巴西酸诱导细胞周期阻滞和凋亡，破坏甾醇生物合成，并增强维奈托克在急性髓系白血病细胞中的抗白血病活性

《Cell Biochemistry and Biophysics》：Brusatol Triggers Cell Cycle Arrest and Apoptosis, Disrupts Sterol Biosynthesis, and Enhances the Anti-Leukemic Activity of Venetoclax in AML Cells

　　急性髓系白血病（AML）是一种侵袭性血液恶性肿瘤，预后较差。尽管化疗和靶向治疗已取得显著进展，但复发和化疗耐药仍是主要的临床挑战，这凸显了对新型治疗方法的迫切需求。苦木素（brusatol）是一种天然苦木素类化合物，据报道在多种实体瘤中具有抗肿瘤作用；然而，其在AML中的抗白血病活性及潜在机制仍知之甚少。本研究使用苦木素单独或联合维奈托克（venetoclax）处理THP-1和KG-1a细胞。通过CCK-8法、细胞计数及形态学观察评估增殖情况；通过流式细胞术、Western blot、形态学变化及TUNEL染色检测凋亡；采用RNA-seq结合GO、KEGG及GSEA分析鉴定关键通路；通过流式细胞术分析细胞周期；通过EdU实验检测DNA合成；通过qPCR测量mRNA表达水平；通过Western blot测定蛋白水平。结果表明，苦木素显著抑制AML细胞增殖。此外，苦木素显著提高凋亡率，上调cleaved-PARP和Bax的表达，下调MCL1的表达，并诱导典型的凋亡形态学变化。转录组分析显示，苦木素主要调控细胞周期及类固醇合成相关通路。苦木素下调MCM2、PCNA和CDK2的表达，从而诱导细胞周期停滞并抑制DNA复制。苦木素还显著降低类固醇合成相关关键基因的表达，包括DHCR7、SQLE、EBP和FDFT1。此外，苦木素与维奈托克联合处理相比单药治疗，可增强AML细胞的细胞周期停滞、增殖抑制及凋亡诱导作用。综上所述，苦木素可抑制AML细胞增殖、诱导凋亡、触发细胞周期失调并下调固醇合成相关基因表达，同时增强维奈托克的抗白血病活性。本研究初步阐明了其潜在机制，并为苦木素在急性髓系白血病治疗中的潜在应用提供了实验依据。