综述：今天我了解到：复发性/难治性神经母细胞瘤的治疗方案：从免疫生物学研究到早期临床试验的转化路径

《Critical Reviews in Oncology/Hematology》：TIL therapy in relapsed/refractory neuroblastoma: A translational roadmap from immunobiology to early-phase trials

　　**摘要**
复发性或难治性神经母细胞瘤（R/R NB）是儿童癌症中最具挑战性的类型之一，长期生存率低于20%。标准化疗和单靶点免疫细胞疗法都存在显著的局限性。化疗在大多数情况下无法清除微小残留病灶，而工程化细胞疗法因肿瘤内的异质性导致靶抗原丢失而失去效力。因此，肿瘤浸润淋巴细胞（TIL）疗法提供了一种替代方案。TIL具有多克隆性，并且之前已与肿瘤发生过相互作用，因此能够识别广泛的患者特异性抗原，且不太可能因单一抗原的丢失而失效。然而，早期评估TIL疗法在R/R NB中的努力遇到了重要挑战。主要障碍包括TIL制备失败、肿瘤微环境（TME）的免疫抑制作用以及由于MYCN驱动的MHC I类基因丢失和干扰素信号传导受损导致的抗原呈递缺陷。这些挑战需要新的方法，如抗原富集或MHC独立工程化。本文总结了三十年来临床前研究的结果，将研究分为三个主要时期，并分析了影响TIL疗法疗效的关键因素。同时，还总结了关键的临床研究，以期为儿童R/R NB患者TIL疗法的研发、安全性和可行性提供依据。最后，提出了一条转化研究路线图，整合了γδ TIL富集、细胞工程、TME修饰和生物标志物驱动的患者选择，以指导R/R NB的早期临床试验。

**引言**
神经母细胞瘤（NB）是最常见的儿童颅外实体瘤，占儿童恶性肿瘤的8-10%（Nong等人，2025年）。尽管采用了高剂量化疗、手术、自体造血干细胞移植、放疗和抗GD2抗体等强化多模式治疗方案，患者的生存率有所提高（Ladenstein等人，2018年；Yu等人，2010年），但病情进展或耐药的患者的预后仍然较差。复发性/难治性NB（R/R NB）的长期总体生存率始终低于20%（de las Heras等人，2025年；Del Bufalo等人，2023年；Radhakrishnan等人，2019年；Venkatakrishnan等人，2025年；Wahba等人，2023年）。这些结果表明，传统的细胞毒性方法无法充分清除微小残留病灶，也无法克服R/R NB用于逃避免疫系统的免疫抑制机制（De Bona等人，2026年）。
过去十年中，针对R/R NB的细胞免疫疗法模式经历了快速发展。天然杀伤细胞（NK细胞）作为一线先天效应器，能够不受MHC限制地裂解肿瘤，在多项早期试验中显示出良好的安全性和初步的抗肿瘤活性，尤其是与抗GD2抗体联合使用时（Ghasempour等人，2025年；Mohseni等人，2024年；Shokouhfar等人，2026年）。通过工程化改造NK细胞使其表达嵌合抗原受体（CARs），可以赋予其特异性肿瘤靶向能力，同时保留其天然细胞毒性（Grote等人，2021年；Heczey等人，2023年）。同时，针对GD2的CAR-T细胞疗法已进入NB的早期临床试验，并取得了令人鼓舞的安全数据（Li等人，2025年；Straathof等人，2020年）。然而，每种方法都面临重要挑战。尽管基于NK的方法不依赖于MHC，但它们主要依赖于有限的激活受体-配体相互作用，在体内维持时间较短且肿瘤浸润能力较弱（Rados等人，2024年；Tong等人，2022年）。此外，单靶点工程化疗法（如CAR-T和CAR-NK）容易受到肿瘤抗原异质性和抗原丢失的免疫逃逸影响（Balkhi等人，2025年；Escobar等人，2025年；Habibi等人，2026年；Vo等人，2025年）。此外，尽管CAR-T细胞疗法在血液系统恶性肿瘤中取得了良好效果，但在实体瘤中的疗效仍受限于其难以渗透到高免疫抑制性的肿瘤微环境（TME）中（Escobar等人，2025年）。此外，严重的治疗相关毒性（包括细胞因子释放综合征）和制备复杂性也是重要的临床障碍（Abdo等人，2025年；Dong等人，2025年）。
肿瘤浸润淋巴细胞（TIL）的过继细胞疗法（ACT）采用了一种概念上的不同方法，可能克服这些限制。TIL疗法涉及分离并体外扩增那些已经自然进入肿瘤并与之接触的自体T细胞（Granh?j等人，2022年；Haanen等人，2024年）。由此产生的T细胞库具有多克隆性，能够识别广泛的患者特异性新抗原和共有肿瘤抗原。这种广泛的反应性有助于规避抗原逃逸，这是肿瘤逃避单靶点工程化疗法的常见机制（Albarrán等人，2024年；Amaria等人，2025年）。在这种策略中，自体T细胞利用其内源性T细胞受体（TCRs）来识别肿瘤细胞，这些受体包括MHC I类和II类。这种机制降低了肿瘤外毒性的风险，这是合成抗原受体常见的局限性（Albarrán等人，2024年）。该方法的首次临床验证是在黑色素瘤中实现的，最终导致2024年2月FDA批准lifileucel（Amtagvi）成为首个用于实体瘤的TIL疗法（Kwong和Yang，2024年）。
虽然ACT在成人肿瘤学中取得了良好效果，但在儿童实体瘤（如NB和肉瘤）中的应用仍处于早期临床开发阶段。TIL疗法在R/R NB中的有效性得到了肿瘤内T细胞浸润与生存率改善之间关联的支持（Mina等人，2015年）。然而，将TIL作为可行疗法面临诸多挑战。尽管可以从儿童NB标本中分离出TIL，但它们难以可靠扩增，并且通常缺乏对自体肿瘤细胞的细胞毒性（Facchetti等人，1996年；Zhou等人，2008年）。这种功能缺陷，加上R/R疾病的极强免疫抑制性TME，至今阻碍了有效TIL产品的生成（Wienke等人，2021年）。尽管如此，一些研究使用优化方案成功在高风险儿童实体瘤中体外扩增了TIL，常常显示出富含γδ T细胞等先天免疫细胞的独特组成（Castenmiller等人，2025年；Metts等人，2025年；Olle Hurtado等人，2019年）。这些鼓舞人心的临床前发现促使开展了评估TIL疗法在复发性儿童恶性肿瘤中的I期临床试验。此外，结合基因工程和联合疗法可能是克服这些内在TME障碍的潜在方法，从而将TIL确立为难治性儿童疾病的有效治疗手段（Center等人，2023年；Iovance Biotherapeutics，2024年；Shubina等人，2026年）。
尽管临床前研究兴趣日益增加，但目前尚无综合性的综述追踪TIL疗法在R/R NB生物背景下的三十年来发展历程、机制障碍和转化研究路线图。此前的综述要么仅关注成人实体瘤中的TIL疗法，要么提供儿科细胞免疫疗法的广泛概述，而没有针对NB中TIL的机制分析（Albarrán等人，2024年；Amaria等人，2025年；Granh?j等人，2022年；Haanen等人，2024年；Trautmann等人，2024年）。鉴于最近的发展：2024年FDA批准lifileucel重新激发了对基于TIL的疗法的兴趣（Kwong和Yang，2024年）；γδ T细胞被确认为儿童NB中的主要抗肿瘤效应子亚群（Castenmiller等人，2025年）；以及首次开展包括R/R NB在内的复发儿童实体瘤的生物样本库和早期临床试验（Center，2023年），这篇综述尤为及时。鉴于R/R NB尽管接受了强化多模式治疗仍具有较差的生存率，这些进展为将现有的临床前证据整合成统一的、可行的临床框架提供了迫切需求。因此，本文旨在提供一个实用的、基于证据的框架，根据治疗策略的生物学依据和临床成熟度对其进行排序，从而加速R/R NB早期TIL试验的合理设计，并确定未来研究的最紧迫问题。

**基于此框架，本文首先描述了限制TIL疗效的NB TME的多层免疫抑制环境；其次梳理了三个不同机制时代的临床前TIL研究进展；最后将这些见解整合为一个旨在指导R/R NB早期TIL试验合理设计的转化研究路线图。**

**本文基于PubMed、Scopus和Google Scholar（1990–2026年）中的文献，使用包括“肿瘤浸润淋巴细胞”、“神经母细胞瘤”、“过继细胞疗法”、“γδ T细胞”和“嵌合抗原受体”等术语进行搜索，仅限于英文出版物。研究根据其与NB生物学的机制相关性和转化潜力进行优先选择，NB特异性数据的重要性高于从其他实体瘤推断出的证据。作为叙事性综述，未进行正式的偏见风险评估或PRISMA框架筛选；当研究结果相互矛盾时，我们会同时报告各种发现及其相关的实验背景（例如，模型系统、细胞来源），而不是对它们进行评判。提出的转化研究路线图中的三个层次障碍（制备、NB和抗原识别）是根据临床前和临床文献中反复出现的失败点归纳得出的。**

**免疫学上“冷”的TME：TIL疗效的多层障碍**
TIL-based ACT在NB中的临床成功有限，主要是由于肿瘤具有高度免疫抑制性的“冷”TME，而非过继转移本身的失败。与成人恶性肿瘤相比，儿童实体瘤（如NB）的突变负担较低，新抗原较少。这导致可用于分离和扩增的预存肿瘤反应性T细胞极度稀缺（Kennedy等人，2023年；Maggi等人，2025年；Wei等人，2018年）。这种环境……

**临床前研究：疗效终点演变的历史轨迹**
TIL疗法在NB中的转化路径已通过三十多年的临床前研究形成。该领域的演变可以分为三个不同的时代，每个时代都由其主导的模型系统和治疗疗效的概念演变所定义。这三个概念时代的演变在图2中进行了总结。

**直接证据和试验概况**
目前尚无关于R/R NB中TIL疗法的直接临床证据。现有证据来自其他实体瘤的早期研究以及最近启动的包含儿童群体的试验，这些研究分别为本转化框架的不同方面提供了信息。与这种方法最相关的四项试验的主要特征在表2中进行了总结。

**NCT02650986证明了细胞内在工程可以克服关键抑制途径**

**未来方向：与障碍相一致的转化研究路线图**
R/R NB中TIL疗法的未来发展应围绕三个层次障碍进行（图1）。

**结论**
R/R NB的TIL疗法仍处于早期临床阶段，但当前的免疫生物学研究为转化应用提供了明确且逐步的路径。进展依赖于将制备过程与手术计划相协调，将细胞内在工程与NB定向策略相结合，并设计能够捕获持久免疫反应而非短期效应的试验。最大的益处可能出现在疾病早期阶段能够识别出足够肿瘤组织的患者身上。

**批判性观点**
本文指出了现有文献中的一个具体空白：此前没有系统地追踪R/N NB中TIL疗法在三个概念时代的临床前演变过程，将其与机制障碍相匹配，并将其映射到可行的转化研究路线图上。虽然现有的TIL综述主要集中在成人实体瘤上，或从广泛的角度概述了儿科细胞免疫疗法，但本文特意专注于基于TIL的疗法。

**作者贡献**
R.M.、A.K.、Z.K.、F.K.和A.E.参与了调查、数据收集和初稿撰写；M.B.和L.J.负责验证、撰写和编辑初稿；A.A.H.监督整个项目，提供概念指导，并审阅和编辑手稿。所有作者都已阅读并批准了最终版本的手稿。

**伦理批准和参与同意**
不适用

**关于AI辅助写作过程**
作者使用AI工具（ChatGPT、OpenAI）改进语言和语法。所有科学内容和结论均由作者独立完成。

**利益冲突声明**
作者声明没有已知的财务利益或个人关系可能影响本文所述的工作。

**致谢**
Rashin Mohseni博士是伊朗德黑兰医科大学基因、细胞与组织研究所儿科细胞和基因治疗研究中心的高级研究员。她的工作主要集中在儿科血液学和肿瘤疾病领域的细胞与基因治疗方法上，特别关注免疫疗法的转化应用。
研究团队成员包括：Rashin Mohseni、Amirali Kalantari、Maryam Behfar、Zahra Karimizadeh、Fereshteh Khalilzadeh、Atoosa Eftekhar、Leila Jafari 和 Amir Ali Hamidieh。
该团队隶属于伊朗德黑兰医科大学基因、细胞与组织研究学院的儿科细胞与基因治疗研究中心。