《PLOS Pathogens》：Widespread circulation of West Nile and Usutu viruses in sedentary and migratory avifauna: A two-year study (2024–2025) of active surveillance in South of France
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西尼罗病毒（West Nile virus, WNV）与乌苏图病毒（Usutu virus, USUV）为嗜神经正黄病毒属（Orthoflavivirus）病毒，共享相似的动物源性传播循环，主要以尖音库蚊（Culex pipiens）为媒介、以鸟类为扩增宿主。
西尼罗病毒（West Nile virus, WNV）与乌苏图病毒（Usutu virus, USUV）为嗜神经正黄病毒属（Orthoflavivirus）病毒，共享相似的动物源性传播循环，主要以尖音库蚊（Culex pipiens）为媒介、以鸟类为扩增宿主。两病毒均起源于非洲，过去二十年在欧洲建立地方性流行，很可能由沿地中海迁飞路线的候鸟引入并扩散。鸟类感染结局从亚临床至致死性神经侵袭性疾病不等，取决于病毒毒株、宿主免疫与物种易感性。法国南部因多样的鸟类栖息地利于全年病毒维持，成为两病毒循环的关键热点。研究人员于2024–2025年通过分子监测调查了上述地区2500余只留鸟与候鸟中WNV与USUV的RNA流行率，样本经雾网与巢箱采集，涵盖雀形目与非雀形目多个分类群，涉及湿地、城市边缘与农业区。分析显示病毒在多种物种中广泛检出，尤以大山雀、家麻雀、家燕等雀形目为主，且两年中USUV检出率均高于WNV；总体RNA流行率2024年显著高于2025年，可能反映气候或生态驱动因素。结果凸显混合鸟群在地中海欧洲虫媒病毒动态中的关键作用，并强调需针对高风险物种与栖息地整合全年监测。
研究背景方面，WNV与USUV同属黄病毒科正黄病毒属日本脑炎病毒血清复合群，1937年与1959年分别发现于乌干达与南非，在欧洲经多次由非洲沿黑海/地中海迁飞路线引入后，由留鸟—库蚊循环本地扩增，近二十年逐步向中欧、西欧北扩并建立地方性流行。法国南部蒙彼利埃—卡马格湿地因高密度鸟类、邻近迁飞路线与高库蚊媒介活性，长期为人类、马、犬及动物园动物感染热点。既有监测多依赖人/马临床病例与死亡鸟被动报告，难以捕捉留鸟与候鸟中的亚临床循环，故研究人员开展主动、非侵入性鸟类分子监测以阐明两病毒在鸟群中的真实循环强度、时间顺序与生态分布。
主要关键技术方法包括：在奥克西塔尼大区卡马格湿地与蒙彼利埃城乡设置7个（2024）与16个（2025）采样点，依鸟类密度、湿地邻近度与媒介密度分城市、城郊、乡村三类；以雾网捕获留鸟与候鸟，采集泄殖腔拭子与粪便，同一体同时有两样本者合并判定单次捕获阳性状态，个体层面以年内至少一次阳性为年度阳性；RNA提取采用QIAamp Viral RNA Mini Kit，靶标为单步 duplex TaqMan RT-qPCR（WNV与USUV探针分标CY5/BHQ2与FAM/TAMRA，Ct≤40判阳、40–45疑阳以扩增子测序核实）；对Ct<35阳性样本追加泛正黄病毒包膜基因PCR及WNV/USUV全基因组重叠引物PCR，Sanger测序后用MAFFT/TrimAl/IQ-TREE建最大似然系统发育树；统计以个体鸟为分析单元，Wilson法估RNA流行率，McNemar检验两病毒一致性，Fisher精确检验比较年度共感染，GLMM（二项—logit，物种为随机效应）回溯筛选年份、季节、地点类型、年龄等变量。
研究结果各小节结论如下。研究区域与采样策略：两年共2533只唯一个体、69种、8目，雀形目占81.2%，家燕、大苇莺、大山雀、家麻雀为优势种；2024年1032只（留鸟526/候鸟506），2025年1520只（留鸟532/候鸟988），19只跨年重捕。病毒在鸟群中的循环：合并RNA流行率USUV 12.0%（303/2533）显著高于WNV 4.3%（110/2533），留鸟USUV 13.3%高于WNV 5.7%，候鸟USUV 11.0%高于WNV 3.4%；种级高发者含大山雀（USUV 17.6%/WNV 5.1%）、家麻雀（USUV 21.5%/WNV 13.4%）、家燕（USUS 12.4%/WNV 2.4%）；共感染仅2.0%（51/2533），2024年4.1%远高于2025年0.6%。USUV与WNV混合效应分析：最终多变量模型保留年份、季节、地点类型、年龄；WNV固定效应解释力高（边际R2=0.498），USUV较低（0.087）；留/候鸟状态无显著关联（OR≈0.9）；年龄中雏鸟（pullus）与初飞鸟（volant）对USUV阳性更高，雏鸟对WNV阳性最高；性别与食性未入终模。时间与空间动态：2024年两病毒6月同步峰值（WNV 64例/USUV 54例），2025年USUV延至9月峰（68例）且WNV低位（7月9例峰）；乡村检出最高（17.5%），城市8.4%，城郊5.5%，GLMM显示城乡比乡村低（USUV OR=0.5，WNV OR=0.3）；重捕93只中仅3只给出感染窗口24–41天上限，无长期持续排毒证据。系统发育：2024年鸟源WNV属谱系1（lineage 1），2025年蚊源属谱系2（lineage 2），USUV部分序列归Europe 1 lineage，但因仅部分片段支持度有限。鸟类作为哨兵：鸟中RNA检出早于蚊池、马与人病例数周—2024年5月下旬鸟先阳，7月人病例、8月蚊阳、9月马病例；2025年3月鸟USUV阳，4月鸟/蚊WNV阳，7月人病例、8月马病例。
讨论部分总结：USUV检出主导且两年皆然，与近年欧洲中部西部USUV广布趋势一致，尖音库蚊对USUV媒介效能可跨更宽温窗延至晚秋；雀形目高发既反映采样量也合其群栖、近人、与库蚊血餐重叠（约42%餐次）的生态位；2024高循环后2025下降或兼因群体免疫与气候差异；候鸟（如蜂虎5月抵后即阳）可能带毒引入、留鸟维持本地扩增，但横断面RT-qPCR不能直证引入路径；年龄结构（雏鸟/初飞鸟）塑造易感池；共感染罕发提示生态位重叠而非强共传播，体外USUV可干扰素途径抑WNV复制但田间意义未定；谱系替换（WNV L1→L2）印证南法L2立足；无大规模死鸟与雀形目亚临床耐受一致，被动监测低估留鸟负担；鸟先于蚊/人/马检出支持其 reservoir 角色而非已验证预警模型。结论部分译文：研究结果显示法国南部多种鸟类广泛检出WNV与USUV；相较偏倚于显见死亡或临床病例的被动监测，主动采样涵盖经历沉默或亚临床感染的更广宿主谱，从而提供更完整的病毒循环图景；结果支持在One Health框架下将主动非侵入鸟类监测作为蚊、马、人监测的补充；但其对暴发预测或公共卫生响应的贡献程度，仍有待未来以标准化采样与更长时间序列评估。
全文发表于《PLOS Pathogens》。
