多聚脱氧核糖核苷酸通过A2A受体相关抗炎反应减轻四氯化碳诱导的急性肝损伤

《Life》：Polydeoxyribonucleotide Attenuates Carbon Tetrachloride-Induced Acute Liver Injury Through A2A Receptor-Related Anti-Inflammatory Responses

　　

背景/目的：多聚脱氧核糖核苷酸(PDRN)具有抗炎和组织保护作用，与腺苷A2A受体(A2AR)激活相关。尽管PDRN的肝脏保护作用已有报道，但其在急性肝损伤(ALI)中与高迁移率族蛋白框1(HMGB1)相关炎症反应及肝巨噬细胞聚集的潜在关联尚不清楚。本研究考察PDRN是否影响HMGB1和单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)相关反应以及肝巨噬细胞聚集。方法：以四氯化碳(CCl4)诱导ICR小鼠ALI。PDRN单独或与选择性A2AR拮抗剂3,7-二甲基-1-丙炔基黄嘌呤(DMPX)联用。定量血清天冬氨酸氨基转移酶、丙氨酸氨基转移酶和乳酸脱氢酶。苏木精-伊红染色评估组织学改变。F4/80免疫荧光评估肝巨噬细胞聚集。酶联免疫吸附试验量化HMGB1、MCP-1、白细胞介素-10(IL-10)、环磷酸腺苷(cAMP)和A2AR。结果：PDRN显著降低ALI后血清肝损伤标志物并减轻病理损伤，减少F4/80阳性巨噬细胞聚集，降低血清和肝组织中HMGB1和MCP-1水平，同时升高IL-10、cAMP和A2AR水平。结论：PDRN减轻CCl4诱导的ALI，伴随HMGB1和MCP-1水平下降、肝巨噬细胞聚集减少及A2AR/cAMP信号增强；结果表明巨噬细胞相关炎症反应调控可能参与PDRN的肝脏保护作用。

研究背景方面，急性肝损伤(ALI)可由病毒感染、药物毒性、酒精及环境毒素等导致肝功能障碍，肝细胞损伤后可触发炎症反应并加重组织损害。高迁移率族蛋白框1(HMGB1)是核蛋白，细胞损伤或坏死后释放至细胞外，激活炎症信号并促进免疫细胞招募；HMGB1可通过下游炎症信号促进单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)产生，而MCP-1在单核细胞和巨噬细胞招募中起核心作用。已有研究证明多聚脱氧核糖核苷酸(PDRN)源自鲑科动物DNA，主要通过激活腺苷A_2A受体(A_2AR)增加细胞内环磷酸腺苷(cAMP)并调节炎症，但PDRN是否影响ALI中HMGB1-MCP-1相关反应及肝巨噬细胞聚集仍不明确。因此研究人员在ALI模型中探讨PDRN是否经A_2AR相关信号降低HMGB1、MCP-1并减少巨噬细胞聚集。该研究发表于《Life》。

主要关键技术方法方面，研究人员使用6周龄雄性ICR小鼠，设对照组、CCl₄组、CCl₄-PDRN组、CCl₄-PDRN+DMPX组。以CCl₄腹腔注射诱导ALI，PDRN腹腔给药，DMPX作为选择性A_2AR拮抗剂联用。终点采集血清与肝组织，用自动生化分析仪测天冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、乳酸脱氢酶(LDH)；肝组织行苏木精-伊红(H&E)染色并盲法损伤评分；F4/80免疫荧光量化肝巨噬细胞聚集；酶联免疫吸附试验(ELISA)测血清及肝匀浆中HMGB1、MCP-1、白细胞介素-10(IL-10)、cAMP、A_2AR；Western blot检测A_2AR蛋白；组间比较采用单因素方差分析与Tukey检验。

研究结果方面，3.1 PDRN Treatment Attenuated CCl₄-Induced Hepatocellular Injury：通过血清AST、ALT、LDH检测，研究人员发现CCl₄显著升高三者，PDRN降低其升高幅度，DMPX部分逆转该保护效应，说明PDRN减轻肝细胞损伤并涉及A_2AR相关信号。

3.2 PDRN Treatment Improved Histopathological Alterations in the Liver：通过H&E染色与损伤评分，对照组肝结构正常，CCl₄组出现肝细胞变性、炎细胞浸润及小叶中心坏死，PDRN组病变减轻，DMPX削弱保护；肝体比在CCl₄组升高，PDRN降低损伤评分，表明PDRN改善组织病理学改变。

3.3 PDRN Treatment Reduced Hepatic Macrophage Accumulation：通过F4/80免疫荧光，CCl₄组F4/80阳性面积显著增加，PDRN减少肝巨噬细胞聚集，DMPX减弱该作用，证实PDRN降低肝巨噬细胞累积且依赖A_2AR部分参与。

3.4 PDRN Treatment Suppressed HMGB1 and MCP-1 Expression：通过ELISA测血清与肝组织，CCl₄升高HMGB1与MCP-1，PDRN显著下调两者，DMPX部分反转；结果显示PDRN抑制HMGB1和MCP-1并伴随巨噬细胞聚集减少。

3.5 PDRN Treatment Enhanced A_2AR-Related Anti-Inflammatory Responses：通过ELISA与Western blot，CCl₄组A_2AR略降但不显著，PDRN提升A_2AR、cAMP及IL-10，DMPX逆转这些升高，说明PDRN增强A_2AR/cAMP抗炎反应并提高抗炎细胞因子IL-10。

讨论部分总结方面，研究人员指出ALI中肝细胞损伤与炎症密切相关，PDRN此前已被证明可抑肝细胞凋亡与促炎因子。本研究新增证据表明PDRN在ALI中同步降低HMGB1、MCP-1并减少F4/80阳性巨噬细胞，且A_2AR、cAMP、IL-10升高；DMPX部分逆转说明A_2AR参与但非唯一机制。研究局限包括未直接用靶向手段证明HMGB1与MCP-1因果关系，未区分巨噬细胞亚群，未直接检测关键促炎通路，结果限于CCl₄诱导ALI模型。总体意义在于把PDRN肝脏保护从肝细胞层面扩展到HMGB1-MCP-1-巨噬细胞聚集轴与A_2AR相关抗炎信号。

结论部分翻译：PDRN减轻CCl₄诱导的ALI，降低HMGB1和MCP-1水平以及肝巨噬细胞聚集；这些变化伴随A_2AR和cAMP水平升高，并被DMPX部分逆转。综上，HMGB1相关炎症反应与肝巨噬细胞聚集的调控可能参与PDRN对ALI的肝脏保护作用；因结果来自CCl₄诱导ALI模型，其适用于其他肝损伤类型尚待验证。该发现深化了对PDRN抗炎反应的认识，并支持进一步研究其用于ALI的治疗潜力。