在乳化过程中,植物蛋白质的选择性分离会降低泡沫的稳定性:这与水相残基相对于动物蛋白质发生的构象变化有关

《Food Hydrocolloids》:Selective partitioning of plant proteins during emulsification impairs foam stability: conformational changes of aqueous-phase residues relative to animal proteins

【字体: 大 中 小 】 时间:2026年09月06日 来源:Food Hydrocolloids 13.8

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   摘要 泡沫的不稳定性限制了植物蛋白基鲜奶油的工业应用。目前大多数研究集中在蛋白质的固有特性上,但关于乳化过程是否改变水相中的蛋白质组成,以及这种变化是否进而影响泡沫性能,仍缺乏深入理解。本研究表明,在乳化过程中,水相中的蛋白质会发生选择性分配或耗尽,从而改变剩余蛋白质的成分,

  

摘要

泡沫的不稳定性限制了植物蛋白基鲜奶油的工业应用。目前大多数研究集中在蛋白质的固有特性上,但关于乳化过程是否改变水相中的蛋白质组成,以及这种变化是否进而影响泡沫性能,仍缺乏深入理解。本研究表明,在乳化过程中,水相中的蛋白质会发生选择性分配或耗尽,从而改变剩余蛋白质的成分,进而影响最终的泡沫性能。以动物蛋白(酪蛋白钠,SC;山羊奶蛋白,GMP)作为基准,研究人员用植物蛋白(豌豆分离蛋白,PPI;大豆分离蛋白,SPI)配制了乳液。结果分析表明,在乳化过程中,特定分子量的植物蛋白(66–175 kDa 和 16 kDa)优先从水相中耗尽。与动物蛋白相比,这种选择性分配导致水相中剩余蛋白质的结构和表面性质发生了显著变化:β-折叠片的含量增加了约10%,形成了更紧密的聚集体,表面疏水性降低了39%以上。最终,在搅打过程中,剩余的植物蛋白在空气-水界面上的扩散和重排速率常数较低,导致界面动力学变慢,泡沫覆盖能力下降(287%–308%),并且泡沫更容易破裂。这些结果表明,蛋白质的分子特性、加工历史以及非蛋白质成分可能共同驱动了这种选择性分配过程,其中在油-水界面的优先吸附可能起着关键作用。

引言

鲜奶油是一种广泛用于甜点和饮料中的胶体泡沫(Cui et al., 2025),其质地和稳定性主要受蛋白质在空气-水界面上的吸附和界面膜形成特性的控制(Wang et al., 2026)。随着对可持续食品系统关注的增加,用植物蛋白(如豌豆分离蛋白,PPI;大豆分离蛋白,SPI)替代动物蛋白已成为食品行业的重要发展趋势。然而,植物蛋白基鲜奶油通常具有较低的膨胀率和有限的泡沫稳定性(Shen et al., 2023a, Shen et al., 2023b; Zhan et al., 2022)。因此,为了探究其较差的泡沫性能的机制基础,特别是将其与动物蛋白的结构动力学进行比较,这对于指导植物蛋白替代品的合理配方至关重要。
泡沫的宏观稳定性取决于蛋白质的界面行为(Shen et al., 2024)。具体来说,具有适当粘弹性和机械强度的蛋白质会在界面形成保护膜,有效减缓气泡合并,抑制由拉普拉斯压力梯度驱动的奥斯特瓦尔德成熟和不成比例反应,从而保持整体泡沫结构的完整性(Janssen et al., 2025; Qiu et al., 2024)。现有研究表明,动物源蛋白质(如酪蛋白钠,SC)通常具有较高的表面疏水性、较低的分子内二硫键密度,以及松散、灵活、无序的构象。这些结构特性使它们在空气-水界面更容易发生可逆的构象变化,并通过疏水相互作用和氢键等非共价力迅速组装成密集、连续且机械强度高的粘弹性界面膜(Daniloski et al., 2022; Martin et al., 2002)。相比之下,常用植物蛋白(如PPI和SPI)的主要成分大多是高度有序、紧密折叠的球状蛋白,其疏水核心埋藏在分子内部,并富含分子内二硫键。这种刚性结构显著限制了它们在界面上的构象重排能力,导致形成的界面膜往往厚度不足、结构松散、连续性差。此外,这些蛋白质的粘弹模量和机械强度相对较低,限制了它们在长时间内提供持续有效泡沫稳定的能力(Grasberger et al., 2023; Ma et al., 2025; Wang et al., 2025)。尽管SC是能够在水溶液中形成非共价自组装纳米级聚集体的理想代表,但这种处理过的蛋白质并不能完全反映动物蛋白在自然状态下的特性。以山羊奶蛋白(GMP)为例:GMP是从山羊奶中提取的总蛋白,其中约70%至80%为酪蛋白。这些酪蛋白分子通过与胶体磷酸钙的特异性相互作用自组装形成完整的酪蛋白胶束(Breunig et al., 2024; Zhao et al., 2021)。SC和GMP都属于乳源酪蛋白体系;前者是经过加工后解离的状态,表现为灵活的聚集体,而后者则以天然形式的超分子胶束存在。
虽然已知蛋白质结构决定了界面活性,但上述发现主要基于静态和简化的界面系统,未能捕捉到实际食品系统的复杂性。这类方法通常忽略了实际食品加工的动态、多阶段特性。在鲜奶油的实际生产过程中,整个过程通常包括两个紧密相连的阶段:最初的剪切乳化和随后的充气和机械搅打。在初始乳化阶段,蛋白质和其他小分子乳化剂会竞争占据油-水界面(Hinderink et al., 2022)。竞争性吸附会导致水相中剩余蛋白质的组成、浓度和分布发生变化。然而,尚不清楚这些组成变化如何影响搅打过程中蛋白质在气-液界面的吸附,以及是否会影响泡沫性能和产品质量。关于连续加工阶段中的残留效应,目前缺乏实验证据。
本研究涵盖了四种典型的动物和植物来源的蛋白质:SC、GMP、PPI和SPI。由于SC具有优异的起泡性能和灵活的分子构象,因此被用作动物来源的参考标准,以系统评估植物蛋白的功能和结构特性。选择GMP作为第二种动物来源的蛋白质,旨在研究其与SC乳化后的界面行为变化,并确定这种变化是否也会发生在具有超分子胶束结构的GMP上。为了进行系统比较,需要比较原始蛋白质及其乳化后从水相中回收的残留蛋白质的分子结构、表面特性以及空气-水界面的吸附动力学。本研究假设乳化过程会改变水相的组成,进而影响其界面特性。这些变化对随后的空气-水吸附行为和最终泡沫质量有决定性影响。为了阐明乳化步骤如何改变界面功能,建立了分子变化与鲜奶油宏观起泡性能之间的机制联系。这些见解为植物蛋白基鲜奶油替代品的合理设计和优化提供了坚实的理论基础。

部分节选

材料

表1列出了本研究中使用的所有材料和试剂。

蛋白质储备液的制备

首先,在去离子水中制备了SC、GMP、PPI和SPI的储备液(浓度为0.6% w/w,即最终系统浓度),并在50°C下搅拌1小时。搅拌后,测量了每种分散液的初始pH值(SC:6.97,GMP:6.91,PPI:7.01,SPI:6.90)。然后在室温(约15–18°C)下 hydration 12小时。最后,所有储备液均储存在4°C下,并在24小时内使用。

乳液的制备和水相蛋白质的提取

物理和化学性质分析

所有蛋白质溶液的pH值为6.9 ± 0.1。在这种接近中性的pH条件下,ζ-电位反映了由可离子化氨基酸残基决定的净表面电荷(Huang et al., 2026)。图1A–H总结了原始蛋白质和乳化后回收的水相的外观、体积平均粒径(d4,3)、多分散性指数(PDI)和ζ-电位。在初始状态下,动物蛋白(SC,GMP)形成透明至半透明的

结论

本研究表明,植物蛋白基鲜奶油的较差起泡性能并不完全由原材料的固有特性决定,而是与乳化过程中发生的选择性分配或耗尽密切相关。在乳化过程中,具有强界面活性的植物蛋白成分(即通过共价二硫键连接的分子量为66–175 kDa的高分子聚合物)会优先从水相中耗尽

CRediT作者贡献声明

邓一秋:撰写——初稿,形式分析,数据整理。韩万军:撰写——初稿,实验研究。林一婷:撰写——审稿与编辑,形式分析。柴秀航:方法学研究,形式分析。陈凤翔:撰写——审稿与编辑。刘远发:撰写——审稿与编辑,资源协调。

资助

本研究得到了中国国家自然科学基金(项目编号:32202082)、中国国家重点研发计划(项目编号:2022YFD2100300)的支持,并获得了广东省科学技术厅(项目编号:2022B0202010003)的资助。资助者在研究设计、数据收集与分析、手稿撰写或结果发表决策方面没有参与任何作用。

利益冲突声明

作者声明他们没有已知的财务利益或个人关系可能影响本文报告的工作。

致谢

本研究得到了中国国家自然科学基金(项目编号:32202082)的支持,由中国国家重点研发计划(项目编号:2022YFD2100300)资助,并获得了广东省科学技术厅(项目编号:2022B0202010003)的资助。
邓一秋|韩万军|林一婷|柴秀航|陈凤翔|刘远发中国江南大学食品科学与技术学院食品科学与技术国家重点实验室,功能性食品国家工程研究中心,谷物发酵技术国家工程实验室,江苏省食品安全与质量控制协同 innovation 中心,无锡,214122
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