基于接种量效应与新型脂质体-MIC竞争测定法，重新探讨达托霉素的作用机制

《Biophysical Journal》：Revisiting the mode of action of daptomycin considering the inoculum effect and a novel liposome-MIC-competition assay

　　

摘要

达托霉素（DAP）是一种用于静脉注射的环状脂肽类抗生素，对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）等革兰氏阳性菌具有抗菌活性。尽管已有大量研究，其作用机制仍颇具争议。这在一定程度上是因为研究者在涉及最低抑菌浓度（MIC）时，忽略了达托霉素活性对菌落数的强烈依赖性——即所谓接种物效应。本文的第一个目标是定量表征达托霉素对MRSA的接种物效应，并据此重新审视不同菌落数条件下所记录的数据对比。数据表明，与生长抑制达到最低水平的MRSA处于平衡状态的水溶液中达托霉素浓度为0.24 μg/mL，而相应的每个细菌结合的抑制性药物负荷为R_e^bac? = 1.0E+7。为直接比较不同菌落数下观察到的现象，样品之间必须在R_e^bac?上保持一致，而非在达托霉素浓度上一致。第二个目标是使脂质体模型系统的数据在定量上与体内数据具有可比性。这通过脂质体-MIC-竞争法实现，即将细菌和脂质体结合在同一个MIC实验中进行。该方法提示等效磷脂酰甘油浓度为3.5E-8 μM/(CFU/mL)，从而可实现模型研究与体内系统之间的重新对应。最后，将本文所获数据与每个细菌常见脂质量估计值相结合，表明大部分结合于细菌的达托霉素并不定位于细胞膜，而最可能存在于细胞壁中。脱靶结合是膜活性抗生素的一个关键问题。