《Equine Veterinary Journal》：Evaluation of a new immunoassay for measuring equine serum insulin and plasma adrenocorticotrophic hormone: A method comparison study
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背景：胰岛素调节障碍（ID）和垂体中间部功能障碍（PPID）是常见的马属动物内分泌疾病，通过检测循环中胰岛素和促肾上腺皮质激素（ACTH）浓度来发现。不同检测方法可能产生不同结果，限制了可比性。
目的：比较专门为检测马胰岛素（VIDAS? Equine In
背景：胰岛素调节障碍（ID）和垂体中间部功能障碍（PPID）是常见的马属动物内分泌疾病，通过检测循环中胰岛素和促肾上腺皮质激素（ACTH）浓度来发现。不同检测方法可能产生不同结果，限制了可比性。
目的：比较专门为检测马胰岛素（VIDAS? Equine Insulin；酶联荧光法[ELFA]）和马ACTH（VIDAS? Equine ACTH；ELFA）而开发的免疫测定方法，与使用IMMULITE 2000XPi检测的化学发光免疫测定法（CLIA）、使用TOSOH Automated Immunoassay Analyser-360检测的化学发光酶免疫测定法（CLEIA）以及一种马胰岛素酶联免疫吸附测定法（ELISA；Mercodia）所得结果。
方法：将提交至商业实验室的样本中的残余血清（n=242）和残余血浆（n=337）分别同时使用CLIA和ELFA进行检测。在亚组样本中，还使用CLEIA（胰岛素n=126；ACTH n=76）和ELISA（胰岛素n=76）测定浓度。此外，使用ELFA测定了139匹健康马匹血浆中[ACTH]浓度。
结果：胰岛素检测的中位（95%置信区间）差异为：CLIA–ELFA 1.6（0.1–3.3）μIU/mL，CLEIA–ELFA 11.3（8.7–13.4）μIU/mL，ELISA–ELFA 3.7（1.0–6.3）μIU/mL，CLIA–CLEIA 7.3（5.1–9.5）μIU/mL；ACTH检测的差异为：CLIA–ELFA 19.7（16.8–25.1）pg/mL，CLEIA–ELFA 10.7（6.9–15.5）pg/mL，CLIA–CLEIA 23.7（9.0–42.5）pg/mL。胰岛素检测各对之间以及ELFA与CLEIA ACTH检测之间的相关性为强（R>0.8）或极强（R>0.9），其他ACTH检测对之间为中等（R>0.6）。Bland–Altman分析显示所有检测对之间存在中等偏倚和较宽的95%一致性界限。使用针对ELFA测得的[胰岛素]和[ACTH]调整的诊断界值进行三分类，显示实质性一致。确定了健康马匹血浆[ACTH]的参考范围。
主要局限性：残余样本采集于7月至11月，健康马匹样本不包括矮马。
结论：这些检测方法得出的绝对值不同，但大多数检测对之间的一致性以及用于PPID诊断和蹄叶炎风险的三分类一致性良好。
该研究发表于《Equine Veterinary Journal》，针对马常见内分泌疾病——胰岛素调节障碍（ID）和垂体中间部功能障碍（PPID）的检测问题展开。ID和PPID分别通过循环胰岛素和促肾上腺皮质激素（ACTH）浓度检测发现，但商业实验室目前使用多种免疫测定方法，不同方法的结果存在差异，影响临床可比性和诊断界值应用。为此，研究人员评估了专门为马开发的VIDAS? Equine Insulin和VIDAS? Equine ACTH酶联荧光法（ELFA），将其与化学发光免疫测定法（CLIA，IMMULITE 2000XPi）、化学发光酶免疫测定法（CLEIA，TOSOH AIA-360）及马特异性胰岛素酶联免疫吸附测定法（ELISA，Mercodia）进行比较，并建立健康马血浆ACTH参考范围。该研究旨在为临床提供性能可靠、物种特异的新检测选项，并确定与现有方法对应的诊断界值。
主要技术方法：研究人员使用提交至商业实验室的242份残余血清和337份残余血浆，分别用CLIA和ELFA同步检测胰岛素或ACTH；部分样本另用CLEIA（胰岛素和ACTH）及ELISA（胰岛素）复测。另对139匹健康马（3月和10月采样）用ELFA测定血浆ACTH以建立参考范围。统计方法包括Wilcoxon符号秩检验、Friedman检验、Spearman相关、Passing-Bablok回归、Bland-Altman分析、ROC曲线最大Youden指数法及Kappa一致性分析；参考范围按非参数方法计算。
研究结果
胰岛素方法比较：通过242份样本配对比较发现，CLIA与ELFA测得的胰岛素浓度显著不同（p<0.0001）；76份样本四法比较显示，CLEIA与其他三种方法的结果显著不同。中位差异CLIA–ELFA为1.6 μIU/mL，CLEIA–ELFA为11.3 μIU/mL，ELISA–ELFA为3.7 μIU/mL，CLIA–CLEIA为7.3 μIU/mL。各检测对Spearman相关为强至极强（R=0.88–0.95），但Bland-Altman分析显示偏倚较大、95%一致性界限较宽。基于CLEIA用于蹄叶炎相关高胰岛素血症风险分层的界值（<21.6、21.6–45.2、>45.2 μIU/mL），ROC分析确定ELFA
