髓系免疫调节受体基因MRC1多态性与急性髓系白血病表达及预后的关联

《Frontiers in Immunology》：Associations of polymorphisms in the myeloid immunoregulatory receptor gene MRC1 with expression and prognosis in acute myeloid leukemia

　　

背景：急性髓系白血病（acute myeloid leukemia, AML）表现出显著的生物学和临床异质性，这种异质性超越了白血病内在的遗传学改变。MRC1编码髓系受体CD206，已被认为与AML中的单核细胞分化和免疫调节状态有关。研究人员探讨了MRC1变异rs691005和rs2253120是否与AML的发生、发展和预后相关。方法：研究人员对335例AML患者和326例健康对照者的rs691005和rs2253120进行了基因分型。在共显性、显性和隐性模型下，检查了这些变异与AML易感性、细胞遗传学异常、危险分层、两个疗程后完全缓解以及总生存期（overall survival, OS）的关联。使用多变量Cox回归评估独立预后效应。利用GTEx eQTL数据以及原代AML骨髓CD34⁺细胞中按基因型分层的表达测量，评估SNP与MRC1表达之间的关系。使用TCGA数据集评估AML中MRC1表达和生存情况。使用研究人员所在中心产生的单细胞RNA测序数据集进行虚拟MRC1敲低和通路分析。结果：两种变异均与AML易感性、细胞遗传学异常或早期缓解无关。rs691005与不良危险分层相关，并在Kaplan-Meier分析中显示出与较短OS的名义关联。rs2253120 AA纯合性与多变量调整后改善的OS相关，并与GTEx和原代AML样本中较低的MRC1表达相关。在TCGA-LAML中，较高的MRC1表达与较差的OS相关。虚拟MRC1敲低揭示了与髓系分化、粘附、细胞因子产生和免疫调节相关的探索性富集模式。结论：MRC1 rs691005与不良危险分层和较短OS相关，而rs2253120 AA纯合性与更好的OS和较低的MRC1表达独立相关。这些发现支持MRC1基因座的遗传变异在AML的临床和免疫异质性中可能发挥作用。

急性髓系白血病（acute myeloid leukemia, AML）的生物学和临床异质性长期以来被归因于白血病细胞内在的遗传学与表观遗传学改变，然而这些异常并不能充分解释患者之间在分化状态、免疫微环境及治疗结局上的显著差异。近年来，单细胞转录组和免疫学研究提示，AML中的免疫逃逸与耐药可能受到遗传变异、细胞分化状态和免疫细胞相互作用的共同调控。MRC1（编码髓系受体CD206）是一种C型凝集素受体，参与配体内化、抗原加工和免疫调节。在AML中，MRC1不仅表达于骨髓巨噬细胞，也表达于单核细胞样白血病亚群，并与免疫抑制性微环境和不良预后相关。但导致MRC1表达及AML结局个体差异的遗传因素仍不清楚。基于此，研究人员聚焦于MRC1基因的rs691005和rs2253120两个单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphism, SNP），系统探讨其与AML易感性、危险分层、治疗反应、总生存期（overall survival, OS）及表达调控的关联。该研究发表在《Frontiers in Immunology》。

研究人员纳入山东大学齐鲁医院的335例AML患者和326例健康对照，对rs691005和rs2253120进行基因分型，并在共显性、显性和隐性遗传模型下分析其与AML易感性、细胞遗传学异常、危险分层、两个疗程后完全缓解（complete remission, CR）及OS的关联；采用多变量Cox回归评估独立预后效应。利用GTEx表达数量性状位点（expression quantitative trait locus, eQTL）数据库和17例具有匹配标本的原代AML骨髓CD34⁺细胞进行基因型分层表达验证（实时荧光定量PCR）。使用TCGA-LAML队列评估MRC1表达与预后的关系，并利用该中心产生的单细胞RNA测序数据进行虚拟MRC1敲低和基因集富集分析（gene set enrichment analysis, GSEA）。

研究人群与SNP质量控制：共纳入335例AML和326例对照，两组年龄和性别分布有差异，后续分析中作为协变量调整。AML患者中56例（17%）为急性早幼粒细胞白血病（M3），279例（83%）为非M3。非M3患者中，低危59例（21%）、中危127例（46%）、高危93例（33%）。189例可评估患者中，145例（77%）在诱导化疗两个疗程后达CR。两个SNP的基因型分布均符合哈迪-温伯格平衡。

MRC1基因多态性与AML易感性的关系：在三种遗传模型下，rs691005和rs2253120均与AML易感性无显著关联（p>0.05）。

MRC1基因多态性与细胞遗传学异常的关系：在非M3 AML患者中，两个SNP均与染色体核型异常无显著关联（p>0.05）。

MRC1基因多态性与基线外周血特征的关系：两个SNP均与白细胞计数、血红蛋白水平和血小板计数的分组无显著关联。

MRC1 rs691005与AML危险分层相关：rs691005在共显性和显性模型下与危险分层显著相关（p=0.002和p<0.001）。经年龄和性别校正的多元有序Logistic回归显示，TC和CC基因型（共显性模型）以及TC/CC（显性模型）与更高风险分层显著相关（OR分别为2.472、2.751和2.550），且经错误发现率（false discovery rate, FDR）校正后仍显著（FDR校正p=0.006）。rs2253120与危险分层无关。

MRC1 SNPs与诱导化疗反应的关系：在189例可评估患者中，未发现任一SNP与两个疗程后CR显著相关。

MRC1 rs2253120和rs691005与AML总生存期相关：Kaplan-Meier分析显示，rs2253120在隐性模型下与OS相关（p=0.033），AA基因型患者OS优于GG+GA携带者；rs691005在显性模型下与OS相关（p=0.020），TT基因型患者OS优于TC+CC携带者。

MRC1 rs2253120与AML患者预后相关：多变量Cox回归调整年龄、危险分层、白细胞计数和化疗状态后，rs691005不再独立影响OS（HR=1.262，95%CI=0.917-1.736，p=0.153），而rs2253120 AA基因型在隐性模型下仍独立预测更好的OS（HR=0.364，95%CI=0.134-0.990，p=0.048）。

MRC1 rs2253120与AML中MRC1表达和临床结局相关：GTEx数据显示，rs2253120 A等位基因与全血及内脏脂肪组织中较低MRC1表达显著相关。在原代AML骨髓CD34⁺细胞中，GA和AA基因型携带者的MRC1表达低于GG基因型，AA携带者最低。TCGA-LAML队列中，AML样本MRC1表达高于正常对照，高MRC1表达组OS较差。虚拟MRC1敲低后的GSEA显示，正富集通路涉及核糖核蛋白复合物生物发生、白细胞迁移、单核细胞分化和细胞-基质粘附；负富集通路涉及MAPK信号、细胞因子产生、免疫效应调节、适应性免疫和血管过程，但这些通路变化均未达FDR显著水平，属于探索性发现。

讨论部分指出，两个MRC1变异并非与疾病易感性或早期治疗反应相关，而是与后续临床进程的不同特征相关。rs691005与不良危险分层相关，其与较短OS的关联可能部分由危险分层介导，而非独立预后因素。rs2253120 AA纯合性与更好的OS独立相关，并与较低的MRC1表达一致；高MRC1表达与不良生存相关，提示rs2253120可能通过调控MRC1表达影响长期疾病控制，而非初始诱导缓解。虚拟敲低结果提示MRC1可能涉及髓系分化、细胞粘附、细胞因子产生和免疫调节等过程，但尚需实验验证。该研究存在单中心、回顾性设计、样本量有限等局限，结果需在更大独立队列中确认。

研究结论：在本研究中，MRC1 rs691005与较差的AML危险分层和较短的总生存期相关，而rs2253120 AA纯合性与改善的总生存期独立相关。研究人员还观察到rs2253120基因型、MRC1表达和临床结局之间存在一致的定向关系：A等位基因携带者与较低的MRC1表达相关，而高MRC1表达与较差的生存相关。这些发现提示MRC1基因座的遗传变异可能有助于AML临床行为的差异，但仍需在更大独立队列中验证，并开展直接的功能学研究。