《Ecology and Evolution》：Spot the Difference: Morphometrics Reveals Key Traits for Distinguishing Two Cryptic Juvenile Skate
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准确的物种鉴定对于受威胁物种的有效管理至关重要，尤其对于分布重叠且形态相似的物种。鳐类（Order Rajiformes）表现出高度保守的表面形态，这导致该群体内长期存在分类混乱和错误鉴定。中间鳐（Dipturus intermedius）和蓝鳐（D. bat
准确的物种鉴定对于受威胁物种的有效管理至关重要，尤其对于分布重叠且形态相似的物种。鳐类（Order Rajiformes）表现出高度保守的表面形态，这导致该群体内长期存在分类混乱和错误鉴定。中间鳐（Dipturus intermedius）和蓝鳐（D. batis）正是这一挑战的典型例子；两个物种均栖息于东北大西洋，并拥有复杂交织的分类历史。鉴于其重叠分布，精确的物种鉴定对确保有针对性的管理行动十分必要。尽管已有适用于较大个体的可靠形态学检索表，但幼体鉴定仍具挑战性，因为许多诊断特征发育不完全或因损伤而模糊不清。本研究旨在通过采用经分子技术验证的形态学方法，确定用于区分幼体（<100 cm）中间鳐和蓝鳐的额外特征。分析重点是识别在受损标本中仍可检测到的明显特征，以确保该方法在野外条件下的实际适用性。研究人员确定了四个可用于区分两物种幼体的稳健特征：腹面着色、盘体形状、前缘盘缘形状和吻部形状。本文的发现提高了幼体中间鳐和蓝鳐的数据准确性，支持有针对性的保护行动，并有助于这些受威胁物种的有效管理和长期恢复。
准确物种识别是受威胁物种有效管理的基础，尤其对分布重叠且形态相似的类群。鳐类（Order Rajiformes）表面形态高度保守，导致长期分类混淆和错误鉴定。中间鳐（Dipturus intermedius）与蓝鳐（D. batis）是典型例子，二者共享东北大西洋分布区，历史上被视为同一物种，直至约十年前才通过分子研究被确认为两个独立谱系，并于2021年获得正式分类认可。两者均为极危（Critically Endangered）物种，20世纪高强度捕捞导致其数量锐减。它们生命周期长、繁殖力低，幼鱼补充对种群维持尤为关键，然而其幼体形态鉴别特征尚未完全发育，且常因捕捞损伤而缺失，导致基于渔业数据的鉴定错误频发。分子鉴定手段虽然可靠，但需要专业设备和时间，难以用于常规监测。因此，亟需开发经验证、易操作的形态学鉴定框架，以支持幼鱼监测与保护。
针对这一需求，研究人员利用2021年爱尔兰海洋研究所底鱼调查（Marine Institute Irish Groundfish survey）采集的死亡鳐类样本，选取全长小于100 cm的84尾幼体，结合线粒体细胞色素氧化酶亚基I（COI）条形码进行物种鉴定，并对其开展基于标志点的几何形态测量学（Geometric Morphometrics）分析与腹面色图像分析。研究发现四个可靠鉴别特征：腹面色带、盘体形状、前缘盘缘形状和吻部形状。该成果已发表于《Ecology and Evolution》。这些特征在受损标本中仍可识别，显著提高了幼鱼鉴定准确性，为保护行动提供了数据支撑。
在技术方法上，研究首先通过COI条形码对样本进行分子鉴定，共鉴定出39尾中间鳐和46尾蓝鳐，分子结果由12个诊断性核苷酸位点及100%自举支持的系统发育树确认。随后，研究人员选取高质量照片，对三个形态区域——完整盘体（Full Disc）、前缘盘缘（Anterior Disc Margin）和头与吻部（Head and Rostrum）——进行地标及半地标数字化，经广义普鲁克斯特分析（Generalised Procrustes Analysis）去除非形状变异，再利用普鲁克斯特ANOVA（Procrustes ANOVA）检验物种、性别和大小的影响，并采用主成分分析（Principal Component Analysis）降维后执行线性判别分析（Linear Discriminant Analysis）/典型变量分析（Canonical Variate Analysis），以留一交叉验证评估判别性能。腹面色分析则通过ImageJ测量腹面侧缘深色区域面积和灰度值。所有统计均在R环境下完成。
3.1 COI条形码：分子鉴定成功区分两物种，所有样本被明确归入两个高支持率的单系支系，且两物种从未在同一次渔获中出现。
3.2 形态测量分析：共保留53个样本（雌性23尾，雄性30尾），全长范围29.4–99.4 cm。
3.2.1 完整盘体（Full Disc）：普鲁克斯特ANOVA显示物种对盘形有显著影响（F=7.86，Z=4.58，p=0.001），解释18.40%变异；典型变量分析沿第一典型变量完全分离，留一交叉验证正确率100%。变形矢量图显示，中间鳐盘体更宽、吻部相对前缘更突出、前缘盘缘更凹、后缘盘角更窄。
3.2.2 前缘盘缘（Anterior Disc Margin）：物种效应显著（F=11.06，Z=4.53，p=0.01），解释31.00%变异；典型变量分析显示几乎完全分离，交叉验证正确率100%。中间鳐前缘盘缘曲率更大，头部区域更窄长，盘角侧移。
3.2.3 头与吻部（Head and Rostrum）：物种效应显著（F=5.08，Z=3.08，p=0.001），解释18.50%变异；但典型变量分析存在较大重叠，交叉验证正确率仅76%，判别能力中等。中间鳐吻部略窄、眶间距较小。
3.3 图像分析：
3.3.1 腹面着色（Ventral Colouration）：所有幼年中间鳐在腹面后侧缘具深色带，覆盖面积16.14%±3.76%，灰度均值58.37±23.82；蓝鳐腹面色带缺失或极弱，平均覆盖仅3.59%±5.54%，仅8尾个体出现，且颜色更浅（灰度均值99.57±45.79）。Wilcoxon秩和检验证实两物种在面积和灰度上均有显著差异（面积W=15，p=8.74×10
?5；灰度W=95，p=0.02）。腹面色带面积随全长减小，但仅在蓝鳐中显著（F=16.41，R
2=0.58，p=0.002），中间鳐趋势不显著。
讨论与结论：基于上述结果，研究推荐四个特征用于区分幼年中间鳐和蓝鳐。其中腹面着色、盘体形状和前缘盘缘形状判别力较强，吻部形状存在重叠，应作为互补特征组合使用，而非单独诊断标记。与已有研究相比，这些特征在幼体和受损个体中仍可识别，可作为现有鉴定标准的补充。此外，异速生长和性别对形状无显著影响，表明这些特征相对稳定。保护意义上，可靠的物种特定数据对于确定幼鱼关键栖息地至关重要。鉴于两种鳐的生活史和生态需求不同，错鉴定可能导致保护措施偏移。本框架提供了快速、低成本的鉴定手段，有助于提高渔业数据质量，支持空间管理策略，从而促进种群恢复。总结来说，通过提供可靠且易获得的额外鉴定特征，本研究提高了幼年中间鳐和蓝鳐的数据准确性，支持有针对性的保护行动，并有助于这些受威胁物种的有效管理和长期恢复。
