异皮根结线虫效应蛋白Mi-SP1削弱PTI相关的ROS反应并促进对水稻的寄生

《Physiological and Molecular Plant Pathology》：The Meloidogyne incognita effector Mi-SP1 attenuates PTI-associated ROS responses and contributes to parasitism in rice

　　这是一篇关于植物寄生线虫 *Meloidogyne incognita* 效应蛋白 Mi-SP1 的科研论文节选。以下是主要内容摘要：**摘要*** M. incognita 是全球（包括非洲）水稻产区的重要产量损失原因。其成功寄生依赖于分泌效应蛋白操纵寄主细胞过程并抑制植物免疫。* 本文首次鉴定并表征了一个此前未被注释的小分泌蛋白 Mi-SP1，并研究其在水稻寄生中的作用。* **原位杂交**：*Mi-SP1* 转录本在预寄生期二龄幼虫（J2）的次腹侧腺中累积。* **表达分析**：J2 阶段转录本累积最多，随后寄生阶段表达下降。* **RNAi 沉默**：浸泡法沉默降低了线虫侵染能力；降幅最大的 si1-2 同时唯一性地降低了繁殖成功率。* **异位表达**：在水稻中异位表达 *Mi-SP1*，某高表达系的雌虫产卵量增加。* **亚细胞定位**：在 *Nicotiana benthamiana* 叶片中，Mi-SP1 累积于细胞质和细胞核，核仁排除程度较对照降低。* **免疫抑制**：同一瞬时表达体系中，Mi-SP1 抑制了 flg22 触发的活性氧（ROS）产生。* **结论**：Mi-SP1 是一个候选致病效应因子，与抑制 PTI 相关 ROS 反应有关。**引言*** 植物寄生线虫（PPN）每年造成全球作物损失至少 800 亿美元；已报道 PPN 超过 4100 种，根结线虫（RKN）危害最大，可侵染绝大多数维管植物。* 在影响水稻的主要热带种中，*M. graminicola* 是重要根结线虫。**材料与方法（节选）*** **线虫培养**：来自参考文献[35]的 *M. incognita* 菌株在温室番茄栽培种 Rutgers 上维持。侵染 8 周后，用 0.7% 次氯酸钠溶液振荡感染根系 3 分钟提取卵。卵收集于 25 μm 滤网，浸泡于 0.7% 次氯酸钠 10 分钟，蒸馏水冲洗 5 次，室温孵化 5 天。J2 通过 6 层 Kimwipe 纸巾爬出，水中含 100 mg/l 链霉素。* **核酸提取与 cDNA 合成**：（节选提及水稻基因组）* **候选效应子 Mi-SP1 的鉴定与序列分析**：此前工作鉴定出 *M. incognita* 分泌组中的 486 种蛋白，与基因组注释基因翻译序列比对后，将分泌组精简至约 300 种蛋白。其中包含 Mi-SP1。其氨基酸序列（AN: AYX41421）显示含有信号肽且缺乏……（原文截断）**讨论*** 植物寄生线虫效应子被认为是决定线虫侵染和寄生的关键因素。先锋基因（pioneer genes）在 RKN 潜在效应子中普遍存在。从 Bellafiore 等人获得的 RKN 分泌组中，作者选取一组功能未知的潜在小效应子研究其寄生作用。**作者贡献*** Pascal Gantet、Anne-Sophie Petitot、Sophie Mantelin、Nguy?n V? Phong、Kathryn M. Wright、Karine Lambou、Diana Fernandez 等参与了写作、修订、调查、形式分析、概念化、监督等工作。**利益冲突*** 作者声明无利益冲突。**数据可用性*** 支持本研究的数据（qRT-PCR Ct 值、核仁定位比率、RNAi 和转基因侵染试验的植物水平数据、ROS 发光值）可由通讯作者合理请求提供。*Mi-SP1* 核苷酸序列可在 GenBank 获得，登录号 MH315944。**资助*** 全球水稻科学伙伴关系（GRiSP，Menergep 项目）、法国蒙彼利埃 Agropolis 基金会（编号 AA1002-003）、"未来投资"计划 ANR-10-LABX-001-01、Labex Agro。SB 由人类前沿科学计划（HFSP）奖学金（2006 长期奖学金 LTF）资助。**致谢*** 感谢 CIRAD（法国蒙彼利埃）水稻功能基因组平台（http://www.refuge-platform.org/）的 Delphine Mieulet 和 Emmanuel Guiderdoni 在水稻转化方面的协助；感谢 IRD 的 Jamel Aribi 在维持线虫培养/群体方面提供的宝贵技术支持。**作者**Nguy?n V? Phong、Sophie Mantelin、Karine Lambou、Kathryn M. Wright、Anne-Sophie Petitot、Pascal Gantet、Stéphane Bellafiore、Diana Fernandez —— 隶属于法国蒙彼利埃植物健康研究所（PHIM）：IRD、蒙彼利埃大学、CIRAD、INRAE、Institut Agro，法国蒙彼利埃。（注：原始文本在若干处被截断，部分内容如引言对 *M. graminicola* 的描述、核酸提取细节、信号肽分析后续内容以及讨论部分仅显示开头，未能提供完整译文。）