猪人肉孢子虫（Sarcocystis suihominis）与米氏肉孢子虫（Sarcocystis miescheriana）在波兰供人类食用野猪中的分子检测提示消费者潜在风险

《Zoonoses and Public Health》：Molecular Detection of Sarcocystis suihominis and Sarcocystis miescheriana in Wild Boars Hunted for Human Consumption in Poland Highlights a Potential Risk for the Consumer

　　

野猪与家猪可作为两种肉孢子虫（Sarcocystis）的中间宿主：犬科传播的米氏肉孢子虫（Sarcocystis miescheriana）与人兽共患的猪人肉孢子虫（Sarcocystis suihominis）。人类因食用生的或未煮熟的肉类感染猪人肉孢子虫（Sarcocystis suihominis）。研究人员调查了波兰供人类食用野猪中肉孢子虫属（Sarcocystis spp.）的感染情况。方法：在两个狩猎季采集膈肌样本，应用靶向米氏肉孢子虫（Sarcocystis miescheriana）与猪人肉孢子虫（Sarcocystis suihominis）线粒体DNA细胞色素C氧化酶亚基I（mtDNA cox1）基因的多重聚合酶链反应（multiplex-PCR）；对猪人肉孢子虫（Sarcocystis suihominis）阳性膈肌进行肉孢子囊分离与分子鉴定。结果：241头野猪中216头（90%）检出米氏肉孢子虫（Sarcocystis miescheriana）DNA，其中8头（3.3%）合并感染猪人肉孢子虫（Sarcocystis suihominis）。3头共感染野猪膈肌进一步处理获37个肉孢子囊；37个中2个经鉴定为猪人肉孢子虫（Sarcocystis suihominis），其18S rRNA基因同源性98.9%–100%，cox1线粒体DNA（mtDNA）同源性98.7%；其余13个中12个为米氏肉孢子虫（Sarcocystis miescheriana），1个cox1为1053 bp、18S rDNA为923 bp，与已知肉孢子虫属（Sarcocystis）同源性＜89.1%和95.6%。结论：首次证实波兰供食用野猪携带猪人肉孢子虫（Sarcocystis suihominis）、高比例米氏肉孢子虫（Sarcocystis miescheriana）及疑似新种肉孢子虫（Sarcocystis sp.），食用未煮熟野猪肉的消费者风险不可忽视。

论文解读：《Zoonoses and Public Health》刊载的波兰供人类食用野猪中肉孢子虫属（Sarcocystis；顶复门原虫，具中间宿主与终末宿主的两宿主生活史）分子流行病学研究

研究背景方面，欧洲野味肉消费增长，野猪（Sus scrofa）是波兰等主要狩猎对象。野猪与家猪可作米氏肉孢子虫（Sarcocystis miescheriana；犬科等为终末宿主）和猪人肉孢子虫（Sarcocystis suihominis；人为终末宿主）的中间宿主。常规肉检靠目视与人工消化查旋毛虫（Trichinella spp.），难发现微观肉孢子囊；肉孢子虫病（sarcocystosis）在欧盟非法定报告病，无针对含肉孢子虫肉的专门法规，只能援引Regulation (EU) 2019/627中肉不含寄生虫条款。人肠肉孢子虫病常轻症自限，临床易漏报，真实负担不清。现有欧洲野猪研究多不区分两种虫，猪人肉孢子虫（Sarcocystis suihominis）数据少，波兰野生种群分子证据缺位，故研究人员开展本项检测与风险评估。

研究人员对2022–2023、2023–2024两狩猎季、波兰16省供食用野猪例行旋毛虫（Trichinella spp.）检查剩余膈肌样本241份做分子筛查，发现米氏肉孢子虫（Sarcocystis miescheriana）感染率90%，猪人肉孢子虫（Sarcocystis suihominis）3.3%且均共感染；从3头阳性野猪分离37个肉孢子囊，确认2个猪人肉孢子虫（Sarcocystis suihominis）、12个米氏肉孢子虫（Sarcocystis miescheriana），另1个cox1 1053 bp、18S rDNA 923 bp序列与所有已知肉孢子虫属（Sarcocystis）＜89.1%/95.6%，系统发育落入鹿科相关簇，判为疑似新种肉孢子虫（putative new Sarcocystis sp.）。结论上，首次报告波兰食用野猪中猪人肉孢子虫（Sarcocystis suihominis）流行、米氏肉孢子虫（Sarcocystis miescheriana）高发及可能新种，提示生/半生野猪肉消费具人兽共患传播风险，对完善野味链食品安全监测有意义。

主要关键技术方法：研究人员采用波兰16省两狩猎季野猪膈肌便利样本队列（n=241）；以靶向mtDNA cox1的多重聚合酶链反应（multiplex-PCR）区分猪人肉孢子虫（Sarcocystis suihominis；约400 bp）与米氏肉孢子虫（Sarcocystis miescheriana；约140 bp）；对阳性组织做肉孢子囊显微分离与单囊DNA提取；用SF1/SR11扩cox1、ERIB1–S2与S3–Primer BSarc扩18S rRNA基因测序，并以新引物SUNIF1/SUNIR1补测疑似新种；序列经BLASTn比对、ClustalW比对后以邻接法（Neighbour-Joining）、Kimura双参数模型建系统发育树，以刚地弓形虫（Toxoplasma gondii）为外类群、1000次自举检验。

研究结果部分，3 Results：多重聚合酶链反应（multiplex-PCR）示241头中217头米氏肉孢子虫（Sarcocystis miescheriana；90%，95% CI 85.6%–93.3%），8头共染猪人肉孢子虫（Sarcocystis suihominis；3.3%，95% CI 1.6%–6.5%）；季节与省份间无统计差异；阳性猪分布于西部/中部四省。3头可召回样本得37个肉孢子囊，2个为猪人肉孢子虫（Sarcocystis suihominis），其cox1 1049 bp与18S rDNA 1840 bp同S. suihominis MH404228等98.7%/98.9%–100%；13个非猪人肉孢子虫（S. suihominis）囊中12个为米氏肉孢子虫（S. miescheriana；94.1%–99.9%），1个cox1 1053 bp最佳匹配日本肉孢子虫（Sarcocystis japonica）＜89.1%、18S rDNA 923 bp＜95.6%。cox1树显示波兰米氏肉孢子虫（S. miescheriana）与希腊/意大利/波罗的海株聚支，猪人肉孢子虫（S. suihominis）近意大利野猪株；疑似新种位于鹿科相关S. japonica/S. silva/S. truncata/S. rangiferi/S. tarandi/S. elongata簇，姊妹群为牛科相关S. entzerothi/S. hominis/S. sinensis/S. bovini/S. bovifelis。18S rDNA树印证上述关系。

讨论部分总结：研究人员指出野生种群高米氏肉孢子虫（S. miescheriana）反映狼/狐/猎犬等终末宿主维持循环；猪人肉孢子虫（S. suihominis）在野猪出现意味人类粪便孢子囊污染环境，波兰农村分散污水处理弱、西部生肉传统助传播。人肠肉孢子虫病轻症为主但实验感染S. suihominis较牛人肉孢子虫（S. hominis）更重，历史波兰有人感染但未定种。肉检难辨微观囊，形态学区分S. suihominis与S. miescheriana受囊龄与固定法影响，分子法价值大；本研究增补欧洲S. suihominis序列。疑似新种系统发育近猫科/鼬科终末宿主的鹿科虫簇，令人联想未被分子证实的猫传播S. porcifelis，但是否同种需生命周期研究。宏观病变虽未在本批膈肌记录，但其他研究提示肉孢子虫（Sarcocystis spp.）可致肉眼囊变与胴体损失，应再研。

结论部分翻译：这是首项确认波兰供人类食用野猪中肉孢子虫属（Sarcocystis spp.）流行的研究，揭示米氏肉孢子虫（Sarcocystis miescheriana）极高感染率、人兽共患猪人肉孢子虫（Sarcocystis suihominis）不可忽略的感染率，以及以野猪为中间宿主的疑似新肉孢子虫（Sarcocystis sp.）。尽管猪人肉孢子虫（S. suihominis）检出率有限，但在供食用野猪中发现该人兽共患种仍值得关注，尤其部分地区有生/未熟野味肉传统。需进一步监测食用野猪与家猪肉中的猪人肉孢子虫（S. suihominis），评估消费者因生/半生产品致病的风险。