在CRKP定植患者中检测到的1,5-戊二胺在体外损害CD19 CAR-T细胞功能

《Cancer Immunology, Immunotherapy》：1,5-Pentanediamine detected in CRKP-colonized patients impairs CD19 CAR-T cell function in vitro

　　**背景**CD19定向嵌合抗原受体T细胞（CAR-T）疗法对复发或难治性B细胞恶性肿瘤有效，但疗效仍存在异质性。碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌（CRKP）定植在经历强化治疗的血液病患者中较为常见。1,5-戊二胺（PDA；尸胺）是一种由多种肠杆菌科细菌产生的微生物群相关代谢物，在CRKP定植患者的血清中检测到。其对CAR-T细胞的影响尚不明确。**方法**在30例采样时未记录血行感染的CRKP定植患者中，通过液相色谱-串联质谱法对血清PDA进行定量。将健康供体来源的CD19 CAR-T细胞在体外暴露于PDA（0–12 mM；大多数功能测定采用9 mM）。评估代谢活性、凋亡、表型、靶细胞杀伤、脱颗粒、细胞因子分泌及细胞毒性分子产生情况。进行RNA测序、RT-qPCR和PD-1阻断实验。**结果**所有30例患者中均可检出PDA。在没有非定植对照组的条件下，这些数据证明了PDA的可检测性，但未能证明CRKP特异性来源归因。在毫摩尔浓度下，PDA降低CAR-T细胞代谢活性，增加凋亡，上调激活及检查点相关抑制性标志物，改变CD4/CD8分布，增加调节性T细胞频率。PDA处理的CAR-T细胞显示NALM-6杀伤能力降低，细胞因子、穿孔素和颗粒酶B产生减少，尽管CD107a脱颗粒功能得以保留。转录组分析显示细胞周期、凋亡和应激相关通路富集，免疫通路受到抑制，并存在耗竭相关转录特征。单独PD-1阻断在测试条件下未能恢复功能。**结论**急性毫摩尔级PDA暴露产生了功能失调的CAR-T细胞状态，表现为存活和效应输出受损但脱颗粒功能保留。其生理学相关性需在慢性低剂量模型、对照临床队列、患者来源的CAR-T细胞及额外靶细胞系统中进行验证。