靶向日本脑炎病毒必需基因的siRNA及其多靶点鸡尾酒疗法在体外抑制病毒复制的研究

《Scientific Reports》：A rational multi-target RNA interference approach for effective suppression of Japanese encephalitis virus replication

　　

摘要

日本脑炎病毒（JEV）是亚太地区病毒性脑炎的主要病因，由于疫苗覆盖率不理想且缺乏获批的抗病毒疗法，它仍然是一个重要的公共卫生问题。RNA干扰（RNAi）提供了一种序列特异性方法以抑制病毒基因表达，是一种前景广阔的抗病毒策略。在此，我们设计了一系列靶向日本脑炎病毒必需基因（包括prM、NS1、NS3和NS5）特定区域的微小干扰RNA（siRNAs），并在HeLa细胞中评估了其抗病毒效力。单个siRNA在维持超过85%细胞活力的同时，降低了病毒蛋白表达和感染性病毒的产生。一种多靶点siRNA鸡尾酒疗法将病毒复制降低至错序对照水平的约5–6%，并在日本脑炎病毒感染后保持了细胞活力。在所测试的条件下，单个siRNA和鸡尾酒疗法均未产生相对于错序对照可检测的蛋白激酶R磷酸化增加。这些发现支持了在体外通过多靶点RNAi介导抑制日本脑炎病毒复制的可行性，并为进一步评估基于RNAi的抗相关黄病毒方法提供了基础。