尼古丁处理的腹腔巨噬细胞条件培养基对类风湿关节炎大鼠模型睾丸功能及精子生成的保护作用

《Scientific Reports》：Protective effects of nicotine-treated peritoneal macrophage–conditioned medium on testicular function and spermatogenesis in an experimental rat model of rheumatoid arthritis

　　

摘要

类风湿性关节炎（RA）是一种慢性系统性自身免疫性疾病，常通过持续的炎症反应、氧化应激和生殖细胞凋亡与男性生殖功能障碍相关联。本研究评估了尼古丁处理的腹腔巨噬细胞条件培养基（N-MCM）对完全弗氏佐剂（CFA）诱导的类风湿性关节炎大鼠模型睾丸损伤和生精障碍的潜在保护作用，并将其疗效与未处理的巨噬细胞条件培养基（U-MCM）和甲泼尼龙进行了比较。35只成年雄性Wistar大鼠被分为五组（n?=?7/组）：健康对照组、关节炎对照组、RA + U-MCM组、RA + N-MCM组和RA + 甲泼尼龙组。通过足底皮下注射CFA诱导关节炎，与健康对照组相比，临床关节炎评分和后爪周径呈显著进行性增加（表1），证实诱导成功。在诱导后第7天和第14天进行腹腔注射给药。第60天进行全面的生殖评估，包括计算机辅助精液分析（CASA）、精子功能检测（活力、形态、膜完整性和由吖啶橙染色评估的染色质完整性/DNA变性）、睾丸组织病理学及形态测量分析（Johnsen评分和Cosentino评分）、氧化应激生物标志物（TAC、SOD、CAT、GPx、MDA、NO）以及凋亡相关基因的qRT-PCR定量分析（Bax、Bcl-2、caspase-3、caspase-9）。RA的诱导导致精子质量明显恶化、睾丸结构破坏、抗氧化防御耗竭以及线粒体凋亡通路的激活（p?≤?0.05）。N-MCM治疗显著改善了精子参数、氧化还原平衡和组织学完整性，并将凋亡相关基因表达降低至与健康对照组无显著差异的水平。这些保护作用显著优于U-MCM和甲泼尼龙（p?≤?0.05），且N-MCM组的大部分生殖终点指标与健康对照组无显著差异。综上所述，这些发现提示尼古丁预处理可能改变巨噬细胞的分泌组，从而赋予免疫调节、抗氧化和抗凋亡保护，以对抗RA相关的男性生殖功能障碍。由于未对分泌组成分进行表征，也未直接测量睾丸炎症介质，因此这些机制仍属假说。然而，尼古丁条件化的巨噬细胞分泌组可能代表一种有前景的无细胞治疗候选药物，用于在慢性炎症性疾病中保护生育能力，值得进一步的机制和转化研究。