, MEAs)记录神经元网络活动。一项关于东部马脑炎病毒的BBB器官芯片研究进一步证明了这些系统在模拟病毒诱导的屏障损伤和评估候选应对措施方面的价值。
3.4 脑类器官芯片平台与概念架构
拟议的EV整合BOoC架构包含四个功能连接模块。第一，神经区室包含iPSC来源的脑类器官，含有神经元、星形胶质细胞并在可行情况下整合小胶质细胞。第二，BBB分隔层——由脑微血管内皮细胞及支持性周细胞和星形胶质细胞终足组成——物理上置于血管和神经区室之间。第三，管腔血管区室接收T细胞和单核细胞，以便测量其跨BBB的黏附和跨内皮迁移，而非与类器官直接连续。第四，传感模块结合EV采样或捕获、跨屏障的TEER电极和神经区室下方的MEA。各独立组件已有现有研究支持，但将其整合为单一EV聚焦的病毒性脑炎平台仍有待实验验证。
3.5 病毒感染研究中的当前应用
BOoC和类器官模型提供了常规系统难以获得的机制信息。脑类器官中神经祖细胞的ZIKV感染再现了与先天性小头畸形相关的放射状胶质细胞丢失和皮层变薄。脉络丛和屏障模型阐明了SARS-CoV-2如何破坏血液–脑脊液界面而无需广泛的产毒性神经元感染。在HSV-1脑类器官中，结合单细胞RNA测序、空间转录组学、电生理学和免疫染色的研究显示，阿昔洛韦显著降低病毒复制，但未完全抑制TNF–NF-κB信号传导或组织损伤。最近的研究进一步扩展了该领域：BBB–脑类器官共培养证明HIV感染T细胞和小胶质细胞的EVs可穿越屏障，诱导IL-1β和TNF-α并激活类器官中的炎症和细胞死亡通路；BBB芯片则能够评估针对东部马脑炎病毒的应对措施。
4 细胞外囊泡作为神经免疫通讯的核心介质
4.1 EV分类与生物发生
EVs是由脂质双分子层包裹的不具备复制能力的囊泡，含有蛋白质、脂质和核酸，反映祖细胞的生理状态。主要EV亚类根据其生物发生途径和大小定义。外泌体经ESCRT机制源于多泡体，微囊泡直接从质膜出芽，凋亡小体在凋亡过程中释放并含有细胞器片段。脂质双分子层保护EV货物免受细胞外蛋白酶和核酸酶降解，使其能够跨生物屏障实现遗传信息的功能性递送。
4.2 健康CNS中的EV通讯
在稳态条件下，神经元释放载有miR-124和神经营养因子的EVs，调节星形胶质细胞代谢和小胶质细胞突触监视。星形胶质细胞释放的EVs通过提供抗炎介质和神经元存活所需的代谢底物，帮助将炎症脑转化为神经营养环境。脑微血管内皮细胞释放的EVs告知周细胞和星形胶质细胞BBB健康状况，并通过液体内分泌学将CNS状态信息传送至血液。这种持续的囊泡交换维持免疫豁免，同时保持CNS与全身生理信号的整体连接。
4.3 EV介导的病毒播散
嗜神经病毒可利用EV生物发生和货物分选途径促进播散和免疫逃逸。ZIKV相关物质包括病毒RNA和蛋白已在EV富集组分中被报告，提示囊泡转移可能补充受体依赖性感染途径。SARS-CoV-2感染细胞释放的EVs同样可能含有病毒或炎症性货物，能够激活不支持产毒性感染的受体细胞。由于EV制剂在大小和成分上与病毒颗粒及非囊泡颗粒可能重叠，在将“感染性囊泡”活性明确归因于EVs之前，需要严格的分离、感染性对照和正交表征。
4.4 EV介导的神经炎症和BBB功能障碍
病毒感染可将CNS EV分泌组转向促炎性货物。与EV相关的损伤和病原相关信号可激活受体小胶质细胞中的TLR和NF-κB等固有免疫通路，从而促进TNF-α、IL-6和I型干扰素反应。星形胶质细胞或内皮细胞来源的EVs也可能通过运输炎症介质或改变紧密连接蛋白的基质重塑酶而促进屏障功能障碍。最近的BBB–类器官共培养数据直接支持这一机制：HIV相关EVs降低TEER、穿越多细胞BBB并在脑类器官中诱导炎症细胞因子和凋亡。然而，EV效应的方向和大小具有情境依赖性，应与可溶性共分离物和直接病毒损伤相区分。
4.5 EV与病毒后神经系统后遗症
急性感染后，通过EVs的病理信号传导持续存在。慢性活化的星形胶质细胞和小胶质细胞维持持续的EV交换，携带miR-155、神经毒性蛋白和错误折叠聚集体，导致突触可塑性进行性缺陷。这解释了长期COVID和脑炎后综合征中的认知障碍、癫痫和神经退行性变样表现。靶向调节该EV信号环路是恢复神经功能的新型治疗策略。
5 EV–神经免疫轴：统一的概念框架
5.1 定义EV–神经免疫轴
EV–神经免疫轴作为一个系统级框架发挥作用，其中病毒感染既构成细胞病变性攻击，也是对脑内囊泡通讯的关键破坏。该轴包含三个相互连接的双向网络：CNS内通讯，神经细胞交换EVs以协调抗病毒反应并维持突触稳态；CNS–BBB通讯，胶质细胞来源的EVs调节内皮通透性；CNS–外周免疫通讯，涉及脑来源EVs动员全身免疫细胞，外周EVs则反向调节CNS神经炎症。环路中任何片段的功能失调都会被其他片段放大，这解释了为何局灶性病毒感染常引发全系统神经病理。
5.2 EVs作为通讯货币
与通常仅传递有限警报信号的可溶性细胞因子不同，EVs可转移反映供体细胞状态的蛋白质、脂质和调节性RNA的协调货物。在病毒性脑炎期间，这种稳态通讯系统可能被携带病毒物质或炎症调节因子的囊泡改变方向，从而改变受体细胞行为。这种囊泡转移为局部感染影响远处神经和血管区室提供了合理机制，但EVs的相对贡献必须在每种病毒和模型中通过实验确立。
5.3 对模型设计的系统级意义
EV–神经免疫轴要求在病毒性脑炎模型设计中实现范式转变。捕捉这些动力学需要在脑芯片平台内实时监测EV产生、货物组成和区室间运输。此外，应对该网络的复杂性需要先进的综合分析框架，整合电生理、转录组和蛋白质组数据。实施AI驱动的多组学流程对于表征这些EV介导的神经免疫相互作用并验证病毒性脑炎期间的治疗干预至关重要。
6 将EV生物学整合入脑类器官芯片系统
6.1 EV示踪的工程方法
需要多重检测策略来解析微流控环境中的纳米尺度囊泡事件。区室间EV运输可通过荧光膜标记或基因编码标记如CD63–GFP监测，但需控制染料聚集体和非囊泡荧光。集成光流控生物传感器支持单颗粒检测和计数，免疫亲和平台如ExoChip可实现芯片上捕获以进行下游蛋白质或miRNA分析。表面等离子体共振传感器提供EV相关表面信号的无标记监测。这些方法可提供EV丰度、运动和货物的互补测量，但没有单一方法足以鉴定EV。
6.2 EV运输与货物图谱
细胞类型特异性报告基因与区室化微流控相结合可用于绘制EV的来源、目的地和货物。脑类器官释放上清来源的细胞外囊泡(SuEVs)和基质结合纳米囊泡(MBNVs)。这些组分在脂质和RNA组成上存在差异，说明采样位置可影响所回收的生物学信号。在未来的病毒性脑炎BOoC中，质谱、小RNA测序或NanoString分析可检验HSV-1或WNV相关货物特征是否在连续血管、BBB和神经区室中出现。这是一项拟议的实验能力；在这种整合的顺序微流控系统中，病毒特异性特征尚未建立。
6.3 实时神经免疫通讯分析
BOoC整合的一个主要优势是连续多参数监测。使用多重微珠免疫分析，可从相同微流控流出液中同时测量细胞因子和EV分泌动力学。与类器官底板整合的MEAs记录自发局部场电位和动作电位爆发，可在病毒攻击后数小时内检测网络过度兴奋。同时，TEER传感器提供连续亚欧姆级分辨率的BBB完整性测量，实时捕捉屏障降解动力学。因此可从单次实验运行中重建时间序列，使研究人员能够区分神经炎症中的启动事件和维持事件。
6.4 高级建模与个性化应用
正在开发包括器官芯片系统在内的高级体外模型，以研究神经血管病理和宿主特异性病毒感染反应。患者来源的iPSC类器官可能保留影响病毒易感性、炎症信号传导或治疗反应的遗传变异。在这些个性化模型中，EV货物分析是识别疾病严重程度和治疗反应分子相关性的新兴方法。然而，目前患者特异性EV特征需要在足够大的临床注释队列中验证，方能支持诊断或治疗决策。
7 人工智能与多组学整合
7.1 单细胞和空间转录组学
单细胞和空间转录组学方法可解析受感染类器官内的细胞类型特异性反应和区域异质性。在HSV-1脑类器官中，scRNA-seq显示感染相关的细胞状态转变以及阿昔洛韦治疗后TNF相关炎症程序的持续激活，TNF信号在此被描述为通路水平反应而非细胞表面标记物。同一研究中的空间转录组学将感染相关的突触和应激反应程序变化定位于组织结构中。这些方法共同支持将病毒分布、细胞身份、炎症信号和神经功能障碍相关联的感染状态图谱。
7.2 EV组学：蛋白质组学、脂质组学和转录组学
CNS来源EV制剂的蛋白质组学分析已鉴定出经典EV蛋白以及神经元和胶质细胞来源的相关货物。前脑和后脑模式化类器官释放的EVs共享核心蛋白质组，但也包含可能影响受体细胞的区域相关亚群。同一工作报告了MBNVs中不同的脂质富集，包括与膜组织和信号传导相关的甘油磷脂和鞘脂。这些发现支持多模式EV分析，但尚未确立经过验证的病毒性脑炎临床生物标志物组合。
7.3 AI驱动分析与患者分层
机器学习方法正越来越多地被探索用于整合类器官成像、电生理学和多组学数据。当前研究支持形态学质量控制、特征提取、疾病状态分类和假设生成等任务，但性能仍取决于样本量、数据质量和外部验证。多组学整合可能有助于识别分子亚组和候选治疗反应特征。
7.4 病毒性脑炎的预期数字孪生
病毒性脑炎的数字孪生将是一种计算表征，利用患者来源BOoC、EV多组学和临床观察的数据进行迭代更新。原则上，此类模型可模拟疾病轨迹并对候选干预措施进行排序。目前尚不存在经过验证的病毒性脑炎数字孪生，因此该概念应被视为研究目标而非可操作平台。预期工作流程为：患者iPSCs→个性化BOoC→EV和功能分析→计算模型→候选治疗排序→实验验证→临床结局反馈。在这个未来框架中，芯片实验和治疗结局可用于更新模型参数并在连续迭代中改善预测。在此类闭环系统支持临床转化之前，需要标准化的BOoC制造、可重复的EV测量、透明的模型开发、独立外部验证以及与患者结局的前瞻性比较。因此，所提出的系统最好被视为产生假设的临床前框架，而非当前临床决策的替代品。
8 EV基础精准治疗与药物筛选
8.1 天然EVs作为治疗载体
EVs在CNS递送方面可能比某些合成纳米颗粒载体具有优势，包括生物相容性膜、细胞来源靶向机会和分子货物保护能力。然而，BBB穿越并非对所有EV群体普遍适用，取决于来源、剂量、给药途径、表面组成和疾病状态。与许多脂质体不同，EVs可展示影响摄取的内源性膜蛋白，但其异质性使制造和药代动力学控制复杂化。低免疫原性或神经组织嗜性等拟议优势需经产品特异性验证。主要局限包括产量变异、货物异质性、共分离污染物和体内生物分布不确定。
8.2 工程化EVs：精准货物递送
生物工程方法可将天然异质性、载有货物的EVs转化为分子编程的治疗制剂。装载方法包括电穿孔、超声处理和共转染，以及通过与外泌体膜蛋白融合表面展示靶向配体。CNS模型中的工程化功能性EV设计包括：携带抗NF-κB siRNA的EVs减少胶质细胞活化和旁观者神经元损伤；miRNA-219递送促进髓鞘再生；ACE2或CD4修饰的纳米诱饵受体作为纳米海绵在细胞进入前吸收游离SARS-CoV-2或HIV病毒颗粒。此外，将常规抗病毒药物封装入EVs可降低脱靶毒性并增强CNS递送。
8.3 EV整合芯片中的治疗筛选
EV整合BOoC可在人类组织情境中同时评估抗病毒活性、炎症信号、屏障完整性和神经功能。候选药物或工程化EVs可引入血管区室，同时监测病毒复制、EV谱、细胞因子、TEER和MEA活性。治疗后的EV货物分析可能提供补充活力和病毒载量终点的分子读数。该拟议工作流程在用于治疗优先级排序之前，需要针对常规检测和体内或临床结局进行验证。
8.4 精准医疗与个性化优化
患者来源的iPSC-BOOoC模型可实现在明确遗传背景下比较治疗反应。原则上，患者特异性芯片可帮助研究宿主变异如何影响病毒复制、炎症信号、剂量反应和EV货物。它们也可能支持用于纵向血液或CSF监测的探索性生物标志物开发。这些应用仍属预期性，需要可重复性研究、充分效力的患者队列以及与临床结局的一致性。
8.5 闭环治疗平台
长期研究目标是将BOoC传感与AI辅助决策支持耦联于闭环实验系统：药物给药→EV/生物学反应监测→AI分析→治疗优化。在此类未来系统中，实时EV、细胞因子、TEER和MEA数据可经计算分析以建议下一次实验剂量或配方。重复循环可能改善临床前优化，但自主治疗选择目前尚未确立，需要严格的人类监督、透明算法、预定义安全约束和前瞻性验证。
9 转化挑战与未来机遇
在EV整合BOoC平台接近临床应用之前，必须解决重要的生物学、技术和监管障碍。iPSC来源类器官常类似胎儿而非成人脑组织，限制了对年龄依赖性病毒易感性和成熟环路功能障碍的建模。批次间和细胞系间变异性可损害可重复性，而血管和免疫区室不完整限制了对长期宿主反应的研究。这些局限性对病毒性脑炎尤为重要，因为年龄、免疫状态、内皮功能和外周免疫募集强烈影响疾病严重程度。
EV分析引入了额外的方法学挑战，包括产量低、非囊泡物质共纯化以及批量化测量掩盖的功能异质性。单囊泡多组学和高分辨率成像正在发展，但尚不可扩展至常规临床吞吐量。转化还需要GMP兼容的iPSC和EV制造、统一的感染和采样方案、生物安全控制、多中心可重复性研究以及芯片药理学预测与人类结局一致性的前瞻性验证。
未来机遇包括用于连续监测神经元活动、病毒播散和EV释放的非破坏性生物传感器；脑芯片与外周器官模型的流体耦联；以及用于模型验证的多中心数据基础设施。AI引导控制最终可能支持类器官培养和实验适应，但自主成熟或临床预测的主张应保持预期性直到独立验证。临床转化将依赖于标准化EV表征、患者CSF和血液的匹配分析以及跨多样队列的透明验证。
10 结论
病毒性脑炎最宜被理解为直接病毒损伤和神经免疫通讯失调的综合后果。EVs可在神经、胶质、内皮和外周免疫细胞之间携带病毒成分、炎症介质和调节分子，从而将急性感染与屏障功能障碍和持久性神经后遗症联系起来。本综述以EV–神经免疫轴为组织框架，并将该轴与具有BBB功能的BOoC模型、EV组学和计算分析的整合确定为主要概念进展。现有证据支持许多独立组成部分，但完整的EV整合BOoC、数字孪生和闭环治疗系统仍是未来目标。进展需要标准化的EV表征、可重复的类器官和血管模块、临床相关的免疫整合、可扩展制造、多中心数据集和前瞻性验证。满足这些要求可建立用于机制研究、生物标志物发现以及为病毒性脑炎和相关神经炎症和/或自身免疫性疾病开发经过仔细校准的精准治疗的人类相关平台。
