基于DNA和肽的方法在商业产品中检测鱼明胶的性能比较

《EUROPEAN FOOD RESEARCH AND TECHNOLOGY》：Comparative performance of DNA and peptide-based methods for fish gelatin detection in commercial products

　　

摘要

明胶被广泛应用于食品、药品和营养保健品中；然而，明胶生产过程中大量的加工处理可能会破坏DNA的完整性，并给来源特异性生物标志物的检测带来困难。本研究比较了基于DNA的实时荧光定量PCR（qPCR）和基于肽段的Q-Exactive Orbitrap液相色谱-串联质谱（LC–MS/MS）两种方法在检测商业产品中鱼明胶来源生物标志物方面的表现，并评估了它们在不同产品基质中的适用性。共有55款由生产商声明含有鱼明胶的商业产品（包括明胶粉、胶囊、片剂和复合补充剂）被两种方法进行分析。鱼DNA的检测通过种特异性qPCR完成，而经胰酶消化产生的胶原蛋白来源标志肽段则通过高分辨率Q-Exactive Orbitrap LC–MS/MS根据准确质量和MS/MS碎裂谱标准进行鉴定。Q-Exactive Orbitrap LC–MS/MS方法在所有分析的样品（55/55）中均检测到了所选胶原蛋白来源标志肽段，而qPCR在47个分析有效的样品中检测到鱼DNA的有29个（61.7%）；另有8个样品被归类为IPC无效，被排除在有效qPCR分析之外。qPCR的较低检出率在胶囊和片剂制剂中尤为明显，尽管本研究无法独立确定基质效应、DNA完整性和配方相关因素的贡献。在所采用的实验条件下，有限的非目标对照材料（包括牛明胶、猪明胶和不含明胶的植物基质）中未观察到可检测的鱼靶向信号或所选标志肽段。这些结果表明，在所评估的实验条件下，基于肽段的高分辨率质谱方法在检测商业产品中所选鱼明胶来源生物标志物方面的检出率高于基于DNA的qPCR方法。本研究强调了在评估加工商业产品中鱼明胶来源生物标志物时，根据基质特性选择合适的分析靶标的重要性。

图形摘要