Combretum aculeatum Vent.的地上部分的潜在伤口愈合作用；通过LC-QTOF-MS/MS和分子对接方法证实的FOKO1/MIP2信号通路调控机制

《Journal of Ethnopharmacology》：Potential Wound Healing Effects of Combretum aculeatum Vent. Aerial Parts; FOXO1/MIP2 Modulation Supported by LC-QTOF-MS/MS and Molecular Docking Approaches

　　

摘要

民族药理学意义

Combretum aculeatum广泛分布于苏丹和南达尔富尔地区，传统上被用于伤口愈合。

研究目的

本研究旨在利用Mebo?作为参考标准，探讨C. aculeatum的乙醇提取物对小鼠模型的伤口愈合效果。

材料与方法

将总提取物（2.5%和5%）局部应用于小鼠伤口模型，以评估其伤口愈合潜力。同时分析了多种指标（I型胶原蛋白、谷胱甘肽（GSH）、Forkhead box蛋白O1（FOXO1）、巨噬细胞炎症蛋白2（MIP2）和丙二醛（MDA）的水平，并进行了组织病理学评估。随后使用液相色谱-四极杆飞行时间串联质谱（LC-QTOF-MS/MS）对提取物进行了表征。还对初步鉴定出的代谢物进行了分子对接和动态研究。

结果

局部使用C. aculeatum提取物（2.5%和5% w/w）处理后，I型胶原蛋白、GSH、FOXO1和MIP2的水平有所增加，皮肤中的MDA含量显著降低。组织病理学分析显示皮肤结构得到改善，表现为上皮再生和细胞外基质沉积增强，这与氧化应激和炎症生物标志物的调节相一致。LC–MS/MS分析首次在乙醇提取物中鉴定出57种代谢物。对初步鉴定的单宁和萜烯进行的计算机模拟表明，Eschweilenol C对Keap1和TNF-α受体的结合亲和力较高，这一结论得到了分子动力学模拟和MM/PBSA或MM/GBSA计算的支持。

结论

研究表明，C. aculeatum的地上部分是加速伤口愈合的有前途的治疗候选物。

引言

自古以来，药用植物就是各种文明医疗体系的重要组成部分，作为主要的治疗手段，在保护和发展人类健康方面发挥了重要作用（Edeoga等，2005；Hoareau和Dasilivia，1999）。传统医学得到了广泛应用，其经济重要性正在迅速增加，尤其是在发展中国家，主要通过使用草药（Agra等，2007）。其中一种植物属于金丝桃科（Combretaceae），该科在科学文献中有广泛记载。该科主要分布在热带和亚热带地区，如非洲和巴西，包含约20个属和600种植物。Combretum属是其中最大的属，约有370种。植物化学研究表明，这类植物含有多种化合物，包括菲类、黄酮类、酚酸、单宁、三萜类、苯并香豆素、木脂素和氨基酸（de Morais Lima等，2012；Pietrovski等，2006）。

Combretum aculeatum Vent.（同义词：Combretum leuconili schweinf.、C. holstii Engl.、C. denharbretum Engl. 和 Diels.、C. ovale R.Br. ex G.Don、C. stefaninanum Pamp 以及 Poivrea aculeata (Vent.) DC.）广泛分布在苏丹、埃塞俄比亚、厄立特里亚、亚洲和南美洲，是一种大型木质攀缘灌木（Hamad等，2019b）。塞内加尔的Sereres部落使用其茎部治疗眼科疾病和伤口，同时使用其根部和/或地上部分作为泻药，以及治疗伤口、寄生虫病、胃痛、食欲不振、淋病、绞痛、麻风病和卡他病（Eklu-Natey等，2012）。在苏丹，树皮、叶子和种子提取物被用于治疗皮肤结核、发热、伤口、蝎子蜇伤、蛇咬伤、滴虫病、背痛、肌肉骨骼疼痛和食欲不振（Albagouri等，2014）。该植物中含有多种化合物，如β-谷甾醇及其葡萄糖苷、阿琼醇酸、橄榄酸、亚洲酸、科罗索酸、马斯林酸、α-薄荷酸、3,3′-二-O-甲基鞣花酸和3,3′,4-三-O-甲基鞣花酸-4′-O-葡萄糖苷（Abdel Karim等，2017；Dawe等，2017；Lamien-Meda等，2010）。药理数据显示，该植物具有抗软体动物、抗幼虫、抗绦虫、免疫调节和抗氧化活性（Hamad等，2019a；Hamad等，2019b）。

因此，本研究首次通过调节氧化应激和炎症，证实了C. aculeatum地上部分的传统伤口愈合功效。I型胶原蛋白是细胞外基质（ECM）的关键成分（Moaness等，2024），它参与整个修复过程（Salama等，2024a），为迁移细胞提供支架，并赋予愈合组织抗拉强度（Mathew-Steiner等，2021）。在伤口处，炎症会破坏胶原蛋白和平滑肌肌动蛋白（SMA），这些都是细胞外基质（ECM）的组成部分（Kamel等，2021）。此外，MIP2在小鼠伤口愈合的炎症阶段起着重要作用，作为强大的趋化因子吸引中性粒细胞和单核细胞到伤口部位，并为后续的组织修复阶段（如增殖和重塑）做准备（Salama等，2024b）。伤口切割会导致活性氧（ROS）增加，抑制细胞迁移并引发细胞凋亡（Salama等，2024a）。FOXO1通过上调抗氧化基因（Ali等，2025）和减少角质形成细胞凋亡来减轻氧化应激，从而确保伤口闭合（Rajendran等，2019）。此外，使用LC-QTOF-MS/MS全面表征了该植物的化学成分。在代谢物鉴定后，通过分子对接技术突出了最有潜力的代谢物。然后对这些候选物的稳定性进行分子动力学模拟，以研究它们复合物的稳定性，并明确特定氨基酸残基在整个模拟过程中的相互作用。

章节摘要

植物材料及提取物的制备

2015年10月，在苏丹Gadarif州的Basunga收集了Combretum aculeatum Vent.的地上部分。该植物由苏丹药用和芳香植物研究所的植物分类学助理教授Haider Abd-el-Kader博士鉴定和验证。标本（编号15.11.15.1）存放在开罗大学药学院的药用植物标本馆。将风干后的粉末状地上部分（2公斤）进行充分浸提

植物化学研究（LCQTOF-MS/MS分析)

CAE在负离子和正离子模式下进行了分析，基于分子结构式、碎片模式、保留时间和与以往文献的比较，初步鉴定出57种代谢物：六种有机酸（1-6）、两种氨基酸及其衍生物（7-8）、两种糖（9-10）、八种单宁（11-18）、四种酚酸及其衍生物（19-22）、四种黄酮类（23-26）、三种三萜类（27-29）和一种二萜类（30）、六种脂肪酸

讨论

多项研究表明，天然产物因其多种生物活性次级代谢物而具有治疗伤口的潜力（Anwar等，2025）。历史上，C. aculeatum Vent.在苏丹、厄立特里亚和埃塞俄比亚被用于治疗伤口，但目前尚缺乏相关科学证据（Hamad等，2019b）。本研究在小鼠模型中探讨了CAE的局部应用效果。

结论

本研究首次验证了Combretum aculeatum Vent.的传统伤口愈合作用，并阐明了其植物化学成分。局部应用C. aculeatum提取物（2.5%和5%）可增加I型胶原蛋白、GSH、FOXO1和MIP2的水平，同时显著降低皮肤中的MDA含量。组织病理学研究证实了该提取物对皮肤结构的保护作用，表现为上皮再生和细胞外基质生成的促进，以及氧化应激的减轻

研究的局限性

本代谢组学分析属于定性研究。虽然基于准确的质量和MS/MS碎片模式初步鉴定了57种代谢物（包括Eschweilenol C），但尚未通过经过验证的参考标准进行确定的结构确认，也未对标记化合物进行定量。因此，观察到的生物活性反映了粗提取物的整体药理效应，而非单一成分的作用。

作者贡献声明

Riham A. El-Shiekh：撰写初稿、方法学设计、实验研究。Ahmed A. El-Rashedy：撰写初稿、数据可视化、方法学设计、实验研究、正式分析。Abeer Salama：撰写初稿、方法学设计、实验研究、正式分析。Basma M. Eltanany：撰写与编辑、方法学设计、实验研究、正式分析。Ahlam M. El-Fishawy：撰写与编辑、监督、实验研究、概念构思。Manal M. Sabry：撰写与编辑

Chen等人，2019；Ylilauri和Pentik?inen，2013。

伦理声明

本研究遵循ARRIVE（动物研究：体内实验报告）指南进行。本研究得到了开罗大学的批准。

作者声明不存在利益冲突。

资金支持

本研究未接受任何特定财务支持

利益冲突声明

作者声明他们没有可能影响本文所述工作的已知财务利益或个人关系。

Mai E. Hussein|Manal M. Sabry|Ahlam M. El-Fishawy|Basma M. Eltanany|Abeer Salama|Ahmed A. El-Rashedy|Riham A. El-Shiekh

开罗大学药学院药用植物学系，开罗11562，埃及