《Fish & Shellfish Immunology》：Molecular characterization and functional analysis of On-Siglec2 in the antibacterial response of Nile tilapia to
Streptococcus agalactiae
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•On-Siglec2 在尼罗罗非鱼多种组织中广泛表达。•On-Siglec2 转录在 S. agalactiae 感染后被诱导。•rOn-Siglec2 对多种细菌表现出结合活性。•rOn-Siglec2 给药与对 S. agalactiae 感染的部分保护有关。引言唾液酸
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On-Siglec2 在尼罗罗非鱼多种组织中广泛表达。
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On-Siglec2 转录在 S. agalactiae 感染后被诱导。
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rOn-Siglec2 对多种细菌表现出结合活性。
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rOn-Siglec2 给药与对 S. agalactiae 感染的部分保护有关。
引言
唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素（Siglecs）属于 I 型凝集素家族，通过识别含唾液酸的糖链充当关键的跨膜免疫受体 [1], [2]。在哺乳动物中，Siglec 家族成员通常分为两大类：一类由 CD33 相关 Siglecs 组成，另一类包含更为保守的成员，包括 Siglec1（唾液酸粘附素）、Siglec2（CD22）、Siglec4（MAG）和 Siglec15 [3], [4]。Siglecs 主要表达于造血细胞表面，并参与多种与免疫相关的过程，包括炎症和白细胞增殖的调节、与微生物的相互作用以及与癌症相关的免疫 [5], [6]。
Siglec2，又称 CD22，是 Siglec 家族中表征最为清楚的成员之一，并在脊椎动物中相对保守。在哺乳动物中，它主要表达于 B 细胞，并作为关键的抑制性共受体参与控制 B 细胞活化和维持免疫稳态 [7], [8]。结构上，Siglec2 具有一个介导配体结合的 N 端 V 型免疫球蛋白样结构域，以及一个包含保守的基于酪氨酸的抑制基序的胞质区域。这些基序（包括 ITIMs）可以招募 SHP-1 和其他下游信号分子 [9], [10], [11], [12]。Siglec2 主要识别 α2,6-唾液酸化糖链，配体结合使其能够传递抑制信号以微调 B 细胞反应 [13], [14], [15]。Siglec2 缺陷小鼠的研究进一步表明，Siglec2 的缺失会损害 B 细胞存活和稳态，突显了其重要的免疫调节作用 [16], [17]。除调节 B 细胞活化外，Siglec2 还参与受体转运和 B 细胞归巢相关过程 [18], [19]。与哺乳动物方面广泛的知识相比，关于辐鳍鱼类 Siglec2 的研究仍有限。迄今为止，仅在少数几种辐鳍鱼类中报道了 Siglec2。在Cynoglossus semilaevis 中，Siglec2 被表征为外周血白细胞活化的抑制性调节因子 [20]。在Paralichthys olivaceus 中，Siglec2 已被证明调节 IgM+ B 细胞的巨胞饮依赖性内吞 [21]。因此，本研究表征了 *On-Siglec2* 并调查了其潜在参与抗菌免疫反应的情况。
尼罗罗非鱼（Oreochromis niloticus）是全球主要养殖鱼类之一，罗非鱼养殖在中国水产养殖中占据重要地位 [22]。然而，细菌性疾病仍然是罗非鱼生产的重要制约因素，特别是由Aeromonas hydrophila [23] 和Streptococcus agalactiae [24], [25] 引起的感染。因此，本研究利用基于重组蛋白的测定和体内感染模型对 *On-Siglec2* 进行了功能表征，为其在尼罗罗非鱼抗菌免疫反应中的潜在作用提供了新证据。
章节摘要
实验动物
健康的尼罗罗非鱼（Oreochromis niloticus；50 ± 10 克）来自中国广东省湛江市的一家商业养殖场。实验使用前，鱼类在 1000 升淡水缸中适应 3 周，持续曝气，每个缸 50 条鱼，相当于初始放养密度约为 2.5 千克/立方米。适应期间，每日饲喂商业饲料一次，剂量约为体重的 5%。水质维持在
On-Siglec2 的特性
*On-Siglec2* 的开放阅读框（ORF）长度为 1767 碱基对，编码一个由 588 个氨基酸组成的 I 型跨膜蛋白，预测等电点（pI）为 4.71，理论分子量约为 65 kDa。推定的蛋白在第 1-23 位残基处含有一个信号肽。保守域分析显示 *On-Siglec2* 包含两个 Ig 结构域（第 24-115 和 314-410 位氨基酸），一个 Ig 样结构域（第 119-196 位氨基酸），一个 IgC2（第 423-483 位氨基酸），
讨论
在本研究中，鉴定并表征了尼罗罗非鱼的 Siglec2，命名为On-Siglec2。预测的 *On-Siglec2* 蛋白具有信号肽、多个免疫球蛋白样结构域和跨膜区域，显示出 Siglec 家族的特征性结构组织。与这些结构特征一致，序列比对和系统发育分析将 *On-Siglec2* 归入辐鳍鱼类 Siglec2 谱系，与来自的同源物关系最密切
伦理声明
动物实验已获得广东海洋大学动物研究与伦理委员会批准，批准号为 202500521。
CRediT 作者贡献声明
Qi Ye：概念化，数据整理，写作 - 初稿。Yongxiong Huang：资源，写作 - 审阅与编辑。Jiayi Xu：资源，验证。Yu Huang：项目管理，写作 - 审阅与编辑及资金获取。Jichang Jian：写作 - 审阅与编辑及资金获取。
资助
本研究由国家自然科学基金（编号：32573551）和广东省教育厅“百千万”工程资助项目（编号：2025ZDZX4016）资助。
利益冲突声明
作者声明，本研究是在不存在任何可能被解释为潜在利益冲突的商业或金融关系的情况下进行的。
Qi Ye|Yongxiong Huang|Jiayi Xu|Yu Huang|Jichang Jian
