源自先敲除、报告基因标记亲本的miR-141/200c条件性基因敲除小鼠的构建及floxed等位基因的功能验证

《Mammalian Genome》：Generation of miR-141/200c conditional knockout mice from knockout-first, reporter-tagged parent and functional validation of the floxed allele

　　

摘要

miR-200 家族的微小 RNA（miRNAs）——特别是 miR-141 和 miR-200c——调节发育过程中的神经发生、分化和上皮 - 间充质转化。这些 miRNAs 的失调与癌症和中风等多种疾病有关。靶向 miR-141/200c 簇的 Mirc13tm1Mtm/Mmjax 小鼠品系，最初由 Park 等人于 2012 年生成并描述为一种具有条件性潜力（条件就绪）的敲除优先、报告标记插入小鼠品系。要充分发挥其潜力，需要进行两步繁殖过程：与 FLP 小鼠交配以切除 lacZ/neo 盒，然后与 Cre 交配以删除 floxed miRNA 簇（Park 等人，2012）。然而，许多研究要么绕过移除 lacZ/Neo 盒并将该小鼠品系视为 Mirc13 敲除模型，要么直接与 Cre 小鼠品系交配，这可能导致不可预测的重组和基因型。在此我们表明，保留 lacZ/Neo 盒与嗅球中邻近基因 Ptpn6、Phb2 和 Atn1 的表达降低有关，并且一旦该盒被切除，这些基因即可正常表达。因此，我们建议针对该品系采用经过验证的两步先 FLPo 后 Cre 繁殖计划，并对其他敲除优先、报告标记小鼠品系进行逐个等位基因验证。