《The Cleft Palate Craniofacial Journal》：Evaluation of Serum G Protein-Coupled Estrogen Receptor-1 (GPER-1) Levels in Children With Cleft Palate: A Pilot Controlled Study
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目的：腭裂（Cleft Palate）是最常见的先天性颅面畸形之一，遗传与环境多因素共同参与其病因。G蛋白偶联雌激素受体-1（G Protein-Coupled Estrogen Receptor-1, GPER-1）是一种膜受体，参与细胞增殖、迁移及胚胎发育
目的：腭裂（Cleft Palate）是最常见的先天性颅面畸形之一，遗传与环境多因素共同参与其病因。G蛋白偶联雌激素受体-1（G Protein-Coupled Estrogen Receptor-1, GPER-1）是一种膜受体，参与细胞增殖、迁移及胚胎发育。本研究旨在比较腭裂儿童与健康对照儿童的血清GPER-1水平。材料与方法：本前瞻性对照研究纳入20名0至3岁儿童。腭裂组为10例完全或不完全腭裂患者，对照组为10名无腭裂、无颅面畸形、无已知系统性疾病健康儿童。采集静脉血，离心后于?20°C保存，采用商品化酶联免疫吸附试验（Enzyme-Linked Immunosorbent Assay, ELISA）试剂盒测定血清GPER-1。使用SPSS 20.0进行统计分析，Shapiro-Wilk检验评估正态性，组间比较采用独立样本t检验与Mann-Whitney U检验，显著性水平为P < .05。结果：腭裂组血清GPER-1水平显著低于对照组（10.38 ± 2.66 ng/mL vs 14.13 ± 1.99 ng/mL；P = .038）。该降低提示GPER-1介导的信号传导可能与腭发育相关生物学过程有关。结论：腭裂儿童血清GPER-1水平显著低于健康对照，提示GPER-1介导的雌激素信号可能参与腭发育，需扩大样本量研究以明确其在腭裂发病中的作用。
研究背景方面，腭裂（Cleft Palate）是胚胎期腭突生长、上抬及融合异常导致的常见颅面畸形。其发生涉及遗传与环境因素，但分子机制尚未完全阐明。雌激素在胚胎细胞增殖、分化、迁移和组织构建中具有作用；除经典核雌激素受体外，G蛋白偶联雌激素受体-1（G Protein-Coupled Estrogen Receptor-1, GPER-1）可经MAPK/ERK、PI3K/Akt等通路调控快速细胞信号。腭发育依赖转化生长因子-β（TGF-β）、 Sonic Hedgehog（SHH）、骨形态发生蛋白（BMP）及WNT等通路协调，这些通路与GPER-1所调控的细胞过程存在交汇，因此研究人员提出GPER-1可能参与腭发育与融合，但人类腭形成中GPER-1与上述主通路的直控关系尚未建立。该研究发表于《The Cleft Palate Craniofacial Journal》，其价值在于首次以血清学方式探索GPER-1与儿童腭裂的关联，为后续机制研究提供假设。
关键技术方法上，研究人员开展前瞻性对照研究，样本队列来源于整形重建与美容外科科室，研究对象为0至3岁非综合征型腭裂儿童及年龄匹配健康儿童，每组各10例。血液经非抗凝生化管采集、4°C 5000 × g离心10分钟、血清分装后?20°C冻存。GPER-1检测采用定量夹心酶联免疫吸附试验（Enzyme-Linked Immunosorbent Assay, ELISA）。统计方面以Shapiro-Wilk检验考察连续变量正态性，方差不齐时以Welch独立样本t检验比较组间，并以Mann-Whitney U检验验证；小样本分类变量用Fisher确切检验，效应量计算Cohen's d。
研究结果部分保留小标题如下。Introduction：研究人员综述腭裂发生、雌激素与GPER-1在胚胎发育及细胞过程中的作用，说明GPER-1经MAPK/ERK、PI3K/Akt、cAMP等通路调节增殖、迁移、分化与组织重塑，提出低GPER-1信号可能扰动腭突融合所需细胞环境，从而确立本研究动机。Materials and Methods：研究人员明确研究为前瞻性对照设计，伦理批件为2018年7月4日第15号；入组标准为非综合征型腭裂0至3岁儿童，排除综合征、其他颅面异常、先天畸形及可能影响指标的全身疾病；对照为无腭裂、无颅面异常、无已知系统疾病且年龄匹配儿童。Blood Samples：约3 mL静脉血入非抗凝管，送生化实验室，4°C、5000 × g离心10分钟，血清转至酸洗管?20°C保存。Measurement of Serum GPER-1 Levels：使用SEG045Hu商品化试剂盒按说明书以夹心ELISA测吸光度，依标准曲线算浓度，单位ng/mL。Statistical Analysis：用IBM SPSS 20.0，Shapiro-Wilk评正态性；方差不齐用Welch t检验，并以Mann-Whitney U检验复核；性别分布用Fisher确切检验；算Cohen's d；P < .05为显著。Results：20例中腭裂组10例、对照组10例；年龄13.0 ± 5.9月对17.4 ± 8.4月（P = .37），男6女4对男4女6（P > .05）。GPER-1为10.38 ± 2.66对14.13 ± 1.99 ng/mL（P = .038）。Shapiro-Wilk显示两组均近似正态；Welch t检验P = .038，Mann-Whitney U = 2、P = .032，Cohen's d = 1.60，提示大效应。结论为腭裂组血清GPER-1显著低于对照。Discussion：研究人员指出本研究首次报告腭裂儿童血清GPER-1降低，GPER-1介导雌激素信号可能参与腭发育融合；IRF6、MSX1、TBX22、PVRL1、TGFB3及TGF-β、SHH、BMP、WNT等已知与腭裂相关，GPER-1可能与此网络交互，但需组织与基因层面验证。讨论也强调性别可能对循环GPER-1有影响，本组性别不均虽无统计显著，但小样本下不能排除混杂；产后血清能否代表胚胎期腭发育时GPER-1表达亦未知。局限包括样本小、仅测血清、未分完全与不完全腭裂亚组、无先验效能分析、非性别匹配、产后测量与胚胎事件时间错位。意义在于结果属试点与假说生成性质，提示GPER-1—雌激素信号可作为腭裂病理研究新方向。
结论部分翻译：本试点研究显示腭裂儿童血清GPER-1水平显著低于健康对照组。这些发现提示循环GPER-1与腭发育相关生物学过程可能存在关联；然而性别及其他未测因素的混杂不能排除。因此结果应视为初步且具有假说生成性质。需开展更大规模、性别匹配研究以确认该关联，并阐明GPER-1在腭裂中的作用。
