摘要
Vernonia calvoana”（VC）是一种在西非广泛使用的药用植物，我们的研究团队发现它能够通过氧化应激、DNA损伤和S期细胞周期停滞等机制抑制OVCAR-3卵巢癌细胞的增殖。本研究的目的是阐明VC第七组分（VCF7）触发的细胞凋亡机制。OVCAR-3细胞被不同浓度的VCF7（0、8、16和32 μg/mL）处理48小时。细胞凋亡使用Annexin V/碘化丙啶（PI）染色结合流式细胞术分析进行评估；线粒体膜电位（ΔΨm）通过JC-1染色和共聚焦显微镜观察；染色质浓缩情况则利用DAPI染色分析。DNA片段化通过琼脂糖凝胶电泳检测。Caspase 3活性通过流式细胞术测定。p53、Bcl-2、细胞色素c和caspase-9的蛋白表达水平通过Western blot分析得出，而p53和Bcl-2的mRNA表达水平通过qRT-PCR评估。VCF7以浓度依赖的方式诱导细胞凋亡。Annexin V/PI染色结果显示，随着处理浓度的增加，凋亡细胞比例从10.5%升至30%，坏死细胞比例从7%升至50%。线粒体膜电位也表现出浓度相关的下降（在8、16和32 μg/mL浓度下分别下降0.96倍、0.88倍和0.85倍；p < 0.05）。DAPI染色证实了染色质的浓缩和核碎片的形成。DNA片段化分析显示，在高浓度下出现了明显的核内片段化现象，表明同时发生了细胞凋亡和坏死。Caspase-3的活性在16 μg/mL浓度时达到峰值（28%）。Western blot分析显示p53表达上调，Bcl-2表达下调，细胞色素c总量增加，caspase-9和caspase-3的表达也呈浓度依赖性增强。这些发现通过qRT-PCR在转录水平上得到了验证，结果显示p53 mRNA表达增加而Bcl-2 mRNA表达降低。综上所述，这些结果表明VCF7作为一种有前景的植物来源抗癌剂具有潜力，并支持进一步开展卵巢癌的临床前和临床研究。
