综述：UNITE?技术：利用溶酶体靶向疫苗转化过敏治疗

《Allergology International》：UNITE? Technology: Translating lysosomal targeting vaccines for allergy therapy

　　

过敏性疾病影响全球30%–40%的人口，且患病率持续上升，造成了巨大的临床和经济负担。目前的治疗方法——包括抗组胺药、皮质类固醇、生物制剂和过敏原免疫治疗——主要提供症状缓解，或需要长期治疗且疗效不一，并存在不良反应风险。目前仍迫切需要能够安全且持久地重编程潜在免疫反应的治疗策略。UNITE?（Universal Intracellular Targeted Expression，通用胞内靶向表达）技术由Immunomic Therapeutics公司开发，是一种专有的溶酶体靶向疫苗平台，旨在通过溶酶体相关膜蛋白-1（LAMP-1）通路增强抗原呈递，以满足这一需求。通过将抗原引导至内体/溶酶体区室，UNITE?疫苗促进主要组织相容性复合体II类（MHC II）机制的有效参与，并支持平衡的免疫调节。在过敏性疾病临床前小鼠模型中，编码主要过敏原的UNITE?构建体已显示出降低嗜碱性粒细胞活化、降低过敏原特异性IgE滴度，以及增强以干扰素-γ（IFN-γ）产生和IgG4诱导为特征的Th1偏向反应。该平台模块化和可扩展的设计使其能够快速适应多种过敏原，并支持DNA和RNA疫苗形式，促进在肿瘤学、传染病和过敏等治疗领域的整合。这种多功能性允许在保持一致的溶酶体靶向和免疫平衡特性的同时，高效定制抗原载荷。综上所述，这些发现凸显了UNITE?技术作为过敏性疾病下一代有前景的方法——能够提供比当前标准治疗方案更安全、更持久、更精准的免疫再教育。

免疫病理学与过敏性疾病的管理现状

过敏性疾病源于免疫系统对花粉、尘螨、食物和动物皮屑等无害环境抗原的失调反应。其发病机制涉及遗传易感性、环境暴露和上皮-免疫信号网络之间的复杂相互作用。过敏原接触后，上皮细胞释放胸腺基质淋巴细胞生成素（TSLP）、白细胞介素-33（IL-33）和IL-25等警报素，激活树突状细胞（DCs）并驱动初始CD4⁺ T细胞向Th2表型分化。Th2细胞因子——IL-4、IL-5和IL-13——刺激B细胞、肥大细胞和嗜酸性粒细胞产生过敏原特异性IgE，维持超敏状态。随后过敏原暴露交联肥大细胞和嗜碱性粒细胞上FcεRI受体结合的IgE，触发脱颗粒并释放组胺、白三烯和前列腺素，导致血管扩张、支气管收缩和炎症。在组织水平，持续的气道炎症导致杯状细胞增生、上皮下纤维化和平滑肌肥大；特应性皮炎中丝聚蛋白缺乏和细胞因子诱导的紧密连接破坏损害表皮屏障，促进过敏原渗透和微生物定植。嗜酸性粒细胞和肥大细胞形成核心效应轴，其介质损伤上皮表面、募集炎症细胞并增强血管通透性，推动从可逆炎症向不可逆重塑的转变。

当前管理策略旨在通过过敏原回避、药物治疗、生物治疗和过敏原免疫治疗（AIT）控制症状和预防急性发作。抗组胺药、皮质类固醇和白三烯受体拮抗剂提供症状缓解但不改变潜在免疫失调。奥马珠单抗（抗IgE）和度普利尤单抗（抗IL-4Rα）等生物制剂提供特定通路的靶向抑制，但需要持续给药且成本高昂。AIT仍是IgE介导过敏的唯一疾病修饰干预手段，通过反复暴露于受控过敏原剂量，诱导产生阻断IgE结合的过敏原特异性IgG4抗体、扩增产生IL-10和转化生长因子-β（TGF-β）的调节性T细胞并抑制Th2细胞因子。AIT可通过皮下免疫治疗（SCIT）、舌下免疫治疗（SLIT）和口服免疫治疗（OIT）等途径给药，但受限于治疗周期长、全身反应风险和患者反应差异。

LAMP-1介导免疫调节的原理与机制基础

溶酶体相关膜蛋白-1（LAMP-1，CD107a）是一种跨膜糖蛋白，调控内体、溶酶体和多囊泡区室之间的胞内运输。其腔内结构域含有保守的Gly-Tyr基序，作为溶酶体靶向信号，将融合抗原引导至MHC II区室进行有效的肽段加载和呈递给CD4⁺ T细胞。早期研究表明，将抗原整合到全长LAMP-1 cDNA序列中可显著提高免疫原性；缺乏腔内结构域的构建体无法到达溶酶体，表达差且诱导的免疫反应极弱。包含腔内结构域和腺相关病毒反向末端重复序列（AAV-ITRs）可进一步增强表达和抗原呈递，产生比传统DNA疫苗高十倍以上的CD4⁺ T细胞反应和超过10⁵的抗体滴度。机制上，LAMP-1介导的溶酶体靶向重塑了抗原呈递的免疫学环境：在树突状细胞中，LAMP标记抗原与MHC II分子的共定位促进受控的肽加载和平衡的细胞因子信号传导，有利于Th1和调节性T细胞（Treg）活化，表现为IL-10和TGF-β产生增加及Th2细胞因子（IL-4、IL-5、IL-13）受抑，驱动IgG4主导而非IgE主导的抗体反应。溶酶体靶向还上调程序性死亡配体1（PD-L1）和细胞毒性T淋巴细胞相关蛋白4（CTLA-4）等抑制性分子，促进耐受性DC的生成以扩增Treg和Tr1细胞。与其他抗原靶向策略相比，LAMP介导的靶向独特地放大MHC II为中心的呈递和CD4⁺ T细胞辅助功能，特别适合需要免疫偏移或耐受诱导的疫苗。

UNITE?技术平台

UNITE?技术是Immunotherapeutics公司开发的专有溶酶体靶向疫苗平台，将LAMP-1运输的分子原理转化为临床可扩展的免疫治疗系统。UNITE?构建体将重组抗原与LAMP序列融合，LAMP胞质尾含有羧基末端YXX?基序，对溶酶体定位至关重要。在运输过程中，抗原进入富含MHC II分子的区室进行肽段加载，LAMP与MHC II的共定位促进高效抗原加工和呈递，与野生型抗原相比产生增强的CD4⁺ T细胞活化和平衡的体液与细胞免疫。在过敏性疾病模型中，编码UNITE?构建体的核苷酸疫苗被抗原呈递细胞摄取后，溶酶体靶向促进抗原特异性Th1活化和IFN-γ产生，刺激B细胞活化和产生与IgE竞争过敏原结合的过敏原特异性IgG抗体，从而减少肥大细胞脱颗粒和过敏性炎症。该平台具有模块化灵活性，支持多种核酸递送形式，同时通过LAMP融合表达保持溶酶体靶向。在肿瘤学模型中，UNITE?构建体也显示出增强MHC II呈递和驱动强效抗肿瘤免疫的效力，包括ATACT II II期胶质母细胞瘤试验中采用的树突状细胞递送方式。

临床前证据与类似系统

在肿瘤学领域，人表皮生长因子受体2（HER2）-LAMP DNA疫苗的临床前研究表明，将HER2抗原与LAMP-1融合可引导抗原运输至内体/溶酶体区室，产生强效的抗原特异性CD4⁺和CD8⁺ T细胞活化及肿瘤消退。编码梅克尔细胞多瘤病毒（MCPyV）大T抗原的UNITE? DNA疫苗ITI-3000诱导了具有细胞毒性功能的大T特异性CD4⁺ T细胞反应，导致显著的肿瘤生长抑制和生存期延长。靶向巨细胞病毒（CMV）抗原pp65和gB的ITI-1001构建体在胶质母细胞瘤模型中显示出增强的抗原呈递、协调的体液和细胞反应及延长的生存期。ITI-3000（临床试验NCT05422781）和ITI-1001（临床试验NCT05698199）均已完成I期临床试验，确认了安全性和免疫原性。在过敏性疾病中，编码日本柳杉CryJ2过敏原的CryJ2-UNITE? DNA疫苗在临床前研究中诱导了强效抗原特异性IgG2a反应、降低嗜碱性粒细胞活化和过敏原特异性IgE滴度，并将免疫极化从Th2转向Th1。在I期临床试验中，该疫苗显示出安全性、耐受性和探索性疗效，部分参与者皮肤点刺试验从阳性转为阴性。

平台演进与过敏领域的未来应用

UNITE?平台正从第一代LAMP构建体向双顺反子和多顺反子设计演进，共表达LAMP融合蛋白和免疫反应增强基因（IREG）。这些双顺反子构建体（美国专利申请US20250352639A1）可同时表达溶酶体靶向抗原和CD40L、CD80、OX40、IL-12、IL-21、IL-15或Flt3L等免疫刺激分子。其中，IL-21、IL-15和CD40L对过敏性疾病尤为重要，因其增强B细胞分化和IgG主导抗体反应的能力可能抵消IgE介导的超敏反应。除DNA疫苗外，UNITE?已推进至RNA形式，包括mRNA和自扩增RNA（saRNA）。saRNA的自复制机制驱动RNA依赖性RNA聚合酶（RdRP）的胞内产生，进而生成编码目标抗原的亚基因组RNA，从单个saRNA拷贝将抗原表达放大数倍。saRNA疫苗具有非感染性、非整合性，并通过Toll样受体7/8参与天然具有免疫刺激作用，无需外部佐剂。CryJ2-UNITE? saRNA疫苗（ITI-9001）采用脂质纳米颗粒（LNP）递送系统，已获得日本药品和医疗器械管理局（PMDA）批准进行日本柳杉花粉症I期临床试验，这是UNITE? RNA过敏治疗的首个监管授权。saRNA架构的短疗程、小剂量高效免疫激活特性，以及在不同RNA架构（DNA、mRNA、saRNA及潜在的环状RNA）间调节抗原表达持续时间、强度和胞内运输的能力，为过敏免疫治疗提供了灵活的设计空间。

结论

过敏性疾病仍是全球重大健康负担，由持续性Th2主导炎症和过量IgE产生驱动。传统免疫治疗可恢复耐受但受限于长疗程和全身风险。UNITE?技术通过分子设计而非长期暴露来重新校准免疫平衡，提供更安全、更持久的治疗路径。未来方向包括整合CpG或MPLA基序的双顺反子DNA LAMP-vax构建体，以及通过LNP递送的自扩增RNA制剂。这些进展将UNITE? LAMP-vax定位为临床可适应的长期免疫重排框架，重新定义过敏性疾病治疗范式。