《Journal of Plant Diseases and Protection》:Transcriptomic responses of rice (Oryza sativa) during interaction with plant growth-promoting bacteria associated with systemic resistance to Burkholderia glumae
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从商业水稻(Oryza sativa)中分离并经分子鉴定定的草螺菌(Herbaspirillum seropedicae)菌株HS09,在温室条件下对稻叶鞘腐败病菌(Burkholderia glumae)具有生物防治潜力。然而,HS09在水稻中针对B. gl
从商业水稻(Oryza sativa)中分离并经分子鉴定定的草螺菌(Herbaspirillum seropedicae)菌株HS09,在温室条件下对稻叶鞘腐败病菌(Burkholderia glumae)具有生物防治潜力。然而,HS09在水稻中针对B. glumae诱导系统抗性(ISR)的分子机制仍不清楚。研究人员通过转录组分析研究了促进植物生长细菌介导的水稻对B. glumae系统抗性的分子基础。试验设4个处理:不处理对照、接种内生菌HS09、接种病原菌B. glumae、以及先接种HS09再接种B. glumae的诱导处理。每处理用90粒种子,在受控温室条件下随机分布。结果表明,HS09激活关键防御相关信号通路,尤其是茉莉酸(JA;JAMyb、MYC2)与乙烯(ET;EIN3、EILs、ERF转录因子)介导的通路。此外,与钙依赖信号和超敏反应(HR)相关的Rboh和CaMCML基因上调,表明Ca2?介导的防御激活参与。富集分析还显示苯丙烷生物合成通路被诱导,促进异黄酮等抗菌次生代谢物产生。值得注意的是,诱导处理中唯一鉴定出404个差异表达基因(DEGs),支持HS09在启动多类病原防御分子通路中的作用。这些发现凸显H. seropedicae HS09作为防治B. glumae的可持续生物防治剂潜力,并支持其纳入作物保护项目与政策,以减少化学农药依赖、推动水稻生产体系环境友好型病害管理。
研究背景方面,水稻是全球重要粮食作物,稻叶鞘腐败病菌(Burkholderia glumae)引起细菌性穗枯病,在高湿高温环境下造成减产。化学防治依赖草酸宁酸等药剂,但耐药菌株已出现,防控难度上升。已有研究关注植物促生微生物与内生菌,但内生草螺菌(Herbaspirillum seropedicae)HS09如何于水稻中针对B. glumae诱导系统抗性(ISR)的分子事件仍鲜有阐明。因此,研究人员以感病品种Fedearroz 68(F68)为材料,用HS09与强毒株B. glumae 43 A(Bg43A)构建处理,借助转录组学揭示ISR遗传网络。
主要技术方法上,研究人员使用哥伦比亚Fedearroz 68(F68)水稻种子、病原菌B. glumae 43 A(Bg43A)与内生菌Herbaspirillum seropedicae HS09;设对照、病原、内生菌、互作四类处理并取样。总RNA经去除核糖体RNA建库,于Illumina NovaSeq 6000测序;序列比对至IRGSP-1.0水稻参考基因组,用HISAT2、StringTie重构转录本,DESeq2鉴定差异表达基因(DEG),Blast2GO做基因本体(GO)注释,KOBAS 2.0做KEGG通路注释,并以实时荧光定量PCR(RT-qPCR)验证POD、PAL、CHI、LOX、OPR7、AIA等基因。
结果部分保留小标题如下。效应为水稻幼苗生长影响:研究人员通过表型观测与活力指数统计发现,Bg43A处理幼苗生长受阻、萎蔫、根毛稀少;HS09预处理后再接种病原的诱导处理无病斑,活力指数Ⅰ较病株高约76%,说明HS09降低B. glumae对F68幼苗为害。差异表达基因筛查:5天接种后(5 dpi)诱导处理鉴定DEG最多(806个),其中上调501个;7 dpi数量下降,但诱导处理仍富集防御类别;维恩分析无三处理共有DEG,诱导处理有独占DEG,提示防御启动状态。防御相关基因表达谱:核苷酸结合亮氨酸富集重复(NB-LRR)基因如RGA5-like、Pik-2-like在诱导处理上调,提示效应子触发免疫(ETI);模式识别受体(RLK/RLP)中FLS2、WAK等上调,表明病原相关分子模式触发免疫(PTI)与细胞壁屏障增强;病程相关蛋白(PR)、几丁质酶、过氧化物酶、萌发素样蛋白上调,体现水解与氧化爆发防御;WRKY、NAC、JAMYB等转录因子被诱导;激素信号中脂氧合酶(LOX)、12-氧代植物二烯酸还原酶(OPR)、乙烯响应因子(ERF109/ERF15)显著诱导,说明JA与ET协同。GO与KEGG富集:5 dpi诱导处理富集胁迫应答、氧化还原、防御应答、胞外区;KEGG富集苯丙烷生物合成、角质/木栓质/蜡质生物合成、植物-病原互作;Bg43A单独感染富集有限,呈延迟且不协调防御。RT-qPCR验证:诱导处理在7 dpi时POD、PAL、CHI、LOX、OPR7、IAA表达持续升高,与RNA-Seq趋势一致,说明HS09引发延迟但更强的转录防御。
讨论部分总结:研究人员指出HS09单独定殖时不引发强烈防御,但在B. glumae入侵时把水稻转为“启动态”,使NB-LRR、RLK、PR、过氧化物酶、WRKY、JA/ET、MAPK、Ca2?-钙调素样蛋白(CaM-CML)与超敏反应(HR)通路协调激活;Bg43A单独感染时JAZ抑制JA信号,防御迟滞。HS09通过结构屏障(木质素、木栓质、细胞壁蛋白)与化学防御(ROS、PR、次生代谢物)形成分层免疫。
结论部分翻译:本研究揭示了内生菌H. seropedicae HS09在水稻(Oryza sativa)中针对B. glumae诱导系统抗性的新机制。转录组分析显示,HS09预接种激活广泛防御相关基因与信号通路,包括苯丙烷生物合成、MAPK级联、JA/ET介导信号,而这些在仅染B. glumae的植株中未被激活。HS09处理幼苗的快速转录激活,连同关键转录因子与防御酶的调控,表明该内生菌有效启动植物免疫系统,使病原挑战获得更快、更协调的应答。这些发现凸显H. seropedicae HS09作为病害管理生物制剂的潜力,促进可持续水稻生产,也证明新一代测序工具可用于解析植物-微生物-病原系统中复杂分子互作,为内生菌介导植物免疫研究提供框架。论文发表于《Journal of Plant Diseases and Protection》。