一种截短的Serpin D1变异体调控依赖Adseverin的肌动蛋白切割过程，并对破骨细胞的生成至关重要

《Cells》：A Truncated Serpin D1 Variant Regulates Adseverin-Dependent Actin Severing and Is Required for Osteoclastogenesis

　　

摘要

Adseverin是一种依赖Ca²⁺的肌动蛋白切割蛋白，可促进破骨细胞前体的融合，从而参与破骨细胞的形成。目前尚不清楚在破骨细胞生成过程中，肌动蛋白切割活性是如何被调控的。通过对破骨细胞中的adseverin免疫沉淀物进行质谱分析，发现adseverin与Serpin D1之间存在关联。纯化的Serpin D1在体外能够以依赖Ca²⁺的方式与adseverin相互作用，Ca²⁺的存在使肌动蛋白的切割活性增加了约2倍。分化为破骨细胞的细胞表达一种细胞内的截短型Serpin D1亚型，这种亚型缺乏外显子1和2以及部分外显子3。这种截短型的Serpin D1与分泌型的全长Serpin D1蛋白不同，后者具有抑制凝血酶活性的作用。在RAW264.7细胞中，TNF-α诱导破骨细胞生成的过程中，Serpin D1的这种截短型亚型的表达进一步增强。利用CRISPR/Cas9技术针对RAW264.7细胞中的Serpin D1的外显子3进行基因编辑后，皮质下的肌动蛋白纤维数量增加；此外，这种处理还改变了adseverin的空间分布，抑制了破骨细胞特异性基因的表达，并在体外将多核破骨细胞的形成率降低了90%以上。我们因此得出结论：一种细胞内的截短型Serpin D1亚型通过与adseverin相互作用来促进肌动蛋白的切割以及破骨细胞的形成。