通过功能分析，Shiftless基因被发现具有增强核糖体移码抑制能力的特性

《Communications Biology》：Functional dissection of Shiftless identifies features enhancing ribosomal frameshifting inhibition

　　

摘要

程序性核糖体移位（PRF）是一种对许多病毒基因表达至关重要的基因调控机制。识别并优化干扰PRF的宿主蛋白可以为新的抗病毒策略提供依据。最近发现的人类蛋白Shiftless是一种广谱但效力相对较低的PRF抑制剂，然而目前还缺乏对其功能的全面分析，这阻碍了优化后的Shiftless变体的研发。在这里，我们介绍了一种集成式的高通量筛选系统，该系统能够对大量蛋白质变体对PRF的抑制作用进行定量评估。利用这一平台，我们对Shiftless进行了深度突变处理，并在基于细胞的双荧光报告基因实验中测量了5000多种变异体的活性。结果揭示了关键参与PRF抑制的残基簇，并鉴定出能够增强Shiftless对抗HIV gag-pol基因移位位点活性的突变。这种方法为研究和改造调控其他翻译机制（如PRF和终止密码子读通）的蛋白质提供了一个通用框架。