绿色化学方法合成对苯茴酸，并比较其对斑马鱼胚胎和角质形成细胞的毒性作用

《Scientific Reports》：Green chemistry oriented synthesis of p-anisic acid and comparative toxicity versus synthetic product in zebrafish embryos and keratinocytes

　　

摘要

p-茴香酸是一种芳香族羧酸，常用于化妆品的防腐体系。在本研究中，从Pimpinella anisum种子中提取的富含反式茴香脑的精油通过高锰酸钾溶液氧化反应转化为p-茴香酸，反应过程中使用丙酮作为辅助溶剂，并通过盐酸沉淀法进行分离。由于该工艺采用了可再生的植物原料、水作为主要反应介质、适度的加热以及丙酮回收技术，因此可将其归类为绿色化学工艺；不过本研究并未进行生命周期评估、过程质量强度分析或E因子计算。所得产物通过¹H和¹³C核磁共振（NMR）技术进行表征，并通过气相色谱-质谱（GC-MS）与标准物质进行比对分析。实验探究了植物来源的p-茴香酸（NAA）与商业合成p-茴香酸（SAA）对HaCaT细胞存活率（24小时暴露）以及斑马鱼胚胎发育毒性的影响（最长观察时间为72小时胚胎期）。结果表明，在0.0125–0.05%（w/v）的浓度范围内，NAA对细胞存活率的降低作用低于SAA。NAA能够维持igf2、fabp、vtg和cyp1a等基因的表达，这些基因是评估胚胎发育、肝细胞应激、雌激素活性及外源物质代谢的重要指标；同时，NAA并未显著增加脂质过氧化产物（LPO）水平、一氧化氮（NO）浓度或谷胱甘肽过氧化酶（GST）活性。而SAA则破坏了抗氧化系统及相关发育基因的表达。由于这两种物质包含相同的活性成分，观察到的差异应被视为批次特异性现象，可能源于杂质成分或其他理化性质的不同，而非p-茴香酸自身性质的差异。