《Animals》：Dietary Supplementation with Multispecies Probiotic Fermented Broth Improves Nutrient Digestibility and Carcass Traits While Modulating the Cecal Microbiota and Thigh Muscle Fatty Acid Profile in Yellow-Feathered Broilers
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摘要：本研究评估了日粮中添加4%多菌种益生菌发酵液（multispecies probiotic fermented broth, MPFB）对815品系黄羽肉鸡表观养分消化率、胴体性状、血清免疫指标、肠道形态、盲肠微生物群及腿肌营养成分的影响。研究人员将40
摘要：本研究评估了日粮中添加4%多菌种益生菌发酵液（multispecies probiotic fermented broth, MPFB）对815品系黄羽肉鸡表观养分消化率、胴体性状、血清免疫指标、肠道形态、盲肠微生物群及腿肌营养成分的影响。研究人员将400只体重相近、性别比1:1的健康4日龄肉鸡随机分为对照组（CON，基础日粮）和MPFB组（基础日粮添加4% MPFB）。结果表明，MPFB显著提高了粗蛋白质和钙的表观消化率（p < 0.05），并极显著提高了粗纤维和磷的表观消化率（p < 0.01）。MPFB组腿肌产量显著提高、腹脂产量显著降低（p < 0.05），胴体产量有升高趋势（p = 0.071）。MPFB还升高了血清免疫球蛋白M和白细胞介素-2浓度（p < 0.05），增加了十二指肠绒毛高度（p < 0.05），降低了十二指肠隐窝深度（p < 0.05），并提高了十二指肠、空肠和回肠的绒毛高度/隐窝深度比值（p < 0.05）。盲肠微生物群分析显示，MPFB显著富集了Ruminococcus gauvreauii_group、Ruminococcus torques_group和Turicibacter（p < 0.05），而Bacteroides有增加趋势（p = 0.093），这些菌属与养分消化率和十二指肠形态的改善呈正相关。在腿肌中，MPFB有增加半胱氨酸含量的趋势（p = 0.081），显著降低了C14:0（p < 0.05）、C16:0和总饱和脂肪酸（p < 0.01），增加了C20:2（p < 0.05），并有降低C12:0和C16:1、增加C18:2n6c和总多不饱和脂肪酸的趋势（p < 0.10）。总之，日粮添加4% MPFB改善了黄羽肉鸡的养分利用率和部分胴体性状，并调节了腿肌脂肪酸谱，这些效应可能与肠道形态改善和盲肠微生物群调节有关。
论文解读：多菌种益生菌发酵液对黄羽肉鸡营养、肠道健康及肉品质的调控效应
研究背景与目的：随着家禽生产中抗生素生长促进剂使用限制的日益严格，寻找安全有效的营养策略以改善肠道健康已成为研究热点。益生菌因其调节肠道微生物群、增强免疫应答和改善养分利用的能力而被广泛用于肉鸡日粮。近年研究表明，益生菌发酵产物（如益生菌发酵液）不仅能提供活菌，还含有发酵来源的生物活性化合物，包括有机酸、小肽、酶和可溶性养分，可能比直接饲喂益生菌或复合益生菌制剂具有更多功能益处。此前研究已报道植物乳杆菌和酿酒酵母复合益生菌发酵液可调节仔猪免疫、改善肠道形态并重塑肠道微生物组成；在黄羽肉鸡上的研究也发现，添加3%或4%的植物乳杆菌发酵产物可改善生长性能和饲料转化率。然而，关于多菌种益生菌发酵液（MPFB）在黄羽肉鸡中的应用信息仍有限。因此，本研究旨在评估日粮添加4% MPFB对815品系黄羽肉鸡胴体性状、肉品质、表观养分消化率、血清免疫指标、肠道形态、腿肌游离氨基酸和脂肪酸组成及盲肠微生物群的影响。
研究设计与方法：研究人员在湖南株洲群丰农场开展饲养试验，选用400只4日龄、体重相近、性别比1:1的健康黄羽肉鸡，随机分为两组：对照组（CON）饲喂基础日粮，MPFB组在基础日粮中添加4% MPFB，每组10个重复，每重复20只。试验分三个阶段（9–21日龄、22–42日龄和43–56日龄）。MPFB由含植物乳杆菌（3.5 × 10
5 CFU/g）、枯草芽孢杆菌（1.5 × 10
6 CFU/g）和酿酒酵母（5.0 × 10
2 CFU/g）的复合益生菌制剂经红糖、乳清粉和水混合后常温密闭发酵48 h制备，并交错分批发酵以保证每日新鲜供应。试验期间测定生长性能；56日龄屠宰后测定胴体性状（胴体产量、全净膛产量、半净膛产量、胸肌产量、腹脂产量和腿肌产量）、肉品质（肉色、pH、滴水损失、蒸煮损失、剪切力和失水率）；采用日立LA8080超高速自动氨基酸分析仪测定腿肌游离氨基酸；采用Thermo Scientific? Q Exactive? Plus杂化四极杆-Orbitrap?质谱系统测定腿肌脂肪酸组成；按中国国家标准测定饲料和粪便中盐酸不溶灰分、粗灰分、粗蛋白质（CP）、粗纤维（CF）、乙醚提取物（EE）、钙（Ca）和磷（P）的含量并计算表观消化率；采用ELISA试剂盒测定血清免疫球蛋白A（IgA）、IgG、IgM和白细胞介素-2（IL-2）浓度；收集十二指肠、空肠和回肠组织经固定、包埋、切片和苏木精-伊红染色后，用Image-Pro Plus 6.0测量绒毛高度（VH）、隐窝深度（CD）并计算VH/CD比值；每组选6个盲肠内容物样本进行16S rRNA基因V3–V4区扩增子测序，在Illumina MiSeq平台完成测序，通过QIIME 1.9.1和R 4.5.3进行生物信息学分析，差异丰度分析采用Wilcoxon秩和检验，线性判别分析效应大小（LEfSe）的LDA阈值为2.0，并以Spearman相关分析评估差异菌属与养分消化率、肠道形态指标的关联。数据采用SPSS 25.0独立样本t检验分析，结果以均值±标准误表示，p < 0.05为显著，0.05 ≤ p < 0.10为趋势。
主要结果：（3.1）生长性能：MPFB显著提高了43–56日龄阶段的平均日采食量（ADFI，p < 0.05）。（3.2）胴体性状：MPFB组腿肌产量显著提高、腹脂产量显著降低（p < 0.05），胴体产量有升高趋势（p = 0.071）。（3.3）肉品质：MPFB组腿肌b*值（黄度）有降低趋势（p = 0.073）。（3.4）腿肌游离氨基酸：MPFB组腿肌半胱氨酸（Cys）含量有升高趋势（p = 0.081）。（3.5）腿肌脂肪酸组成：MPFB显著降低C16:0和总饱和脂肪酸（SFA）（p < 0.01），降低C14:0（p < 0.05），增加C20:2（p < 0.05），并有降低C12:0（p = 0.097）和C16:1（p = 0.064）、增加C18:2n6c（p = 0.057）和总多不饱和脂肪酸（PUFA）（p = 0.054）的趋势。（3.6）表观养分消化率：MPFB显著提高了CP和Ca的消化率（p < 0.05），极显著提高了CF和P的消化率（p < 0.01）。（3.7）血清免疫指标：MPFB组血清IgM和IL-2浓度显著升高（p < 0.05），IgA有升高趋势（p = 0.056）。（3.8）肠道形态：MPFB显著增加了十二指肠VH和VH/CD比值，降低了十二指肠CD（p < 0.05），空肠和回肠VH/CD比值也显著提高（p < 0.05），空肠和回肠VH有升高趋势（p = 0.073和p = 0.059）。（3.9）盲肠微生物群：两组间共有648个操作分类单元（OTU），占总OTU的89.6%；α多样性指数无显著差异；主坐标分析（PCoA）显示群落结构有分离趋势（PERMANOVA，p = 0.077）。门水平上Firmicutes和Bacteroidota为优势菌门。属水平上，MPFB组Bacteroides、Ruminococcus gauvreauii_group、Ruminococcus torques_group和Turicibacter相对丰度显著升高，而Lactobacillus、Streptococcus、Peptococcus、norank_f__Erysipelatoclostridiaceae、Anaerofilum和Megasphaera显著降低。LEfSe鉴定Ruminococcus torques_group、Turicibacter和Ruminococcus gauvreauii_group为MPFB组生物标志物。相关分析显示Bacteroides与十二指肠绒毛高度和磷表观消化率正相关，Ruminococcus torques_group与粗蛋白质和磷消化率正相关，Ruminococcus gauvreauii_group与十二指肠绒毛高度和磷消化率正相关，Turicibacter与粗蛋白质消化率和十二指肠绒毛高度正相关、与十二指肠隐窝深度负相关（p < 0.05）。
讨论与结论：讨论部分指出，MPFB的益生效应可能源于活菌与发酵来源生物活性物质（有机酸、酶、肽等）的协同作用。MPFB提高后期ADFI可能与适口性和胃肠道环境改善有关。腿肌产量增加和腹脂减少可能与养分利用率提高及脂质沉积调控有关，枯草芽孢杆菌和植物乳杆菌发酵产物已被报道可减少腹脂沉积。腿肌b*值降低趋势提示肉色可能受益生菌影响，但机制尚不清楚。腿肌Cys含量升高趋势具有营养意义，因为Cys参与谷胱甘肽合成和肌肉氧化还原代谢；饱和脂肪酸（C12:0、C14:0、C16:0）降低可降低肉脂致动脉粥样硬化潜力，而PUFA/SFA比值是脂质营养质量的重要指标，C20:2增加和C18:2n6c升高趋势反映了n-6 PUFA沉积或延伸代谢的变化。养分消化率提升可能归因于有机酸等活性物质改善胃肠道环境。血清IgM和IL-2升高及IgA趋势提示MPFB可调节体液、黏膜和细胞免疫。肠道形态改善（VH升高、CD降低、VH/CD升高）表明肠道黏膜状态和吸收能力增强。盲肠微生物群中Bacteroides、Ruminococcus相关类群和Turicibacter的富集与养分消化率和肠道形态改善呈正相关，这些菌群参与复杂碳水化合物降解、底物发酵和宿主代谢调节；而部分菌属（如Lactobacillus、Streptococcus等）丰度下降可能源于外源益生菌引入后的竞争排斥，Streptococcus的减少也可能反映肠道微生态环境改善。研究结论为：在本研究条件下，日粮添加4% MPFB改善了黄羽肉鸡的养分利用率和胴体性状，并有利地调节了腿肌脂肪酸谱，这些变化伴随着肠道形态的增强和盲肠微生物群的改变。该研究为MPFB作为功能性发酵饲料添加剂在黄羽肉鸡生产中的应用提供了科学依据，但仅评估了一个添加水平，其剂量效应关系和最佳添加水平仍需进一步研究。论文发表于《Animals》。
